外源性硫化氢对脓毒症巨噬细胞氧化还原平衡的影响

发布时间：2021-02-19 08:24

　　脓毒症是因宿主对感染的反应失调而导致的危及生命的器官功能障碍,是临床上急危重患者常见的严重并发症,可进展为重症脓毒症、脓毒症休克,最终导致死亡。多种机制参与脓毒症的发生与发展。其中氧化应激作为脓毒症发展成重度脓毒症、脓毒症休克的重要原因,近年受到国内外学者的重视。目的:研究外源性硫化氢（H₂S）对脓毒症巨噬细胞氧化还原平衡的影响。方法:培养小鼠腹腔巨噬细胞株J774,分为A组:缓冲液（PBS）（1ml/ml）;B组:脂多糖（LPS）（1μg/ml）;C组:炔丙基甘氨酸（PAG）（1mmol/L）+LPS（1μg/ml）;D组:GYY4137（500μmol/L）;E组:GYY4137（500μmol/L）+LPS（1μg/ml）。ELISA测定各组细胞培养上清中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）的含量及细胞上清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）的活性,用透射电镜观察各组细胞中线粒体数量及形态的变化。结果:B组ROS浓度为90.293±0.217IU/ml,MDA为1.665±0.068nmol/ml,SOD为89.... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GYY4137释放H2S机理图

盒说明书要求，首先配置试剂，然后按照操作表进：加样→混匀→封板膜封板→5ml 空针针头刺一小→流水冷却→以双蒸水调零→测量各孔的 OD 值（数据，记录每组所测 OD 值，将有明显偏差的实验立 9 个复孔，至少存在 7 个复孔可用方为测定成功每组实验重复 3 次，求 3 次所测 OD 值的均数及标试剂盒说明书中的计算公式中得出细胞上清液中的上清中超氧化物歧化酶（SOD）活力理如图 2

表现为细胞悬浮，透亮度增加，细胞核浓缩，胞质空泡化，而 E 组和 A 组细胞相比只发生轻度细胞质脂肪化（图3）。注：a：A 组（对照组）；b：E 组（GYY4137+LPS 组）；c：B 组（LPS 组）图 3 光镜下小鼠腹腔巨噬细胞形态（×200）2.小鼠腹腔巨噬细胞透射电镜下形态透射电镜下观察到 B 组巨噬细胞线粒体数目较 A 组相对减少，线粒体形态发生肿胀、空泡化，嵴变宽、基质浓缩，而 E 组和 A 相细胞相比只发生轻度的线粒体基质浓缩（图 4）。注：黑色箭头所示为巨噬细胞内线粒体 a：A 组（对照组）；b：E 组（GYY4137+LPS 组）；c：B 组（LPS 组）图 4 透射电镜下小鼠腹腔巨噬细胞线粒体形态（×10000）


本文编号：3040857