IL-6/AMPK信号通路对脓毒症星形胶质细胞线粒体生物发生的影响及机制

发布时间：2021-02-01 18:45

　　研究背景与目的脓毒症是感染引起的全身炎症反应综合征,本质是机体对于感染反应失调而引起的器官功能障碍。脓毒症发病率和死亡率均很高,是儿科重症监护病房（PICU）的主要重症和主要死亡原因之一。脓毒症相关性脑病是由脓毒症所致的弥散性脑功能障碍。脑是脓毒症最早累及的脏器之一,在脓毒症早期即可出现。IL-6是一种多功能性炎症介质,同时具有抗炎、促进再生及促炎的双向作用。AMPK主要调控细胞内的代谢和能量平衡,被称为“细胞能量调节器”。研究发现IL-6可通过增加一磷酸腺苷的浓度激活AMPK,而AMPK对线粒体生物发生和自噬存在调控作用。因此,本实验拟探讨IL-6对脓毒症星形胶质细胞线粒体生物发生的影响,并进一步验证这种影响是否通过AMPK信号通路来实现的。研究方法第一部分:分离新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞（AS）并纯化培养,将AS随机分成对照组、脂多糖+干扰素-γ组（LPS+IFN-γ组）、LPS+IFN-γ+IL-6组（IL-6组）、LPS+IFN-γ+IL-6 受体小干扰 RNA+IIL-6 组（siRNA 组）、LPS+IFN-γ+阴性对照+IL-6组（NC组）5组,处理时间均为6小时。随后... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１原代大鼠大脑皮质星形胶质细胞纯度鉴定（ｘ２００）??Ａ：倒置显微镜明场下的大鼠大脑星形胶质细胞

?ＷｅＶＷ－ｓｗ■丨??蕃?—?議?ｒ°°??ｒ?Ｉ?＿?Ｌ?＿??图１－３各组星形胶质细胞中ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ、ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ及ＲＯＳ水平的比较??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ＞?ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｎｄ?ＲＯＳ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ??ｇｒｏｕｐ??Ａ：ＴＮＦ－ｃｔｍＲＮＡ和ＩＬ－ｉｐｍＲＮＡ的相对表达量。Ｂ：ＲＯＳ的水平比较。与对照组比较，ａＰ＜??０．０５。Ａ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ＴＮＦ－ａ?ｍＲＮＡ?ａｎｄ?ＩＬ－ｉｐ?ｍＲＮＡ．?Ｂ：?Ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＲＯＳ．?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?ａＰ?＜０．０５．??４各组原代星形胶质细胞ＡＴＰ水平检测结果??与对照组相比，其余４组的ＡＴＰ水平显著升高，差异有统计学意义（尸＜??０．０５）；与ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ组相比，ＩＬ－６组ＡＴＰ水平升高（ＰＣ０．０５）；与ＩＬ－６组相比，??ｓｉＲＮＡ组ＡＴＰ水平下降（Ｐ＜０．０５），?ＮＣ组ＡＴＰ水平下降（Ｐ＜０．０５），见表１－２、??图?１－４。??表１－２各组细胞内ＡＴＰ水平的比较?Ｐ土ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－２?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＡＴＰ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（ｘ±ｓ）??２４??

与对照组相比，其佘４组细胞存活率均显著下降（Ｐ＜０．０５）；而与ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ??组相比，ＩＬ－６组细胞存活率显著升高（ＰＣ０．０５）；与ＩＬ－６组相比，ｓｉＲＮＡ组和??ＮＣ组细胞存活率均显著下降（ＰＣ０．０５），见表１－４、图１－６。??表１－４各组细胞的细胞存活率的比较?（￥±ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（尤?士ｓ）??组别?例数?细胞存活率（ｘ?１００％）??对照组?５?１．０００±０．００１??ＬＰＳ＋ＩＦＮ－ｙ组?５?０．８４０±０．０１３ａ??ＩＬ－６?组?５?ＯＳｌＯｉＯ＾８１５??ｓｉＲＮＡ?组?５?０．６８０±０．０４０ａｂｃ??ＮＣ?组?５?０．７４３±０．０２４ａｂｃ??Ｆ?值?１４１．５２１??Ｐ?值?０．０００??２７??

【参考文献】：
期刊论文
[1]饥饿诱导下小鼠成骨细胞自噬与凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陈倩倩,刘祁,周云,晏燕,曹军.  川北医学院学报. 2015(02)
[2]活化星形胶质细胞中线粒体生物发生增强[J]. 王阳,陶少华,陈志江,曾其毅.  中华神经医学杂志. 2014 (10)



本文编号：3013251