成人、婴儿和狒狒Gal，Neu5Gc和Sda抗原抗体表达及其临床意义

发布时间：2020-10-22 14:46

　　 目的:分别检测成人、婴儿和低龄狒狒RBCs和PBMCs表面Gal,Neu5Gc和Sda抗原及其血清中相关抗体的表达,以及心脏手术对婴儿体内相关抗体的影响,探讨低龄狒狒作为TKO猪-婴儿异种心脏移植实验模型的可能性,并为转基因猪心脏移植给婴儿提供实验依据。材料与方法:材料:40份健康成人血清来自美国自愿捐献者;84份术前先心病患儿(非暴露组)及25份术后先心病患儿(暴露组)血清由阿拉巴马大学伯明翰分校儿科医院提供;40份狒狒的血清及不同基因型猪全血由美国Revivicor公司提供。方法:(1)FCM检测Gal、Neu5Gc、Sda抗原在人类、狒狒及不同基因型猪RBCs、PBMCs上的表达;(2)FCM检测成人、非暴露组婴儿及低龄狒狒血清IgM和IgG与WT、TKO猪RBCs的结合;(3)FCM检测成人、非暴露组婴儿血清IgM和IgG与TKO猪CD3+T细胞(来自血PBMC)结合:(4)FCM检测非暴露组和暴露组婴儿血清IgM和IgG与WT、TKO猪RBCs以及CD3+T细胞的结合;(5)FCM检测WT、TKO PBMC与成人和婴儿(包括非暴露组和暴露组)CDC。结果:(1)FCM检测Gal、Neu5Gc、Sda抗原在人类、狒狒及转基因猪RBCs、PBMCs上的表达:(1)人类在RBCs和PBMCs上不表达Gal,Neu5Gc和Sda抗原;(2)狒狒在RBCs和PBMCs上表达Neu5Gc,不表达Gal和Sda抗原;(3)WT猪表达Gal、Neu5Gc和Sda三种抗原;敲除Gal、Neu5Gc和Sda三基因的TKO猪相应抗原不表达。(2)FCM检测成人、非暴露组婴儿及低龄狒狒血清IgM和IgG与WT、TKO猪RBCs结合:(1)非暴露组婴儿:IgM与WT RBCs53%呈阳性,IgG78%呈阳性;IgM与TKO RBCs呈阴性,IgG与TKO RBCs 1%呈弱阳性;(2)成人组:IgM/IgG与WT RBCs100%阳性;IgM与TKO RBCs 5%阳性、IgG呈阴性;(3)低龄狒狒组:IgM和IgG与WT RBCs100%呈阳性;IgM与TKO RBCs 95%呈阳性,IgG 45%呈阳性;(3)FCM检测成人、非暴露组婴儿IgM和IgG与TKO猪CD3+T细胞结合:成人组(IgM:1.031±0.06;IgG:0.89±0.12)和婴儿组(IgM:1.096±0.05;IgG:1.096±0.05)IgM和IgG的结合没有显著性差异(p0.05),并且与阴性对照组(IgM:1.094±0.07;IgG:0.89±0.03)没有显著性差异(p0.05)(除了成人血清IgM稍低于阴性对照(p0.05))。(4)FCM检测非暴露组婴儿及暴露组婴儿血清IgM和IgG与WT、TKO猪RBCs和CD3+T细胞结合:(1)与WT RBCs,非暴露组:50%IgM阳性,76%IgG阳性。暴露组:100%IgM阳性,96%IgG阳性。暴露组IgM和IgG的结合显著性高于非暴露组(p0.05);(2)TKO RBCs:非暴露组:0%IgM阳性,2%IgG阳性。暴露组:4%IgM阳性,4%IgG阳性。尽管暴露组IgM结合显著高于非暴露组(p0.05),但仅有一份暴露组血清呈弱阳性;IgG结合在两组之间没有显著性差异(p0.05);(3)与TKO CD3+T细胞结合,非暴露组:22%IgM阳性,58%IgG阳性。暴露组:11%IgM阳性,8%IgG阳性。暴露组和非暴露组IgM和IgG没有显著差别(p0.05)。(5)WT和TKO PBMCs与成人及婴儿血清共孵育,加入兔补体,分别测量成人、婴儿血清CDC:(1)WT猪PBMC中,成人血清细胞毒反应(100%阳性)显著高于非暴露组婴儿(50%阳性)(p0.05)及阴性对照组(p0.05)。然而在TKO猪PBMC中,成人血清细胞毒反应(15%阳性)明显降低,稍低于阴性对照组(p0.05);婴儿非暴露组血清的细胞毒反应(40%阳性)与成人及阴性对照组均没有显著差异(p0.05)。(2)与WT猪PBMC结合,暴露组血清的细胞毒反应(100%阳性)显著高于非暴露组(67%阳性)(p0.05),然而在TKO PBMC中,暴露组血清(64%阳性)与非暴露组血清的细胞毒反应(40%阳性)没有显著差异(p0.05)。结论:(1)人类不表达Gal,Neu5Gc和Sda抗原,但存在相应抗体,婴儿抗体水平较低;低龄狒狒表达Neu5Gc,不表达Gal和Sda抗原,存在Gal和Sda抗体,水平较高;WT猪表达Gal、Neu5Gc和Sda三种抗原;敲除Gal、Neu5Gc和Sda三基因的TKO猪不表达相应抗原。(2)移植前的心脏手术不会升高婴儿体内的抗Gal/Neu5Gc/Sda(抗TKO)抗体水平;由于预先形成的抗TKO抗体水平低,TKO猪器官/组织/细胞移植给婴儿可能是可行的。(3)低龄狒狒体内抗Gal/Neu5Gc/Sda(抗TKO)抗体的水平显著高于婴儿,因此,不适合作为猪-婴儿异种心脏移植模型受体。
【学位单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R446.6;R726.5
【部分图文】：

