儿童感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学特征及临床治疗的体内研究

发布时间：2020-07-09 21:50

【摘要】：目的分析比较安徽省内儿童与14岁患者感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的流行病学特征与耐药性差异,并通过建立兔组织笼模型探索儿童感染杀白细胞素(panton-vanlentine leukocidin,pvl)阳性MRSA的治疗方法,为儿童感染临床治疗提供病原学依据。方法临床分离金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)738株,所有菌株均进行药敏试验并通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增技术检测mec A、杀白细胞素(pvl)基因,然后按年龄分组对所有菌株的mecA基因、pvl基因、科室来源、标本来源及耐药性进行统计学分析;在无菌条件下建立四组兔组织笼感染模型(A组感染pvl(+)MRSA,B组感染pvl(-)MRSA,C组感染ATCC43300,D组感染ATCC25923),并分别予利奈唑胺(实验组))万古霉素(对照组)治疗,抽取每次治疗前及治疗达稳态后前3天组织笼内组织液并换算成细菌浓度进行统计学分析。结果738株SA检测为MRSA菌株共126株,占17.07%,pvl阳性菌株36株,阳性率为28.57%。儿童患者与14岁患者感染SA的mecA及pvl基因检出率差异无统计学意义(P0.05):其中分离自儿童患者MRSA菌株32株,占20.92%,pvl阳性MRSA菌株7株,阳性率为21.88%;分离自14岁患者MRSA菌株94株,占16.07%,其中阳性菌株29株,占30.85%。儿童患者感染MRSA主要来源于烧伤科(31.25%)、外科(15.63%)、ICU(9.38%),其中pvl(+)MRSA主要来源于外科(57.14%)、新生儿病区(28.57%)、呼吸内科(14.29%),与14岁患者感染MRSA主要来源科室之间差异有统计学意义(P0.001)。儿童感染MRSA主要来源标本为脓液(31.25%)、痰(25.00%)、创面(15.63%),pvl(+)MRSA主要来源于脓液(71.43%)、血(28.57%),与14岁患者感染MRSA标本来源之间差异有统计学意义(P0.05)。儿童患者感染pvl(+)MRSA主要对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素类、林克酰胺类耐药,pvl(-)MRSA主要对β-内酰胺类、林克酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类耐药,与14岁患者感染MRSA的耐药性差异无统计学意义(P0.05)。四组兔组织笼细菌浓度经利奈唑胺及万古霉素治疗后均呈现不同程度的下降,其中A、B两组实验组与对照组组织笼内细菌浓度差异有统计学意义(A组:P0.001,B组:P=0.011,C、D两组细菌浓度差异无统计学意义(C组:P=0.308,D组:P=0.349)。结论安徽省各地区儿童患者与14岁患者感染MRSA的流行病学特征差异有统计学意义(P0.05)、耐药性差异无统计学意义(P0.05),儿童感染pvl(+)MRSA推荐使用利奈唑胺治疗,临床儿科医师应注意以上高发科室及标本感染SA的mecA及pvl基因鉴定并根据药敏结果合理用药以达到更好的治疗目的。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R446.5;R725.1
【图文】：

安徽医科大学硕士学位论文2 结果2.1 mecA、pvl 基因的 PCR 结果738 株 SA 共检出 MRSA126 株，MRSA 阳性率为 17.07%，检出 pvl 阳性菌株36 株，阳性率为 28.57%，其中分离自儿童患者的 153 株 SA 检出为 MRSA 菌株共计 32 株，阳性率为 20.92%，pvl 阳性 MRSA 菌株 7 株，阳性率为 21.88%，分离自年龄>14 岁患者的 585 株 SA 检出为 MRSA 菌株 94 株，阳性率为 16.07%，pvl 阳性 MRSA 菌株 29 株，阳性率为 30.85%，儿童患者与>14 岁患者感染 SA 之间检测mecA 及 pvl 差异无统计学意义(P>0.05)。部分 mecA、pvl 电泳图见图 1。

当手术切口恢复良好且重新满透亮组织液，则兔组织笼模型建立成染模型作之前，用无菌注射器从每只兔组织笼 Mueller-Hinton 琼脂培养皿上并置于 3菌生长的兔组织笼方能用于下一步实验四组，分别往组织笼内注射含细菌(A 组TCC43300；D 组：ATCC25923)浓度约染。感染两天后从每只组织笼内抽取 浓度达到 1×108cfu/mL 的兔组织笼才能尔夫练习球及建立的兔组织笼模型如图

图 3. 兔组织笼模型疗 天后将每组兔 组织笼中随机两只分配为实验组8H, 连续治疗两天达到动力学稳态[38])）耳缘静脉静滴治万古霉素（20mg/kg, Q12H, 连续治疗 3 天达到动力学稳态。度测量万古霉素或利奈唑胺治疗后组织笼内不同 SA 菌株浓度变间每次治疗前及治疗达动力学稳态后前三天均用无菌注射液 1ml 计算细菌浓度。将每份标本进行 10 倍稀释（1: 1中 10ul 接种至 MH 琼脂培养皿上并置于 37℃培养箱中培

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本文编号：2748027