过氧亚硝基阴离子在脓毒症心肌细胞促炎症转变中的作用

发布时间：2017-04-06 18:16

  本文关键词：过氧亚硝基阴离子在脓毒症心肌细胞促炎症转变中的作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨过氧亚硝基阴离子(Peroxynitrite,ONOO-)在脓毒症(Sepsis)心肌细胞转变为促炎症状态中的作用。方法动物研究实验中取12只SD大鼠(3~4月龄,200~250g,雌雄不拘),随机分为3组(n=4)。以3mg/g的剂量向大鼠腹腔注射大鼠盲肠内容物(180mg/ml)诱导大鼠腹膜炎(Feces Induced Peritonitis,FIP)作为脓毒症大鼠模型作为FIP组;对照组大鼠注射同等体积的生理盐水;接受过氧亚硝基阴离子的分解剂(Fe-TPPS,10mg/kg,ip)预处理1h后再经腹腔注射相应剂量的盲肠内容物作为Fe-TPPS+FIP组。6小时后取各组大鼠心室游离壁制作病理切片,并在Olympus显微镜下观察心肌间质中心粒细胞浸润程度;同时取各组心尖组织采用ELISA技术检测心肌组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)的活性;并收集对照组、FIP组大鼠血浆用于刺激心肌细胞。细胞研究实验中采用健康的SD乳鼠(日龄1~3d,雌雄不拘)心脏分离培养心肌细胞,分别经对照组、FIP组大鼠血浆刺激心肌细胞,使用ELISA、RT-PCR技术检测心肌细胞内ONOO-生成的标志物硝基酪氨酸(3-Nitrotyrosine,3-NT)、脂多糖诱导趋化因子(LPS-induced CXC Chemkine,LIX)及角质细胞起源趋化因子(Keratinocyte-derived Chemkine,KC)的表达情况。结果脓毒症大鼠心肌组织较对照组MPO活性升高,且心肌组织间隙炎症细胞浸润增加;脓毒症血浆刺激心肌细胞导致其ONOO-产生增加,心肌细胞转变为促炎症状态,趋化因子LIX、KC表达增加;用过氧亚硝基阴离子分解剂(Fe-TPPS,5,10,15,20-四磺酸基苯基-铁卟啉)预处理后,心肌组织较FIP组MPO活性显著降低、心肌组织间隙炎症细胞浸润减轻;心肌细胞内ONOO-减少,趋化因子LIX、KC表达降低。结论过氧亚硝基阴离子在脓毒症心肌细胞炎症反应中起重要作用。
【关键词】：脓毒症 过氧亚硝基阴离子 促炎症状态 心肌细胞
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R459.7
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 英文缩写10-11
• 第一章 绪论11-18
• 1.1 脓毒症概述11-16
• 1.1.1 脓毒症概念11
• 1.1.2 脓毒症致心肌损伤的发病机制11-14
• 1.1.3 脓毒症致心肌损伤的诊断与治疗14-16
• 1.2 过氧亚硝酸盐在脓毒症心肌损伤中的研究现状16
• 1.2.1 一氧化氮16
• 1.2.2 氧自由基16
• 1.2.3 过氧亚硝酸盐16
• 1.2.4 小结16
• 1.3 Fe-TPPS的性质及作用16-17
• 1.4 研究目的、内容17-18
• 1.4.1 研究目的17
• 1.4.2 研究内容17-18
• 第二章 SD新生鼠CM的原代培养18-23
• 2.1 材料18-19
• 2.1.1 实验动物18
• 2.1.2 实验试剂18
• 2.1.3 实验仪器18-19
• 2.1.4 溶液配制19
• 2.2 方法19-20
• 2.2.1 心肌细胞的分离、培养19-20
• 2.2.2 心肌细胞的形态学观察20
• 2.3 结果20-21
• 2.3.1 心肌细胞的形态学观察20-21
• 2.4 讨论21-22
• 2.5 小结22-23
• 第三章 大鼠脓毒症模型制备及血浆提取23-26
• 3.1 材料23-24
• 3.1.1 实验动物23
• 3.1.2 实验试剂23
• 3.1.3 实验仪器23
• 3.1.4 溶液配制23-24
• 3.2 方法24-25
• 3.2.1 大鼠脓毒症模型制备24
• 3.2.2 血浆的提取24-25
• 3.3 讨论25-26
• 第四章 心肌细胞ONOO-的测定26-31
• 4.1 材料26-29
• 4.1.1 实验动物26
• 4.1.2 实验试剂26
• 4.1.3 实验仪器26-28
• 4.1.4 溶液配制28-29
• 4.2 方法29
• 4.2.1 血浆的提取29
• 4.2.2 心肌细胞的分离、培养29
• 4.2.3 实验分组及处理29
• 4.2.4 3-NT标本的提取29
• 4.2.5 ELISA法检测 3-NT29
• 4.3 结果29-30
• 4.4 结论30-31
• 第五章 心肌细胞趋化因子表达测定31-41
• 5.1 材料31-34
• 5.1.1 实验动物31
• 5.1.2 实验试剂31-32
• 5.1.3 实验器材32-33
• 5.1.4 溶液配制33-34
• 5.2 方法34-37
• 5.2.1 血浆的提取34
• 5.2.2 心肌细胞的分离、培养34
• 5.2.3 RT-PCR法检测心肌细胞趋化因子（LIX、KC）mRNA的表达34-36
• 5.2.4 ELISA法检测心肌细胞趋化因子（LIX、KC）蛋白的释放36-37
• 5.3 统计分析37-38
• 5.4 结果38-39
• 5.4.1 趋化因子LIX、KC时间点的测定38
• 5.4.2 抑制ONOO-对趋化因子的影响38-39
• 5.5 结论39-40
• 5.6 讨论40-41
• 第六章 体内实验中脓毒症心肌组织炎症状态的评估41-48
• 6.1 材料41-42
• 6.1.1 实验动物41
• 6.1.2 实验试剂41
• 6.1.3 实验器材41-42
• 6.1.4 溶液配制42
• 6.2 方法42-43
• 6.2.1 提取心肌组织标本42
• 6.2.2 病理切片制作步骤42-43
• 6.2.3 ELISA检测心肌组织MPO活性43
• 6.3 统计学分析43-44
• 6.4 结果44-45
• 6.5 结论45-46
• 6.6 讨论46-48
• 第七章 主要结论和展望48-50
• 7.1 主要结论48
• 7.2 展望48-50
• 参考文献50-54
• 攻读硕士期间发表的论文54-55
• 致谢55

