猬裂头蚴感染小鼠不同时期抵抗裂头蚴入侵的优势抗体检测分析

发布时间：2020-03-30 03:29

【摘要】：目的:检测猬裂头蚴感染小鼠不同时期优势特异性抗体类型,了解特异性抗体在抵抗裂头蚴入侵、移行及定居过程中的作用。方法:1.裂头蚴感染小鼠模型的建立及检测标本的制备:①取昆明小鼠120只,随机分成16组,实验组8组(10只/每组),对照组8组(5只/每组)。将蛇源猬裂头蚴经口感染实验组小鼠(5条/只),建立小鼠感染模型。对照组小鼠不感染,其饲养条件及方式同实验组。②感染不同时间:6小时(h)、1天(d)、7d、14d、28d、56d、91d、126d分别解剖感染小鼠一组,记录回收裂头蚴数量及部位。③于感染后(6h-126d)分别收集实验组及对照组各一组的小鼠的小肠液、腹腔液及血清。2.特异性抗体的检测:①用双抗体夹心ELISA法测定小鼠肠液中的sIgA含量水平;②用间接ELISA法测定腹腔液(IgA、IgE)及血清中的特异性抗体类型或亚型(IgA、IgE、IgM、IgG、IgG1、IgG2b、IgG2c、IgG3)。对照组不感染裂头蚴,肠液、腹腔液及血清的收集方法、时间与检测同实验组。结果:1.感染6h可见裂头蚴分布于小鼠胃肠腔、胃肠壁及腹腔,感染1d大部分裂头蚴穿透胃肠壁到达腹腔,7d之后裂头蚴主要移行至皮下组织,随着感染时间的延长,裂头蚴数目呈不同程度减少。2.小肠液抗体的检测:小鼠感染后,小肠液中的sIgA水平呈上升趋势,于感染后第7d达峰值[(22.05±1.43μg/mL],随后下降,至56d达到感染前水平。3.腹腔液抗体的检测:腹腔液中IgA及IgE于感染后的不同时间段均未检出。4.血清抗体检测(A450值):①IgM于感染后第7d检出(0.551±0.120),7-28d呈上升趋势,于28d达峰值(0.865±0.228),并维持高水平至第56d,随后下降,于感染91d后逐渐降到感染前水平;②IgG于感染后第14d检出(0.724±0.323),14-56d呈上升趋势,第56d达峰值(2.435±0.088),随后下降,于感染后126d仍能检出;③血清IgA及IgE抗体于感染后的不同时间段均未检出;④于感染后第14d对IgG亚型(IgG1、IgG2b、IgG2c、IgG3)进行检测,至感染126d,几种抗体亚型均未测出。结论:1.小肠液中sIgA的检出,表明裂头蚴感染小鼠后可一定程度诱发小肠黏膜的免疫应答作用,由于sIgA含量少,且产生晚于裂头蚴入侵时间,因而sIgA不能有效抵抗裂头蚴的入侵;2.小鼠血清中IgM及IgG的动态水平变化,表明这两种抗体介导的免疫应答一定程度参与了抵抗裂头蚴移行及定居等过程;3.IgG抗体为猬裂头蚴感染小鼠血清中的优势抗体,小鼠体内裂头蚴的数量不断减少可能与其有关。
【图文】：

２．２小肠液ｓｌｇＡ水平的动，

本文编号：2606961