鞘内注射Reelin重组蛋白对大鼠慢性神经病理性疼痛的影响

发布时间：2020-04-15 11:17

【摘要】：目的探讨鞘内注射Reelin重组蛋白对大鼠慢性坐骨神经压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型中大鼠疼痛行为学及脊髓水平Reelin信号通路下游蛋白Dab1磷酸化、星形胶质细胞的活化及TNF-α表达的相关性研究。方法鞘内置管成功的SD雄性大鼠54只,无运动功能障碍,体重250-400g,年龄8-10周,随机数字表法分成三组,Sham组(假手术+鞘内注射PBS)(n=18),CCI组(坐骨神经结扎+鞘内注射PBS)(n=18),RELN组(坐骨神经结扎+鞘内注射Reelin重组蛋白)(n=18)。RELN组与CCI组采用4-0羊肠线结扎右侧坐骨神经建立慢性疼痛模型,Sham组予以暴露坐骨神经但不结扎。RELN组于CCI术后第10天鞘内注射Reelin重组蛋白5μl(0.01μg/μl),其余组给予5μl PBS溶液。记录CCI术前1天,术后1、4、7、10、11、12、13、14、15、17、21天大鼠右侧后足底痛行为学指标,包括热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)和机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)。分别于给药后1小时,给药后3天处死大鼠,取右侧腰膨大部位脊髓背角,采用免疫组化、Western blot方法检测Dab1磷酸化、GFAP、TNF-α的表达情况。结果(1)术前各组大鼠的基础PWMT和PWTL无明显区别。Sham组大鼠前后PWTL和PWTL无明显差异;CCI组大鼠从术后第1d开始各时间点PWMT和PWTL均低于Sham组(P0.05),且持续至术后第21d。RELN组鞘内注射Reelin重组蛋白后1h、1、2、3、4、5d大鼠的PWMT和PWTL明显增加(P0.05)。(2)免疫组化的结果与Western blot的结果显示,与Sham组相比,CCI组手术侧大鼠脊髓背角Dab1磷酸化的表达明显减少(P0.05),术后第10d、13d脊髓背角GFAP、TNF-α的表达上调。与CCI组相比,RELN组鞘内注射Reelin重组蛋白后1小时、给药后3d大鼠右侧脊髓背角p-Dab1表达明显增加(P0.05),大鼠脊髓背角GFAP、TNF-α的表达明显减少(P0.05)。结论鞘内注射Reelin重组蛋白可以缓解神经病理性疼痛,其机制可能与其抑制脊髓背角星形胶质细胞的活化及TNF-α的表达有关。
【图文】：

图 3.5 各组大鼠脊髓背角 p-Dab1 的表达情况A：Western blot 检测各组大鼠右侧脊髓背角 p-Dab1 的表达；B p-Dab1/GAPDH 比值结果。与 Sham 组相比，#P＜0.05；与 CC。

18图 3.6 各组大鼠脊髓背角免疫组化 GFAP 的表达情况注：A：免疫组化观察各组大鼠右侧脊髓背角 GFAP 的表达，箭头指示为阳性细胞（×400）；B：免疫组化 IOD 值结果。与 Sham 组相比，#P＜0.05；与 CCI组相比，*P＜0.05。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R402

【参考文献】

相关硕士学位论文 前2条

1 阳巧云;鞘内注射Reelin基因干扰慢病毒载体对大鼠慢性神经病理性疼痛的研究[D];南华大学;2015年

2 李晶金;慢性压迫性神经痛大鼠脊髓水平Reelin的表达变化[D];南华大学;2014年

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本文编号：2628491