胆固醇水平变化对心肌炎心肌细胞凋亡的影响及其机制研究

发布时间：2020-05-06 21:48

【摘要】：[目的]前期研究发现心肌炎患者血清高密度脂蛋白(HDL)水平下降,HDL水平的下降会引起逆向转运胆固醇能力下降,导致组织内胆固醇蓄积。本课题主要研究组织内胆固醇水平异常对心肌炎心肌细胞凋亡的影响及其机制,为心肌炎的临床治疗提供新的思路和方法。[方法]本研究分为三个部分:(一)动物实验:建立大鼠实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune cardiomyopathy,EAM)模型,分析 EAM 大鼠脂质水平的变化。(二)体内干预实验:用甲基-β-环糊精(Methyl hydroxyethylbeta cyclodextrin,MβCD)降低EAM大鼠心肌细胞内胆固醇含量,分析EAM组和MβCD组大鼠心肌细胞凋亡程度的变化及其机制。(三)细胞实验:为了进一步验证体内干预实验的结果,进行细胞实验,用胆固醇刺激H9C2细胞,探讨细胞内胆固醇水平升高对H9C2细胞凋亡的影响及其机制。[结果](一)动物实验:与对照(Control,CON)组相比,EAM大鼠血清HDL水平明显下降,导致大鼠心肌细胞内胆固醇蓄积。(二)体内干预实验:与CON组相比,EAM大鼠心肌细胞凋亡程度增加,凋亡因子cleaved caspase-3、Fas、FasL、Bax/Bcl-2的表达量升高,P38磷酸化水平升高、ERK磷酸化水平下降;用MβCD降低EAM大鼠心肌细胞内胆固醇含量后,心肌细胞凋亡程度下降,凋亡因子cleaved caspase-3、Fas、FasL、Bax/Bcl-2的表达量下降,P38磷酸化水平下降、ERK磷酸化水平增加。(三)细胞实验:在一定程度内增加H9C2细胞内胆固醇含量可以促进细胞凋亡,凋亡因子cleaved caspase-3、Fas、FasL、Bax/Bcl-2的表达增加,P38磷酸化水平增加、ERK磷酸化水平降低。[结论]自身免疫性心肌炎时血清HDL水平下降,导致心肌细胞内胆固醇蓄积。实验证明:心肌细胞内胆固醇含量增加可以促进细胞凋亡,降低心肌细胞内胆固醇含量可以抑制心肌细胞凋亡。心肌细胞内胆固醇含量增加引起心肌细胞凋亡是通过两条途径进行:由Fas、FasL介导的胞外途径;由Bax/Bcl-2介导的胞内途径,P38、ERK MAPK通路可以影响凋亡的胞内途径。
【图文】：

收集ＥＡＭ大鼠ＯＷ、２Ｗ、３Ｗ、４Ｗ的血清和心尖组织，检测不同时间大鼠逡逑血清ＨＤＬ的水平以及心肌组织内胆固醇的含量。结果显示ＥＡＭ大鼠血清ＨＤＬ逡逑水平明显下降（如图２Ａ），与心肌炎患者一致，可以用来模拟心肌炎患者血清脂逡逑质代谢紊乱的情况，进行进一步研究。高效液相法测得ＥＡＭ２Ｗ和３Ｗ时大鼠逡逑心肌组织内胆固醇水平均明显增高，且具有统计学意义，４Ｗ时下降（如图３Ｂ），逡逑认为ＥＡＭ大鼠血清ＨｐＬ水平的降低导致大鼠心肌组织内胆固醇的蓄积，验证逡逑了之前的猜想。逡逑Ａ逦巳逡逑Ｉ逦ｌｌ°‘°５ｌ逦＊＊邋＊逡逑＊＊＊＊＊＊＊逦ｐＨ逦＿＿邋ｎｓ逡逑占邋ｍ逦＾。＿。３邋ｎ邋■邋■—逡逑＾逦＾逦＾逦卜逦３ｗ邋４ｗ逡逑图２邋ＥＡＭ大鼠血清及组织中脂质的变化逡逑■逦图２Ａ：大鼠血清ＨＤＬ－Ｃ的水平；Ｂ：大鼠心肌组织内胆固醇含量。大鼠血清ＨＤＬ－Ｃ的水平在２Ｗ时明显逡逑降低，３Ｗ时最低，４Ｗ又开始升高；而大鼠心肌组织中的胆固醇含量在２Ｗ时开始升高，３Ｗ时最高，４Ｗ逡逑开始下降。与邋０Ｗ邋相比，＊Ｐ＜０．０５，邋＊＊Ｐ＜０．０１，邋＊＊＊Ｐ＜０．００１，邋ｎ＝８。逡逑３．２药物干预实验逡逑ＥＡＭ大鼠２Ｗ时血清ＨＤＬ水平明显下降，，导致大鼠心肌细胞内胆固醇蓄积，逡逑为了进一步验证ＥＡＭ大鼠心肌细胞内胆固醇含量增加对心肌细胞的影响，进行逡逑体内干预实验。逡逑甲基－Ｐ－环糊精（Ｍ｜３ＣＤ）是环糊精衍生物的一类

