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我国四省人腺病毒4型的基因特征分析

发布时间:2021-04-06 23:28
  研究目的在分子水平上初步探讨我国大陆地区流行HAdV-4病毒株的基因特征与分子进化规律,为我国HAdV-4疫情的监测、相关疾病的诊断与防控以及疫苗研究提供基础数据。研究方法对2013~2015年间在发热呼吸道症候群监测病例中鉴定为HAdV-4阳性的临床标本进行病毒分离,对HAdV-4病毒分离株分别进行三个靶基因(Penton base、Hexon和Fiber)以及全基因组(Whole-genome sequences,WGS)序列扩增和测定,同时下载GenBank数据库中所有我国及全球流行HAdV-4病毒株的上述基因序列,构建基因数据库,并使用相关生物信息学分析软件进行基因特征和分子进化分析。研究结果(1)从2013~2015年间的发热呼吸道症候群监测病例获得HAdV-4病毒分离株共计6株,分别来自陕西(2株)、云南(2株)、吉林(1株)和山东(1株),覆盖我国东北、华东、西北和西南部地区;(2)基因亲缘性关系分析结果显示,全球流行HAdV-4病毒株可划分为HAdV-4p和HAdV-4a两个进化分支,我国大陆地区自2008年至今流行的HAdV4病毒株均属于HAdV-4a进化分支,与全球... 

【文章来源】:安徽理工大学安徽省

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

我国四省人腺病毒4型的基因特征分析


图3?HAdV?PCR扩增产物的凝胶电泳鉴定结果??1:?Shandong2014-1614?标本的?PCR?产物;2:?Yunnan2014-2()08?标本的?PCR?产物;3:阳??

序列,部分序列,核苷酸序列测定,基因


750.?1000?and?2000;?5:?EX-NC:?6:NC??3.3.2斤:列测定结采??以标本Shandong2014-I614卜_游引物Adi测得的部分序列为例(图4),所??Yj?vlj株均获得良好的碱基峰图。??3.3.3?HAdV毒株的初步型别鉴定??将获得的病毒株L〇〇P2基因片段原始核苷酸序列,经Sequencher?5.0软件序??列整理后,与腺病毒A?G?7个亚属共30种基因型代表株进行系统发育分析,共??鉴定出6株HAdV-4病毒株,用于本实验的研究,初步基因定型鉴定结果见图5。??-15-??

标本,产物,靶基因,鉴定结果


base、Hexon-1、Hexon_2?和?Fiber?为例,长度分别为?2070bp、1689bp、1440?和??1706bp〇经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后在相应大小范围能看到清晰的阳性条带,??如图6所示。??■〇?麵:■囉|:__獨::??誦…??750^??SOOB^^j?a?'"%"?'^4..;?f-?'?-ft??l?〇〇?■■??图6?HAdV?PCR扩增三个靶基因产物的凝胶电泳鉴定结果(以标本川丨112014-3372扩增??结果为例)??1:?DNA分子量对照(DL5000):阳性条带自下往上分别为100,?250,500,?750,?1000,??1500.2000.3000?和?5000;?2:?Jilin2014-3372?标本的?PentonbasePCR?产物;3:Jilin2014-3372??标本的?Hexon-1?PCR?产物;4:?Jilin2014-3372?标本的?Hexon-2PCR?产物;5:?Jilin2014-3372??标本的RberPCR产物;6:阴性对照??Fig?6?The?electrophoretic?analysis?results?of?HAdV?PCR?amplicons??1:?DNA?Marker(DL5000)

【参考文献】:
期刊论文
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[2]西安市流感样病例中人腺病毒感染特点分析[J]. 许晶,岳姝婷,马萍,张蕾,史伟,徐艺,李慎,关路媛,王敬军,余鹏博.  中华实验和临床病毒学杂志. 2017 (03)
[3]2013-2014年长沙急性下呼吸道感染住院儿童腺病毒的分子流行特征[J]. 罗小芳,张兵,段招军,刘沁,谢志萍.  中华实验和临床病毒学杂志. 2015 (06)
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本文编号:3122352

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