MiR-19a与宫颈癌放疗敏感性及临床意义相关研究

发布时间：2020-04-19 00:47

【摘要】：目的:研究中晚期宫颈鳞状细胞癌组织标本中MiR-19a在放疗敏感组和放疗抵抗组中的表达水平与宫颈癌放疗敏感性的关系,探讨MiR-19a的表达改变对宫颈癌细胞的放疗敏感性的影响,并对其调节放疗敏感性的机制进行分析,发现其与宫颈癌放射敏感性的关系及其临床指导意义,为临床预测宫颈癌放疗敏感性、改善预后,提高生存率提供新的思路和依据。材料和方法:收集2014年6月-2015年9月在新疆医科大学附属肿瘤医院住院治疗诊断明确的中晚期宫颈鳞癌病例91例,用于芯片筛选的入组患者12例,放疗抵抗组和敏感组各6例,通过芯片筛选出不同放疗敏感性的宫颈癌组织标本的差异miRNA。放疗抵抗组分为复发未控组及远处转移组各3例,结果显示miR-19a在两组的表达水平上调明显。进一步选取放疗抵抗组38例及放疗敏感组41例标本用于后续验证筛选结果的入组患者,采用实时荧光定量PCR技术检测miR-19a在两组间的表达情况,分析其与宫颈癌放疗敏感性的相关性。采用ROC曲线分析用miR-19a预测宫颈癌放疗敏感性的价值。应用Kaplan-Meier曲线分析miR-19a低表达组和高表达组宫颈癌患者的生存情况,进一步选择实验细胞株宫颈鳞癌细胞株SiHa(放疗抵抗)和Me180细胞株(放疗敏感),一方面用miR-19a-mimic与miR-19a-inhibitor转染至Siha和Me180细胞,通过克隆形成实验来检验宫颈癌细胞的放疗敏感性。另一方面,采用慢病毒载体构建miR-19a稳定转染株,通过体外体内实验对细胞放疗敏感性进行检验,通过增殖实验及凋亡实验等对miR-19a可能调节放疗敏感性机制做初步探讨,最后利用生物信息软件及网络对miR-19a可能的靶基因进行初步筛选及验证。结果:芯片筛选结果显示miRNA-19a在复发未控组及远转组当中表达均上调。因此我们推断miRNA-19a可能在导致宫颈癌细胞发生放疗抵抗、侵袭远处转移方面起到一定的作用,采用实时荧光定量PCR技术检测检测MiR-19a在放疗敏感组及抵抗组间的表达情况,结果显示两组患者比较年龄、临床分期、组织分化程度、局部淋巴结转移及肿瘤大小、治疗时间和SCC水平差异无统计学意义(P值0.05),抵抗组miRNA-19a的表达水平为4.01±1.16,敏感组为1.39±0.85,两组比较差异有统计学意义(P=0.03),miR-19a的ROC曲线下面积0.963。至随访截止日,79例患者存活63例,死亡16例。生存时间达1年者74例、生存时间达3年者63例。随访结果,1年生存率为93.6%,3年生存率为79.7%,根据miR-19a平均表达水平把患者分为两组,低表达组和高表达组。采用K-M曲线分析两组宫颈癌患者的生存情况,结果显示和miR-19a高表达组相比miR-19a低表达组放疗后生存时间明显延长,差异有统计学意义(P=0.000)。体外试验显示,两株细胞转染miR-19a-mimic后放疗敏感性降低,转染miR-19a-inhibitor后放疗敏感性升高,裸鼠移植瘤模型结果显示和对照载体组相比转染pWPXL-19a组肿瘤组对放疗不敏感,体内外实验结果一致,增殖实验显示宫颈癌细胞转染miR-19a后的增殖无明显变化,凋亡实验结果表明miR-19a可以通过抑制射线引起的凋亡导致放疗抵抗。综上推断microRNA-19a可能通过抑制放疗诱导的细胞凋亡抑制宫颈癌细胞的放疗敏感性。通过生物学靶基因预测分析,初步结果显示PTEN、IGF2R、CUL5、Bcl-2、BAX等靶基因可能受到miR-19a的调控。进一步行Western Blot实验检测细胞凋亡相关的蛋白表达水平发现抑制MiR-19a导致了抗凋亡蛋白BAX的上调和促凋亡蛋白Bcl-2的下调。结论:宫颈鳞癌放疗抵抗患者癌组织中miR-19a高表达,细胞实验上调或下调miR-19a能够降低或升高宫颈癌细胞放疗敏感性,裸鼠模型试验结果显示已转染miR-19a肿瘤组和对照组相比对放疗不敏感,即miR-19a抑制宫颈鳞癌放疗敏感性,抑制miR-19a显著提高了SiHa细胞对放疗的敏感性,增加了凋亡,上调了BAX,下调了Bcl-2。miR-19a可能是调节宫颈癌放疗敏感性的重要因子,有望作为预测宫颈肿瘤内在放疗敏感性的标志,可为宫颈癌的治疗提供新途径。
【图文】：