WT 猪 RBC（A）和 PBMC(B)上表达 GO/β4GalNT2KO 猪细胞不表达 Gal，Neu5Gc 和s人I-B4al)u5GcAa)WTI-B4GTKO/CMAHKO/β4GalNT2KOCs人 WTGTKO/CMAHKO/β4GalNT2KO狒狒狒狒

图 3.12 10 名接受过 1 期 Norwood 手术婴儿的亚组线表示阳性抗体结合（IgM> 1.20; IgG> 1.1）。在 10 名接受过 1 期 Norwood 手术的婴儿的亚组中，抗 TKO IgM 或 IgG 结合没有增加。**naive0-12mexposed0-12m0204060100150200250RelatievGMW T Ig M1.2(26/50) (25/25)Anaive0-12mexposed0-12m0204060100150200250W T Ig GRelatievGM1.1**(38/50) (24/25)B2.02.5TKO IgMiveGM**C2.02.5T K O Ig GevGM**D

74图 1：天然未经处理的狒狒，非致敏的狒狒和致敏的狒狒血清 IgM（上图）和 IgG（下图）与PBMC 结合流式细胞术检测天然未经处理的狒狒（n = 8），非致敏的狒狒（n = 4）和致敏的狒狒（n = 4）血清 IgM（上图）和 IgG（下图）与（A）GTKO/CD46 猪和（B）狒狒的 CD3+T 细胞（来自 PBMC）的结合。尽管致敏的狒狒血清显示与 GTKO/CD46 猪PBMC 结合显著高的 IgM 和 IgG 抗体，但没有增加与狒狒 PBMC 的的结合的 IgM 和IgG 抗体（NS=不显著;*P<0.05）
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 窦冠珅;金泰廙;Agier L;Portengen L;Chadeau-Hyam M;;使用线性回归统计方法分析暴露组与健康相关性的系统比较(待续)[J];环境与职业医学;2017年02期