逦ＥＡＭ＋ＭｐＣＤ逡逑图３心脏病理学指标评估逡逑图３图中ＣＯＮ’指对照组，ＥＡＭ指大鼠心肌炎组，ＥＡＭ＋ＭｐＣＤ组指用＿ＭｐＣＤ干预的ＥＡＭ大鼠。Ａ：心脏逡逑大体观；Ｂ：组织切片ＨＥ染色２０Ｘ。心脏大体观显示ＣＯＮ组大鼠的心脏外观光滑平整，ＥＡＭ组大鼠心脏逡逑表面有明显的白色炎症坏死区域，ＥＡＭ＋ＭＰＣＤ组大鼠心脏较ＥＡＭ组平整，白色炎症坏死区域明显减少；逡逑ＨＥ染色结果，与ＣＯＮ组相比，ＥＡＭ组有明显的炎症坏死区域，与ＥＡＭ组相比，ＥＡＭ＋ＭｐＣＤ组炎症坏逡逑死区域明显减小。ｎ＝８。逡逑３．２．１．３干预后心肌损伤程度减轻逡逑在心脏组织中，心脏与体重之比可以用来评估心脏炎症水肿程度，ＥＡＭ组逡逑大鼠的心脏体重比与ＣＯＮ组比明显增加，说明ＥＡＭ组大鼠心脏炎症水肿程度逡逑较重；ＥＡＭ＋ＭＰＣＤ组与ＥＡＭ组比较，心脏体重比明显下降，说明用ＭＰＣＤ治逡逑疗一周后心脏的水肿程度下降（如图４Ａ）。逡逑检测心肌损伤标志物——ＡＮＰ、ＢＮＰ的表达情况
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R542.21;R446.1

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张娟娟;;运动与心肌细胞凋亡[J];山西体育科技;2011年03期

2 房佳惠;杨巍;;Bcl-2家族蛋白对心肌细胞凋亡作用的研究进展[J];现代医学;2017年07期

3 张星;麻春杰;;中医药抗心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的研究进展[J];中医药导报;2017年14期

4 朱莉拉;张安琪;卓小煌;郦娜;;乙醇诱导心肌细胞凋亡的发生机制的研究进展[J];人人健康;2016年20期

5 邢维新;;运动训练与心肌细胞凋亡研究的新进展[J];绵阳师范学院学报;2011年02期

6 蒋晓明;屈红林;;骨髓间充质干细胞防治心肌细胞凋亡的基因及蛋白研究[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年36期

7 方礼钦;屈红林;;骨髓间充质干细胞与运动性心肌细胞凋亡[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年01期

8 郝言杰;王元书;解砚英;牟艳玲;;心肌细胞凋亡与梗死的研究进展[J];食品与药品;2009年01期

9 朱汉华;李浪;汪熠;李佳荃;文伟明;陆永光;赵献明;;TUNEL检测心肌细胞凋亡的影响因素探讨[J];广西医科大学学报;2009年01期

10 申小宝;孟隽卿;;运动与心肌细胞凋亡[J];吉林体育学院学报;2009年04期

相关会议论文 前10条

1 裴兆辉;马虹;朱妙章;;血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞凋亡机制的研究进展[A];全国第九届心脏学会第十二届心功能学会《心脏杂志》编委会联合学术会议论文集[C];2005年

2 卢红;林丽;严晓红;王媛;任安经;;内皮素-1参与心肌细胞凋亡的研究[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年

3 赵宇光;李薇;;基质细胞衍生因子-1β对高脂诱导心肌细胞凋亡的预防作用及机制[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年