19图1-1 放疗抵抗组和敏感组miRNA-19a的表达水平比较Figure 1-1 comparison of Expression Levels of miRNA-19a between Radioresistant andSensitive Groups2.5 ROC曲线分析miRNA-19a预测宫颈癌放疗敏感性的价值以灵敏度为纵坐标，误诊率（100-特异度）为横坐标在SPSS24.0软件上做ROC 曲线图，，然后计算曲线下面积（AUC0.963），可以看出用miRNA-19a预测宫颈癌放疗敏感性有较好的准确性（图1-2）。图1-2 ROC 曲线分析用miR-19a 预测宫颈癌放疗敏感性的价值Figure 1-2 The value of ROC curve analysis for the prediction of radiosensitivity of cervicalcancer by miR-19a新?

图1-1 放疗抵抗组和敏感组miRNA-19a的表达水平比较 1-1 comparison of Expression Levels of miRNA-19a between RadioresisSensitive GroupsOC曲线分析miRNA-19a预测宫颈癌放疗敏感性的价敏度为纵坐标，误诊率（100-特异度）为横坐标在SPSS24.0软件上后计算曲线下面积（AUC0.963），可以看出用miRNA-19a预测宫较好的准确性（图1-2）。
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33;R730.55

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈瑶;李思维;;鼻咽癌放疗敏感性的研究进展[J];华夏医学;2017年01期

2 孙德宇;李霞;王海东;孔翔宇;牟安娜;;CD44表达与鼻咽癌淋巴结转移及放疗敏感性关系研究[J];中国肿瘤;2011年06期

3 周和超;陈兴贵;陈华普;余忠华;;HIF-1α在放疗敏感性不同的宫颈鳞癌组织中的表达及意义[J];中国医药指南;2014年18期

4 曹新梅;任德莲;;肿瘤放疗敏感性与凋亡相关因素的研究进展[J];泸州医学院学报;2006年01期

5 李红梅;张晓田;;肿瘤放疗敏感性调节基因研究进展[J];现代肿瘤医学;2011年02期

6 张欣欣;盛修贵;燕玉凤;;影响宫颈癌放疗敏感性的临床病理因素分析[J];中华肿瘤防治杂志;2011年15期

7 崔爽爽;杜利清;王月英;孟爱民;王小春;赵永成;;癌组织中miRNA表达谱的变化与NSCLC放疗敏感性的关系[J];山东医药;2010年18期

8 姚明杰;;影响宫颈癌放疗敏感性的临床病理因素[J];心理月刊;2019年01期

9 李娟;李多杰;;PI3K/AKT信号通路与肿瘤放疗敏感性关系[J];中国老年学杂志;2018年17期

10 吴树强;罗利民;林白桦;吕世良;毕爱红;贾勇士;;参一胶囊与鼻咽癌放疗敏感性的作用研究[J];中华中医药学刊;2012年04期

相关会议论文 前10条

1 胡海燕;吴秉毅;宋朝阳;邓兰;郭坤元;;以Bcl-2为靶标的siRNA提高肿瘤细胞放疗敏感性的研究[A];第一届全国难治性淋巴瘤学术研讨会暨第二届全国多发性骨髓瘤学术研讨会（国家级血液系统恶性肿瘤继续医学教育学习班）继续教育集[C];2007年

2 郭颖;程玉峰;;急性放射性食管损伤与食管癌放疗敏感性的关系[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年

3 徐云;盛修贵;;人子宫内膜癌细胞株放疗敏感性比较研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年