2 ;归因危险度[J];中国护理管理;2016年07期

3 白志鹏;陈莉;韩斌;;暴露组学的概念与应用[J];环境与健康杂志;2015年01期

4 戴贵生;;由三氯甲苯及氯苯甲酰吸入暴露所致小白鼠的致癌性研究[J];预防医学情报;1987年06期

5 韦世革;李天资;李雪斌;唐雄林;梁烨;;高铝暴露癫痫患者血铝、细胞因子水平的变化与临床的关系[J];实用医学杂志;2011年02期

6 吴泰顺;张宝莉;汪保国;;使用糖皮质激素对手足口病病情影响的回顾性队列研究[J];实用预防医学;2014年10期

7 韦世革;李天资;李雪斌;唐雄林;梁烨;;高铝暴露癫痫患者前炎症因子水平变化的临床观察[J];右江医学;2010年06期

8 董莉,李先春,高鸿翔,郭宜平,孙心德;生后早期听觉经验对小鼠声调分辨行为的影响[J];中国临床康复;2004年28期

9 文卫华;成会荣;王攀;李瑛;;职业砷接触工人外周血miRNA生成和成熟相关mRNA表达变化[J];慢性病学杂志;2015年05期

10 吴林林;吴钢;王军;高蓉;刘文卫;;职业性铬内暴露水平和血清素、五羟基吲哚乙酸、褪黑素水平的相关性研究[J];江苏预防医学;2019年06期

相关博士学位论文 前10条

1 刘胜学;1，3-丁二烯职业暴露人群HPRT基因分子突变机理的初步研究[D];第三军医大学;2004年

2 张林;乙醇与1,2-二氯乙烷联合暴露对小鼠肝和脑组织的损伤作用及其机制研究[D];中国医科大学;2019年

3 孙川;电磁场对不同遗传背景细胞基因组稳定性的影响研究[D];浙江大学;2016年

4 居颖;电子垃圾污染对当地居民内分泌干扰效应研究[D];华中科技大学;2008年

5 周艳冰;乙型肝炎病毒感染与代谢综合征关系的研究[D];复旦大学;2012年

6 黄波;神经肽P物质调控高氧损伤早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞修复的信号机制[D];重庆医科大学;2009年

7 赵雪松;四溴二苯醚与高氯酸盐对斑马鱼复合作用与毒性机制[D];哈尔滨工业大学;2013年

8 蔺新丽;纳米二氧化硅颗粒肺毒性及其相关机制研究[D];吉林大学;2011年

9 潘新娟;葡萄籽提取物抗砷诱导肝纤维化的作用机制[D];郑州大学;2014年

10 向梦龙;1，3-丁二烯职业接触人群基因多态性与遗传损伤的研究[D];第三军医大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 李琪;成人、婴儿和狒狒Gal，Neu5Gc和Sda抗原抗体表达及其临床意义[D];南华大学;2019年

2 陆晓桐;双酚A促进高脂饮食小鼠胰岛素抵抗中炎症小体NLRP3激活的研究[D];安徽医科大学;2019年

3 姚光耀;PM2.5暴露对人血清IL-4、IL-8水平的影响[D];河北北方学院;2018年

4 常椿欣;人类血清中农药暴露组检测方法的建立及应用[D];南京医科大学;2016年

5 周玲;妊娠期PFOA暴露对小鼠卵巢黄体功能的影响[D];南昌大学;2018年

6 信雪苓;生命早期饥荒暴露与血压、血脂的关系研究[D];青岛大学;2018年

7 罗时猛;IL-17在双酚A暴露诱导小鼠脂肪组织炎症中作用的研究[D];安徽医科大学;2017年

8 陶媛媛;《暴露组学入门》（第1-2章）翻译实践报告[D];北京林业大学;2016年

9 武艳华;不同温度下汞对草鱼的毒理学影响[D];西南大学;2016年

10 邢杰;农药暴露对花卉种植者健康影响的调查[D];昆明医学院;2006年

本文编号：2851733