基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱用于细菌鉴定和同源性分析能力的实验研究

发布时间：2021-05-21 17:48

　　目的:研究基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪（matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）对细菌鉴定和耐药菌同源性分析方面在临床实验室应用的可行性。方法:收集2015年1月至2016年1月我院临床标本分离获得的非重复样本,共440株。首先,利用VITEK 2全自动微生物鉴定及药敏系统（采用传统生化反应技术）和VITEK MS全自动快速微生物质谱仪（采用MALDI-TOF MS技术）对这些株细菌进行鉴定。然后,将上述方法鉴定结果不一致菌株再用细菌核糖体16S rRNA基因序列分析进行鉴定;同时,对基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪在检测周转时间（Turn-around time,TAT）方面的优势进行评价。此外,收集2017年10月¹2月,经改良Hodge实验（Modified Hodge test,MHT）筛选为阳性的肺炎克雷伯菌95株。利用多位点序列分型（Multilocus sequence typing,MLST）、Mi... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语表
摘要
Abstract
前言
第一部分 仪器与试剂
    1.1 菌株来源
        1.1.1 MALDI-TOF MS鉴定所用菌株
        1.1.2 MALDI-TOF MS对CRKP同源性分析所用菌株
        1.1.3 VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统校准菌株
        1.1.4 实验质控菌株
    1.2 主要试剂配制方法
        1.2.1 菌株保存培养基
        1.2.2 70%甲酸溶液
        1.2.3 标准溶剂
        1.2.4 HCCA溶液
    1.3 主要试剂
    1.4 主要仪器
第二部分 MALDI-TOF MS用于鉴定常见细菌能力的研究
    2.1 实验设计及技术路线
    2.2 VITEK2鉴定分析
        2.2.1 主要操作步骤
        2.2.2 实验结果
    2.3 MALDI-TOF MS鉴定分析
        2.3.1 主要操作步骤
        2.3.2 实验结果
    2.4 16S rRNA基因分析方法对15株不一致菌株的鉴定分析
        2.4.1 主要操作步骤
        2.4.2 实验结果
    2.5 讨论
第三部分 MALDI-TOF MS对CRKP同源性分析能力的研究
    3.1 实验设计及技术路线
    3.2 改良Hodge实验(MHT)
        3.2.1 主要步骤
    3.3 多位点序列分型(MLST)
        3.3.1 主要步骤
        3.3.2 实验结果
    3.4 MALDI-TOF MS同源性分析
        3.4.1 主要操作步骤
        3.4.2 95株CRKP鉴定得分
        3.4.3 95株CRKP聚类分析结果
    3.5 讨论
第四章 结论与展望
参考文献
附录A 同源性分析质谱靶板位点编号与样本编号对应表
附录B 95株CRKP MALDI-TOF MS鉴定得分详表
作者在学期间取得的学术成果
主要简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]2014-2017年某三级甲等综合医院医院感染现患率的变化趋势分析[J]. 李璐,索继江,高岩,谢丽君,刘伯伟,姚宏武,刘运喜.  中华医院感染学杂志. 2018(08)
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[10]耐药性细菌碳青霉烯酶检测方法研究进展[J]. 徐建民,陈水平,陈建魁.  标记免疫分析与临床. 2017(03)

硕士论文
[1]耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药性及同源性研究[D]. 谢思.南方医科大学 2017



本文编号：3200122