4 刘保平;闫瑾;郭鹏德;;~(99m)Tc-HL91显像对肿瘤放疗敏感性预测的研究[A];第二届全国核素显像及治疗学术会议论文摘要汇编[C];2004年

5 许茂轩;林少民;梁茱;蔡俊宏;符生苗;;CyclinD和1Survivin蛋白表达与鼻烟癌放疗敏感性的关系[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年

6 贺华;卢亦成;丁夏;陶帮宝;侯瑛;胡国汉;骆纯;陈菊祥;董燕;盛平;徐涛;王以政;蔡嵘;;TRPC6通道蛋白是胶质瘤病人放疗敏感性及生存期长短的指征蛋白[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年

7 王颖;周琴;申良方;;E1A通过E6/E6AP增强宫颈癌放疗敏感性的机制研究[A];第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议论文汇编[C];2014年

8 黄东海;田勇泉;邱元正;肖健云;赵素萍;;检测PCNA和survivin的表达预测鼻咽癌放疗敏感性的研究[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编（下）[C];2007年

9 许茂轩;林少民;梁茱;蔡俊宏;符生苗;;Cyclin D1及Survivin蛋白表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年

10 苏新辉;俞浩;俞丹;陈贵兵;何小江;黄劲雄;苏新辉;许爱珍;吴华;;~(99m)Tc-HL91乏氧显像预测鼻咽癌放疗敏感性的研究[A];第四届全国中青年核医学学术会议论文汇编[C];2008年

相关重要报纸文章 前1条

1 记者 李仁丰;线粒体DNA影响放疗敏感性[N];健康报;2000年

相关博士学位论文 前10条

1 王一娜;MiR-19a与宫颈癌放疗敏感性及临床意义相关研究[D];新疆医科大学;2018年

2 杨成梁;miR-135调控Smo基因影响食管鳞癌上皮间质转化和放疗敏感性作用及机制研究[D];郑州大学;2018年

3 刘海霞;KLF4抑制宫颈癌放疗敏感性及其分子机制研究[D];第四军医大学;2017年

4 赵颖;MTDH对宫颈癌生物学行为及化疗、放疗敏感性的影响及机制研究[D];山东大学;2012年

5 姜瑶;Twist对A549细胞放疗敏感性的影响及机制研究[D];华中科技大学;2012年

6 许莉;MicroRNA-24在喉鳞状细胞癌中的作用研究[D];第四军医大学;2017年

7 左志贵;EGFR通路与结直肠癌细胞放疗敏感性的关系及西妥昔单抗对结直肠癌放疗敏感性的影响[D];第二军医大学;2013年

8 徐婧;HSP70调控喉癌放射敏感性及其分子机制研究[D];中南大学;2009年

9 李宝重;食管鳞癌放射治疗敏感性相关基因的研究[D];中国协和医科大学;2008年

10 郭懿;基于基因芯片的鼻咽癌研究[D];复旦大学;2009年

相关硕士学位论文 前10条

1 高君碧;LncRNA GAS5通过miR-106b调控宫颈癌放疗敏感性的研究[D];郑州大学;2019年

2 陈亮;直肠癌放疗敏感性相关的miR-93-5p靶基因的预测及其临床意义[D];安徽医科大学;2018年

3 邵艳;STAT3和ZEB1在食管鳞癌中的表达及其与放疗敏感性的关系[D];南京医科大学;2018年

4 邓渊润;Sp1对宫颈癌放疗敏感性的影响及其机制研究[D];南方医科大学;2017年

5 张礼俊;沉默FANCD2表达提高人鼻咽癌细胞放疗敏感性的实验研究[D];西南医科大学;2017年

6 卢珂;细胞因子预测鼻咽癌患者放疗敏感性及预后的相关性研究[D];浙江大学;2012年

7 陈景;尼妥珠单抗对食管鳞癌细胞化、放疗敏感性的影响[D];南京大学;2012年

8 邱鸣寒;microRNA-384增强非小细胞肺癌放疗敏感性的机制研究[D];天津医科大学;2017年

9 舒禹先;Survivin基因在NPC组织中的表达及临床意义[D];南昌大学;2006年

10 张欣欣;宫颈癌放疗敏感性相关基因的筛选[D];济南大学;2011年

本文编号：2632731