特异结合乙肝e抗原的核酸适体的筛选及其检测应用

发布时间：2021-01-27 03:08

　　乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）是引起病毒性肝炎的主要病原体之一,乙肝在全世界范围内广泛流行,经粗略估计,全世界约30%的人口血清学检测显示其曾经或仍然处于乙肝病毒感染状态。而在所有的肝癌患者中,半数是由于乙肝病毒感染所致。鉴于此,全球卫生组织已将病毒性肝炎囊括进了重大公共卫生优先项目中。具有临床意义的乙肝病毒蛋白主要包括乙肝核心抗原,乙肝e抗原和乙肝c抗原,其中乙肝e抗原（hepatitis B virus e antigen, HBeAg）是乙肝病毒内核的主要结构蛋白,血清中的HBeAg是一种病毒标志物,是乙肝病毒在人体内复制过程中的一个主要产物,该抗原不仅在临床上被用作为判断HBV活动性复制的指标之一,还在慢性乙肝的最基本治疗,即抗病毒治疗中发挥中重要的指导作用,更有研究显示,HBeAg在母婴传播中也起着重要。但是传统的酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测HBeAg存在灵敏度低,假阳性,重复性差等缺点。核酸适体是一段经体外筛选得到的单链DNA或RN A,由于其特殊的理化性质,目前能用抗原抗体反应进行诊断的技术几乎都可以用适体替代。本文以特异性检测IBe... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 乙型肝炎
        1.1.1 乙型肝炎流行现状
        1.1.2 乙型肝炎病毒e抗原
    1.2 核酸适体
        1.2.1 核酸适体的性质及应用
        1.2.2 核酸适体的筛选
    1.3 核酸适体传感器
        1.3.1 结合荧光的核酸适体传感器
        1.3.2 结合金纳米颗粒的核酸适体传感器
    1.4 本论文的主要研究目的与内容
    1.5 参考文献
第二章 HBeAg特异性DNA适体的筛选和分析
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 材料准备
        2.2.4 四氧化三铁磁珠修饰HBeAg蛋白
        2.2.5 以羧基化磁珠为介质的SELEX筛选法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 不对称PCR体系优化
        2.3.2 SELEX筛选结果
    2.4 本章小结
    2.5 参考文献
第三章 核酸适体荧光法检测HBeAg
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 F-DNA和D-DNA结合条件的优化
        3.2.4 核酸适体荧光-猝灭体系检测HBeAg的范围
        3.2.5 核酸适体荧光-猝灭体系检测HBeAg的特异性实验
        3.2.6 核酸适体荧光-猝灭体系检测HBeAg条件优化
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 F-DNA和D-DNA结合条件的优化
        3.3.2 适体-荧光猝灭体系对HBeAg蛋白的检测范围
        3.3.3 HBeAg蛋白与适体结合的特异性检测
        3.3.4 核酸适体荧光-猝灭体系检测HBeAg条件优化
    3.4 本章小结
    3.5 参考文献
第四章 核酸适体结合金纳米检测HBeAg蛋白
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验仪器
        4.2.3 金纳米的制备
        4.2.4 金纳米和核酸适体结合条件的优化
        4.2.5 核酸适体结合金纳米检测HBeAg蛋白条件的优化
        4.2.6 核酸适体结合金纳米检测HBeAg蛋白的特异性实验
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 金纳米颗粒表征
        4.3.2 金纳米和核酸适体结合条件的优化
        4.3.3 核酸适体结合金纳米检测HBeAg蛋白的条件优化
        4.3.4 核酸适体结合金纳米检测HBeAg蛋白的特异性实验
    4.4 本章小结
    4.5 参考文献
第五章 总结与展望
    5.1 论文总结
    5.2 论文的创新点
    5.3 今后工作
硕士期间发表的论文
致谢



本文编号：3002312