在非血缘异基因造血干细胞移植中研究KIR基因的免疫重建规律

发布时间：2020-10-16 22:04

　　 【目的】在非血缘供者为KIR AA基因型的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中研究KIR 2DL1、KIR 3DL1的免疫重建规律;在非血缘供者为KIR Bx基因型的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中研究KIR 2DS1、KIR 3DS1的免疫重建规律。【方法】119对供受者对运用序列特异性引物聚合酶链反应的方法,进行KIR基因分型。确定供者基因型为KIR AA型的75对供患者,采用流式细胞术方法和实时荧光定量PCR法,动态检测供者移植当天及患者移植后不同时间点KIR 2DL1、KIR 3DL1在NK细胞膜和m RNA的表达水平;确定供者基因型为KIR Bx型的44对供患者,采用实时荧光定量PCR法动态检测移植当天及移植后不同时间点KIR 2DS1、KIR 3DS1在m RNA水平的表达。【结果】(1)KIR 2DL1膜蛋白中位表达水平:非血缘供者移植当天为21.60%,受者在1M、2M、3M、3-6M时表达水平分别为7.40%、12.00%、16.92%、17.64%;KIR 2DL1的m RNA中位表达水平:非血缘供者移植当天为265.14/104 ABL拷贝数,受者移植后1M、2M、3M、3-6M、6-9M、9-12M时表达水平分别为332.17、438.31、723.25、414.17、187.60及234.67/104 ABL拷贝数。KIR 2DL1的m RNA和膜蛋白表达水平在移植后各个时间点均逐渐升高,但m RNA表达水平升高早于膜蛋白。(2)KIR 3DL1膜蛋白中位表达水平:非血缘供者移植当天为18.56%,受者在移植后1M、2M、3M、3-6M时KIR 3DL1表达水平分别为23.83%、22.57%、23.02%、21.60%;KIR3DL1 m RNA中位表达水平:非血缘供者移植当天为572.29/104 ABL拷贝数,受者移植后1M、2M、3M、3-6M、6-9M、9-12M时表达水平分别为1233.74、1140.42、876.73、1 057.07、739.02、514.43/104 ABL拷贝数。KIR 3DL1的m RNA和膜蛋白在移植后1个月的表达水平均已超过了非血缘供者,并在移植后各个时间点稳定高表达,且m RNA与膜蛋白表达水平同步升高。(3)KIR 2DS1和KIR 3DS1的m RNA中位表达水平:非血缘供者移植当天KIR2DS1为1898.79/104 ABL拷贝数,受者移植后1M、2M、3M、3-6M、6-9M、9-12M时表达水平分别为2576.56、2654.32、2394.46、1638.42、1812.42及2076.91/104 ABL拷贝数,其在移植后1个月的表达水平已超过了非血缘供者,并在1-3个月内稳定高表达。非血缘供者移植当天KIR 3DS1为2479.92/104 ABL拷贝数,受者移植后1M、2M、3M、3-6M、6-9M、9-12M时表达水平分别为3612.00、5136.43、6505.61、5881.28、5121.80、5094.28/104 ABL拷贝数,其在移植后1个月的表达水平已超过了非血缘供者,并在第3个月表达最高。(4)KIR 2DL1/2DS1和KIR 3DL1/3DS1的的免疫重建规律:KIR2DL1的m RNA表达在第3个月后达到最高,2DS1的m RNA表达在第2个月后达到最高;KIR3DL1的m RNA表达在移植后第1个月达到最高,3DS1在移植后第3个月表达最高。因此,不同基因型的抑制性KIR基因(i KIR)和激活性KIR基因(a KIR)的免疫重建时间点不同,即KIR3DL1早于2DL1、KIR 2DS1早于2DL1、KIR3DL1早于3DS1。【结论】KIR 2DL1/KIR 2DS1及KIR 3DL1/KIR 3DS1移植后的免疫重建规律性不同,为在移植后选择最佳时间点定量检测KIR各基因表达水平来预测受者移植预后提供理论依据,同时也为研究不同i KIR和a KIR基因型的免疫重建规律性奠定了实验基础。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R457.7
【部分图文】：

图 2A. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 2DL1 在 NK 细胞膜表达水平图 2B. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 3DL1 在 NK 细胞膜表达水平图 3A. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 2DL1 在 mRNA 表达水平图 3B. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 3DL1 在 mRNA 表达水平（三）KIR 2DL1、KIR 3DL1 的免疫重建规律

图 2A. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 2DL1 在 NK 细胞膜表达水平图 2B. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 3DL1 在 NK 细胞膜表达水平图 3A. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 2DL1 在 mRNA 表达水平图 3B. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 3DL1 在 mRNA 表达水平（三）KIR 2DL1、KIR 3DL1 的免疫重建规律

15图 3A. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 2DL1 在 mRNA 表达水平图 3B. 非血缘 allo-HSCT 前后 KIR 3DL1 在 mRNA 表达水平（三）KIR 2DL1、KIR 3DL1 的免疫重建规律1．移植后动态检测各时间点受者表达供者 KIR 2DL1 基因的表达水平：KIR2DL1 的 mRNA 表达在移植后 1 个月已超过供者移植当天表达水平，在 3 个月时表达最高；而 KIR 2DL1 的膜蛋白表达在移植后缓慢升高，在移植后 3-6 月时仍未达到供者移植当天表达水平，KIR 2DL1 的 mRNA 和膜蛋白表达的重建规律存在时间上的差异性（图 4A）。2．移植后动态检测各时间点受者表达供者 KIR 3DL1 基因的表达水平：KIR
【参考文献】

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本文编号：2843827