实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增技术检测寨卡病毒方法的建立
发布时间:2021-04-05 21:50
目的建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)技术检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法,以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法通过基因组序列比对,选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针,并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性,通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增,检测系列稀释的ZIKV重组质粒,其95%检测限可达到15拷贝/反应,特异性强,与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应,且重复性好。结论本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法,具有反应迅速,无需精密仪器,操作简单等优点,适合于应急快速检测。
【文章来源】:国际病毒学杂志. 2020,27(03)
【文章页数】:5 页
【参考文献】:
期刊论文
[1]寨卡病毒病防治中国专家共识(2019)[J]. Society of Tropical Medicine and Parasitology of Chinese Medical Association;Society of Infectious Diseases of Chinese Medical Association;. 传染病信息. 2019(01)
[2]重组酶介导扩增方法快速检测寨卡病毒[J]. 袁帅,郑夔,洪烨,孙芳芳,黄吉城,李小波,戴俊,师永霞,康晓平,李裕昌. 中国国境卫生检疫杂志. 2018(03)
[3]寨卡病毒检测方法的研究进展[J]. 李浪,李华文,顾大勇,何建安. 医学研究生学报. 2018(05)
[4]寨卡病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒三重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价[J]. 龚雪蕊,李阿茜,刘洋,李川,张全福,李德新,梁米芳,王世文. 病毒学报. 2018(01)
本文编号:3120165
【文章来源】:国际病毒学杂志. 2020,27(03)
【文章页数】:5 页
【参考文献】:
期刊论文
[1]寨卡病毒病防治中国专家共识(2019)[J]. Society of Tropical Medicine and Parasitology of Chinese Medical Association;Society of Infectious Diseases of Chinese Medical Association;. 传染病信息. 2019(01)
[2]重组酶介导扩增方法快速检测寨卡病毒[J]. 袁帅,郑夔,洪烨,孙芳芳,黄吉城,李小波,戴俊,师永霞,康晓平,李裕昌. 中国国境卫生检疫杂志. 2018(03)
[3]寨卡病毒检测方法的研究进展[J]. 李浪,李华文,顾大勇,何建安. 医学研究生学报. 2018(05)
[4]寨卡病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒三重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价[J]. 龚雪蕊,李阿茜,刘洋,李川,张全福,李德新,梁米芳,王世文. 病毒学报. 2018(01)
本文编号:3120165
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