4 蔡久英;张博;;红景天苷对乳鼠心肌细胞凋亡的影响[A];第八次全国中西医结合心血管病学术会议论文集[C];2007年

5 陈少贤;刘晓颖;林秋雄;单志新;余细勇;朱杰宁;杨敏;;三七总皂苷抑制心肌细胞凋亡的作用机制研究[A];2010年广东省药师周大会论文集[C];2011年

6 吕秀秀;王华东;余小慧;;小檗碱抑制去甲肾上腺素诱导心肌细胞凋亡的机制研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

7 王筠;刘畅;;内质网应激在高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

8 张璐洁;吕进泉;;心梗局部高表达整合素连接激酶抑制心肌细胞凋亡改善心脏收缩功能[A];2012年江浙沪儿科学术年会暨浙江省医学会儿科学分会学术年会、儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编[C];2012年

9 蒋东;郑世营;葛锦峰;赵军;;缺血预处理减轻在体家兔心肌细胞凋亡[A];中华医学会第七次全国胸心血管外科学术会议暨2007中华医学会胸心血管外科青年医师论坛论文集心血管外科分册[C];2007年

10 张峰;梁宏;祁章年;黄增明;张晓春;张恒太;王根良;;γ射线全身照射对小鼠血液和心肌细胞凋亡的影响[A];中国空间科学学会空间生命专业委员会2003年中国空间生命科学与航天医学会议论文摘要集[C];2003年

相关重要报纸文章 前2条

1 本报记者 慕欣;PNS可否抑制心肌细胞凋亡？[N];医药经济报;2010年

2 记者 郑福汉 见习记者 甘青;执着的追求[N];咸宁日报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 李若天;miR-145调控心肌细胞凋亡、肥大的机制研究[D];南京大学;2013年

2 张蓓;丝裂原活化蛋白激酶、钙蛋白酶和膜联蛋白A5在醛固酮诱导原代心肌细胞凋亡中的分子机制及相关临床研究[D];贵州医科大学;2017年

3 孙羽涵;miR-486调控p53/Bbc3/BCL-2凋亡通路减轻冠状动脉微栓塞致心肌损伤的机制研究[D];广西医科大学;2017年

4 张晓卉;H2和H3 relaxin抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡的作用及机制[D];哈尔滨医科大学;2014年

5 刘丹;白介素-33对高糖诱导心肌细胞凋亡的保护作用及机制研究[D];武汉大学;2016年

6 李鹏飞;血清外泌体通过ERK1/2发挥抵抗H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的作用[D];南京医科大学;2018年

7 闫梦捷;MiR-199a-5p/miR-31a-5p对心肌细胞凋亡的影响及其分子机制[D];吉林大学;2018年

8 杜文涛;LDHA对心肌缺血再灌注损伤中细胞凋亡作用影响的研究[D];河北医科大学;2018年

9 董建文;间歇性低氧减轻缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡及其机制的研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2003年

10 张公文;银杏叶提取物对大鼠心脏移植心肌细胞凋亡影响的实验研究[D];山东大学;2004年

相关硕士学位论文 前10条

1 马平;胆固醇水平变化对心肌炎心肌细胞凋亡的影响及其机制研究[D];厦门大学;2018年

2 王景;芪参颗粒抑制AMI后炎症损伤介导心肌细胞凋亡的机制研究[D];北京中医药大学;2016年

3 吴雨婷;淫羊藿次苷Ⅱ对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的干预作用及机制研究[D];遵义医学院;2018年

4 吴丽梦;miR-499-5p通过靶调节Sox6抑制大鼠心梗后心肌细胞凋亡[D];郑州大学;2018年

5 王广能;外源性H_2S通过激活KATP通道抑制心肌细胞凋亡[D];南华大学;2018年

6 贺滟;CaMKⅡ对20-HETE诱导的心肌细胞凋亡和肥大的作用及机制研究[D];遵义医学院;2018年

7 王晨;降钙素基因相关肽对缺氧/复氧大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制[D];山西医科大学;2018年

8 李振;蟾毒灵通过内质网应激诱导心肌细胞凋亡致心脏毒性的研究[D];广州中医药大学;2018年

9 潘莹莹;无创远端缺血适应对心肌梗死急性期治疗性保护作用的研究[D];天津医科大学;2018年

10 王悦;缺氧诱导肉鸡心肌细胞凋亡中Calpains的作用及牛磺酸调控机理的研究[D];沈阳农业大学;2018年

本文编号：2651908