次磺酸化蛋白的小分子荧光探针设计及活细胞原位显影

发布时间：2021-07-21 03:01

　　氧化应激与许多疾病的发生有密切的联系,尤其是阿兹海默病、帕金森式病等神经退行性疾病。氧化应激过程中,蛋白质巯基部分氧化生成次磺酸化蛋白,这是活性氧氧化蛋白质的关键中间产物。蛋白次磺酸官能团也可被还原成巯基,或继续氧化成亚磺酸和磺酸,当其被氧化成磺酸后,则难以逆转造成蛋白质的持续损伤。次磺酸化蛋白是机体和细胞感受氧化应激的重要瞬时标志物。因此,建立检测次磺酸化蛋白,尤其分析细胞内特定信号通路中对活性氧敏感蛋白的次磺酸化程度的方法,对于研究氧化应激调控机制和损伤修复机制非常重要。目前检测氧化应激中间产物次磺酸化蛋白常用免疫学方法,但灵敏度低。相反,小分子化学探针体积小而通用性更强。但目前应用小分子直接检测次磺酸化蛋白的方法较少。本文以8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二钠盐作为荧光基团,氰基乙酸、3,5-环己二酮羧酸、（苯磺酰基）乙酸作为次磺酸反应基团,溴乙胺、对氨基苯甲酸作为连接基团设计合成了一系列荧光探针。表征其荧光光谱,及其温度、pH效应,以牛血清白蛋白经氧化生成次磺酸化蛋白模型,研究了探针标记后的荧光共振能量转移（FRET）效应,探针标记的选择性。进一步经肺癌上皮细胞A549在H

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

荧光探针示意图

1H), 7.88 (t, J = 18.1 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.27 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.8), 3.10 (m, 6H), 2.48(m, 1H).obe-IV 鉴定结果: HRMS(ESI-TOF)[M+Na]+: m/z 634.9333.13C NMR(151 MSO) 169.36, 163.63, 146.05, 145.11, 144.15, 142.68, 135.13, 131.71, 1308.72, 128.23, 126.55, 124.50, 121.30, 120.05, 119.12, 114.24, 113.28, 110.02, 27 NMR (600 MHz, DMSO) 8.86 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.01 (m, 2H), 8.01(m, 7 (d, J = 31.9 Hz, 3H), 7.00 (d, J = 27.8 Hz, 1H), 3.02 (m, 2H), 1.94(m, 1H).obe-V 鉴定结果: HRMS(ESI-TOF)[M+Na]+: m/z 630.8895.13C NMR (151 MSO) 165.76, 145.83, 142.92, 141.97, 138.80, 135.80, 133.86, 132.40, 1299.35, 129.01, 126.42, 124.37, 122.17, 118.75, 113.66, 109.66, 62.75.1H NMR Hz, DMSO) 8.46 (m, 1H), 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 2H), 7.94(m, 3(m, 1H), 7.59(m, 2H), 7.38(m, 1H), 7.17 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.36(m, 2H), 2.97).

bProbe-I核磁共振碳谱


本文编号：3294170