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚咏明,盛志勇;脓毒症研究的若干新动态[J];中国危重病急救医学;2000年06期

2 菲琳;;治疗脓毒症的新希望[J];国外医学情报;2002年10期

3 向阳;防止脓毒症自高动力相转向低动力相的新途径[J];国外医学.外科学分册;2003年03期

4 任新生;重新认识全身炎症反应综合征、脓毒症和多器官功能衰竭综合征[J];中华急诊医学杂志;2004年02期

5 崔德健;探讨脓毒症诊断和治疗新策略[J];中国呼吸与危重监护杂志;2004年03期

6 林洪远;脓毒症诊断和治疗进展[J];中国实用外科杂志;2004年06期

7 汤耀卿;脓毒症的定义和诊断[J];临床外科杂志;2004年11期

8 王小平;脓毒症研究现状[J];实用临床医学;2005年06期

9 周国勇;性别与脓毒症严重程度的关系[J];中国危重病急救医学;2005年07期

10 黎永明;姜勇;;脓毒症发生机制的新进展[J];感染.炎症.修复;2005年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张丽葳;奚希相;张威;张莉芬;陈昊;李俊;杨兴易;;以血小板减少为主要表现的脓毒症抢救一例[A];《中华急诊医学杂志》第八届组稿会暨急诊医学首届青年论坛论文汇编[C];2009年

2 张振辉;林s钜

本文编号：289414