MRI示踪低氧预处理骨髓间充质干细胞修复关节软骨损伤的研究

发布时间：2021-11-20 10:01

　　一、研究背景、研究目的由于软骨组织中血管缺乏、自我修复能力差,关节软骨损伤难以修复。研究证明,骨髓间充质干细胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs）具有多向分化的潜能,是修复关节软骨损伤的理想种子细胞。然而,BM-MSCs成软骨分化能力较低,治疗效果仍欠佳。本研究旨在探索BM-MSCs在低氧环境及超顺磁性氧化铁纳米颗粒（Superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs）共同调节下对其生物安全性及对分化、迁移能力的影响,证明BM-MSCs在内外环境的协同作用下,可以增强其向成软骨分化及迁移的能力,为治疗关节软骨损伤提供一个安全、有效的办法。二、研究方法本研究首先构造了SPIONs,并在不同氧浓度下标记大鼠来源的BM-MSCs,实验分组为常氧未标记组、常氧标记组、（低氧未标记组）、低氧标记组。体外通过流式细胞术检测细胞的表型、周期、凋亡及活性氧情况;通过Transwell、划痕、qRT-PCR及Western blot等实验检测其迁移能力;通过诱导培养、qRT-PCR及Westernblot... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－ｌ．ＳＰ丨ＯＮｓ的理化性质

图３－２．比色法检测低氧和常氧的培养条件下孵育不同浓度不同时间ＢＭ－ＭＳＣｓ内摄取铁??

被ＢＭ－ＭＳＣｓ吞噬后在其细胞内的定位。激光共聚焦图片提示ＳＰＩＯＮｓ标记ＢＭ－??ＭＳＣｓ后，几乎所有ＢＭ－ＭＳＣｓ均发出绿光，提示ＳＰＩＯＮｓ标记率接近１００％，而??且不同氧浓度条件不影响超顺磁性纳米氧化铁颗粒的标记率（图３－３Ａ）。流式细??胞术检测到不同氧浓度条件下超顺磁性纳米氧化铁颗粒的标记率均可达１００％??（图３－３Ｃ），结果与免疫荧光结果相似。透射电镜结果则提示超顺磁性纳米氧化??铁颗粒被ＢＭ－ＭＳＣｓ吞噬后位于细胞质内（图３－３Ｂ），同时显示了不同的氧浓度??并不影响细胞标记率。??Ｕｎｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ?ＳＰＩＯＮｓ?Ｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ?ＳＰＩＯＮｓ?Ｌａｂｅｌｅｄ?Ｃｅｌｌｓ??（２０％?０２）?（２０％?０２）?（１％?０２）??Ａ＿＿＿??ｃ??＾２ｂＤ???３００ｊ??３５〇１???芒?２００?、、＇?０．０７％?＾ｌｏｏ?１００％?ｋ?＾２５０?１００％?ｋ??ｊ；：?ｔ?Ａ?Ａ??５０?５０??０?ｉｂ＇?ｉｏ！￣￣１０ｓ?ｉｏ４￣ｗ?０?ｉ〇＇?ｉｏ！?ｉｏ３?ｉｏ４?ｉｏ５?０?ｉｄ１?ｉｏ＇２?ｉｄ３?ｉｏ＾ｉｏｓ??ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ??图３－３．检测ＢＭ－ＭＳＣｓ的标记率。Ａ）激光共聚焦显示不同氧浓度培养下未标记和标记组??的ＢＭ－ＭