UCP2在脓毒症星形胶质细胞中的表达及意义

发布时间：2021-09-30 01:44

　　研究背景与目的脓毒症是机体对感染的反应失调所导致的器官功能障碍,具有很高的发病率和死亡率,是儿科重症监护病房（PICU）主要的死亡原因。脓毒症相关性脑病（SAE）是一种由脓毒症所致的弥散性脑功能障碍,可出现在脓毒症的早期,其感染部位常位于中枢神经系统之外。解耦联蛋白2（UCP2）是线粒体解耦联蛋白家族成员之一,广泛分布在大脑、心脏、肺脏等器官和组织中,参与多种病理生理过程。研究表明,在脑卒中模型和急性脑损伤模型中,UCP2可以通过减轻细胞炎症和抑制细胞凋亡来实现一定的神经保护作用,而我们的前期研究证实,在脓毒症心肌细胞模型中,UCP2可以通过解耦联实现对线粒体膜电位（MMP）和ATP合成的调控。因此,本实验拟探讨UCP2在脓毒症星形胶质细胞模型中的表达,以及其对线粒体功能的影响。研究方法第一阶段:分离纯化新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞（Astrocyte,AS）,随机将AS分为4组:正常对照组（对照组）;LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+6 小时组（LPS+IFN-γ+6h组）:LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+12 小时组（LPS+IFN... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－３各组星形胶质细胞中ＵＣＰ２蛋白表达水平比较

＜０．０５），其中ｓｈＲＮＡ?－ＵＣＰ２－１６沉默序列转染的细胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表达水平??最低（０．２１４±０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，与对照组相比差异具有统??计学意义（ＰＣ０．０５），见表２－３图２－４。故选择ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６转染序列进行??后续实验。??确定转染序列后，将转染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以不同浓度（２５ｍｏｉ、５０ｍｏｉ、??ｌＯＯｍｏｉ）转染入原代星形胶质细胞内，正常培养４８小时收集细胞进行荧光定量??ＰＣＲ的结果显示：各组ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表达水平均显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），??其中当ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ浓度转染到细胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表达水平最??低（０．２１４土０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，与空载病毒组相比差异具有??统计学意义（Ｐ＜〇．〇５），见表４图５。故选择转染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ??浓度进行后续实验。??３５??

／ｙｙｙ??，ｆ?，??图２－４：各组星形胶质细胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表达水平比较?（ｘ±ｓ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＵＣＰ２?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（ｘ±ｓ）??注：与对照组比较，ａＰ＜０．０５．ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?３户＜〇．０５．??表２４：各组星形胶质细胞中ＵＣＰ２蛋

【参考文献】：
期刊论文
[1]脓毒症致线粒体损伤的研究进展[J]. 盛悦,王锦权.  中华急诊医学杂志. 2018 (05)
[2]胰岛素对脓毒症大鼠脑组织的保护作用及机制[J]. 王桃,陈亦婷,张俊亮,陈广道,张炬兴,黄锦达,曾其毅.  中华实用儿科临床杂志. 2017 (11)
[3]脓毒症相关性脑病远期脑线粒体损伤与氧化应激的关系[J]. 吕娟娟,陈志江,郑贵浪,王斌,陶少华,项丹,谢美燕,刘翠,黄锦达,曾其毅.  中华实用儿科临床杂志. 2015 (11)
[4]UCP2基因siRNA转染对脓毒症血清诱导心肌细胞炎症反应的影响[J]. 陈志江,宋远斌,王惠丽,王阳,吕娟娟,车頔,曾其毅.  中国当代儿科杂志. 2014(08)
[5]解耦连蛋白2在脓毒症大鼠心肌组织中的动态表达变化[J]. 陈志江,王惠丽,王阳,宋远斌,车頔,吕娟娟,曾其毅.  发育医学电子杂志. 2014(02)



本文编号：3414874