海带多糖对放射诱导损伤的神经细胞、内皮细胞影响的体外研究

发布时间：2021-08-17 21:30

　　放射性脑损伤（Radiation brain injury,RBI）指头颈部恶性肿瘤放疗后一种严重的并发症,目前尚缺乏有效的治疗方法。海带多糖（Laminaria japonica polysaccharides,LJP）是海带中分离提取的生物活性多糖,具有提高免疫力、抗肿瘤、防辐射等作用。本课题组前期研究发现LJP能改善RBI的记忆功能障碍,然而其机制尚未清楚。鉴于此,本项目通过体外培养神经细胞、脑血管内皮细胞,建立放射损伤的神经细胞、内皮细胞模型,从细胞和分子水平观察LJP对放射损伤的神经细胞和脑血管内皮细胞的影响,揭示LJP在放射诱导脑损伤中的作用机制。1.第一部分:SD乳鼠神经细胞、脑血管内皮细胞的分离、原代培养和鉴定清洁级12h内新生的SD乳鼠,取脑皮质,分离和培养皮质中的神经元、神经胶质细胞及脑微血管内皮细胞,在倒置显微镜下观察不同培养时间的细胞形态和数量变化,体外培养至细胞成熟后利用NSE、GFAP、vWF抗体分别标记神经元细胞、神经胶质细胞及脑血管内皮细胞,进行免疫荧光染色鉴定,结果表明:（1）神经元细胞:培养4-5 h,大部分细胞贴壁,胞体呈圆形,少数细胞出现细小的突... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代培养的皮层神经元细胞生长的情况

神经元细胞的评估鉴定，NSE 细胞免疫荧光染色（2 Assessment of neurons, immunofluorescence stainin细胞的原代培养较好的折光性，贴壁情况良好，部分细第 2d 显微镜下观察无法贴壁的死亡细多数胶质细胞开始长出了细小的胞突大部分细胞呈多角形，伪足变大、增多细胞间的边缘难以辨认。传代的神经胶净，均匀贴壁，生长良好。

图 1-3 皮层神经胶质细胞生长情况。A.接种 24h 换液后;B.接种第 3d;C.接种第 5d;D.接种第胞状态;E 神经胶质细胞传代第 1dFig.1- 3 Growth of cortical glial cells.A. inoculation of 24h after inoculation; B. Inoculation of Inoculation of 5d; D. inoculation of the cell state of 7d; E neuroglial cells were transferred to 1d.

【参考文献】：
期刊论文
[1]星形胶质细胞功能紊乱与中枢神经系统疾病[J]. 闵芳沅,李鑫,王珊.  中南药学. 2017(04)
[2]调强放疗对中晚期鼻咽癌放射性脑损伤的相关影响[J]. 徐洁,李祎萍,钱荣誉.  中华肿瘤防治杂志. 2016(S2)
[3]一种高纯度小鼠原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法[J]. 张作慧,陈晨,陈浩,崔桂云,花放.  中国组织工程研究. 2016(51)
[4]原代大鼠脑微血管内皮细胞培养方法的改进[J]. 徐平湘,齐特,陆莉,薛明,肇玉明.  首都医科大学学报. 2016(05)
[5]新生大鼠海马神经元细胞体外培养方法改良研究[J]. 郭慧,俞丹,周晖,童煜,王峥.  中华妇幼临床医学杂志(电子版). 2016(01)
[6]一种高纯度和高活力的大鼠脑微血管内皮细胞的提取及原代培养方法[J]. 查雨锋,张顺,苏航,刘亭,傅晓钟,董永喜,王爱民,王永林.  中国药理学通报. 2014(11)
[7]放射性脑损伤的研究现状[J]. 张海博,梁海乾,涂悦,张赛.  山东医药. 2014(26)
[8]海带多糖对心理应激大鼠血管内皮细胞释放血管舒缩因子的调节作用研究[J]. 黎静,谢露,杨晓梅,梁斌,张星.  中国现代医学杂志. 2013(08)
[9]一种简易稳定的乳小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法[J]. 熊永洁,尹波,甘莉,王倩,张苏明.  华中科技大学学报(医学版). 2012(06)
[10]海带多糖预防大鼠动脉粥样硬化的研究[J]. 陈向凡,王玉琴,陈建忠,张伟.  中药药理与临床. 2012(05)

博士论文
[1]海参糖胺聚糖抑制血小板—内皮细胞粘附及其机制的研究[D]. 王曼玲.复旦大学 2006

硕士论文
[1]三株不同海洋环境来源微生物胞外多糖的结构研究[D]. 陈成龙.中国海洋大学 2015



本文编号：3348535