基于金属—有机骨架材料及石墨烯的C-反应蛋白免疫分析技术的研究

发布时间：2017-12-11 10:07

本文关键词：基于金属—有机骨架材料及石墨烯的C-反应蛋白免疫分析技术的研究

【摘要】：金属有机骨架材料(MOFs)具有多孔结构、比表面积大、易修饰等特点,已经受到越来越多科研工作者的青睐。SNHKUST-1是Cu-MOF中的一种,具有纳米模拟酶的特性。本文合成了生物相容性好并且具有较强催化性能的中空银铂纳米颗粒(Ag-Pt)、Au/SNHKUST-1纳米复合材料、Pt/SNHKUST-1纳米材料、Pt/MnO2复合材料,并将其用于构建免疫传感器检测C-反应蛋白(CRP)。具体内容如下:(1)通过置换反应水热合成法合成中空银铂纳米材料,并对它进行表征,利用它的催化活性制备了一种灵敏的标记型C-反应蛋白免疫传感器。传感器首先以中空石墨烯为固定材料将C-反应蛋白抗体固定在电极上,采用中空银铂纳米颗粒标记C-反应蛋白抗体,通过夹心法检测C-反应蛋白。在最优的实验条件下,其线性范围为0.1~150 ng/mL,线性相关系数为0.9643,检测限为0.02 ng/mL。(2)在常温下合成了Au纳米颗粒负载的金属有机骨架化合物超纳米结构材料(Au/SNHKUST-1),并以其为标记材料标记C反应蛋白抗体。合成了中空状石墨烯纳米材料和Au纳米颗粒作为固定基质,利用中空石墨烯与玻碳电极之间的π-π吸附再加入导电材料Au,进一步增大固定抗体的数量,制备了夹心型的C-反应蛋白免疫传感器。通过检测标记物对H2O2的催化电流,实现对C-反应蛋白的定量测定。该传感器在C-反应蛋白浓度为0.2ng/mL-200ng/mL的范围内有良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9947,检测下限0.05ng/mL。该传感器为C-反应蛋白测定提供了一种新的简单快速的检测方法。(3)合成了Pt纳米颗粒负载的一种Cu-MOF(SNHKUST-1),并以其作为标记材料,标记C反应蛋白抗体;同时以合成的氧化石墨烯作为固定基质,制备了夹心型的C-反应蛋白免疫传感器。通过检测标记物对H2O2的催化电流,实现对C-反应蛋白的定量测定。该传感器在C-反应蛋白浓度0.1ng/mL-100ng/mL范围内有线性响应,线性方程为I(μA)=0.72894C+1.43293,线性相关系数为0.9915,检测下限为0.033ng/mL,该传感器可用于真实血清样品中CRP的检测。(4)酶联免疫法就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测抗原的一种分析方法。本文在常温下合成了Pt/MnO2颗粒并且使之与葡萄糖氧化酶结合,用来标记CRP抗体。葡萄糖氧化酶(GOx)对β-D(+)葡萄糖具有专一的催化性,生成的中间产物H2O2可以使TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)显色。本实验利用夹心型模拟酶联免疫法(ELISA),采用紫外可见分光光度计(UV-VIS)检测吸光度实现CRP含量的测定。在最优条件下,吸光度值与CRP浓度成正比关系,线性范围为0.05ng/mL-2000.00 ng/mL。本法可用于真实样品中CRP的定量测定。
【学位授予单位】：云南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TB383.1;TP212.3

【参考文献】

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