中医药多中心临床试验生物样本标准操作规程与质量控制研究

发布时间：2020-08-28 14:54

　　研究背景:中医药学是我国医学科学体系的重要组成部分,在中华民族的医疗保健事业中发挥着重要的作用。随着现代医学的发展,中医药亟需应用现代先进技术阐释其科学内涵。循证医学研究是促进中医药发展的重要科学方法,在循证医学研究的开展过程中,除了临床试验设计的合理性、方案执行的严谨性外,生物样本的质量对中医药临床研究结果的准确性同样有着重大影响。多中心临床生物样本的采集面临着人员、科研条件等各方面的差异,以及采集后的临时处理、保存、运输等一系列环节,因此生物样本在离体后的整个流转过程中非常容易出现样本采集不规范、质量不均一等问题。中医药多中心生物样本不仅支撑着中医药某一项临床研究,通过低温长期保存,可以为中药作用机制、中药药性理论以及中医证候等研究提供医学研究资源,因此中医药多中心临床试验生物样本的质量保证十分重要。研究目的:为了减少生物样本质量对中医药多中心临床研究带来的偏倚问题,获取符合中医药研究特色的高质量临床研究资源,提高中医药特色生物样本库建设的质量。本研究拟通过制订中医药多中心临床试验生物样本采集、运输、保存规范,加大人员培训力度,通过对流转环节的控制,以达到保证生物样本质量的目的,为中医药研究的准确性、可续性提供保障。研究方法:根据中医药现代研究方法体系特色,制订符合中医药整体理念的多中心生物样本标准操作规程,包括生物样本的采集、运输、处理及储存等。以我院主导的中医药临床研究为样本来源,全过程跟踪临床研究中样本采集规程的执行情况。统计生物样本的接收情况,探讨血钾、血糖在血清样本质量评价中的潜在价值,并通过DNA质量比对、蛋白质电泳以及相关指标的检测等方法,对研究期间获得的中药多中心临床试验生物样本进行质量评价。研究结果:本研究首先制订了多中心生物样本标准操作规程,并基于中国人民解放军总医院牵头的一项中药治疗慢性肾脏病的多中心临床试验进行规程的执行,在2017.3-2017.12期间我们共接收全国34家研究中心的795例入组患者的生物样本,包括EDTA抗凝血2269管,促凝血2269管,晨尿2335管,24h尿液2144管,生物样本完整性良好,信息完整。研究表明,未离心血液在室温下长时间放置导致血清钾浓度上升、葡萄糖浓度下降。通过对多中心血清样本的血钾、血糖、肌酐以及胱抑素C进行复检,并与各研究中心的即时检测结果对比评价血清样本质量,结果显示来自34家研究中心的170例血清样本的血钾、血糖、肌酐以及胱抑素C的前后对比结果均无显著性差异(P0.05)。DNA的浓度纯度测定及凝胶电泳分析表明,利用收集的血液样本提取的DNA质量较高,无明显降解,浓度在100ng到300ng之间,能够满足DNA测序等需求并符合生物样本库长期保存的要求。血清、尿液蛋白电泳图谱显示,生物样本蛋白种类丰富、电泳条带清晰,与新鲜样本对比无明显差异。结论:本课题围绕中药多中心临床试验,制订了中医药多中心生物样本采集、运输、处理及保存规程,通过加强对多中心样本采集参与人员的培训,严格执行多中心生物样本操作规程,保证了中医药多中心临床研究生物样本的质量,为中医药以及现代医学研究提供了重要的生物资源。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R446
【部分图文】：

生物样本,信息

远距离必须采用冷链运输（冷冻介质一般为干冰），严防样本冻融。（4）引用文件《病原微生物实验室生物安全管理条例》国务院 2004 年 424 号令《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》卫生2005 年 45 号令.5 生物样本信息登记规程（1）目的规范生物样本采集过程中生物样本信息的登记过程，保证生物样本的基本信息并与临床信息能够一一对应。（2）适用范围适用于中医药临床研究生物样本采集过程中生物样本基本信息的登记。（3）标准操作规程生物样本采集后根据信息登记表及时记录生物样本信息，包括课题编号、中心、患者编号、性别、年龄、临床诊断、中医证候类型、样本采集时间等。

流程图,生物样本,流程

脏病的多中心临床研究，接收全国 34 家研究中心收集的生物集前均签署知情同意书，获得伦理审批通过。本收集方案：拟采集生物样本包括抗凝血 5 mL、促凝血 5 时尿 10 mL。样本采集操作流程签订知情同意书：意书需要参与者抑或参与者的合法代理人在正常、清醒的精神同意书，同意后签字；抑或在有证人的情况下，将知情同意书听，参与者同意后按手印或亲自签字。同时告知的隐私权将会情况下不会泄漏有关信息。究医生填写样本采集信息卡：息、患者姓名、性别、年龄、病历号、临床诊断、采集人、采责人等。究护士采集样本集信息卡标示的内容摆放采血管，按照标准操作规程进行采血尿液样本。（流程图见图 2.1）

样本采集,工具包,生物样本

保证操作的规范，保证样本质量。③保证工作人员的人身安全以及样本的生物安全。（2）培训内容研究医生：负责研究方案的执行，培训内容包括：①样本的采集方案及相关程序；②临床数据的采集及质控要求等。研究护士：协助研究医生完成研究对象生物样本的采集，前处理等工作，培训内容包括：①生物样本采集程序及标准操作规程；②生物样本的标识规程；③生物样本的前处理程序及临时保存规程；④生物样本的运输规程等。3.1.4 标准化工具包为保证信息登记的规范和减少生物样本之间的差异因素，由中心实验室统一发放标准化工具包，包含采血管、尿液收集管、样本标签、样本采集登记卡、样本采集袋等。a b c

【参考文献】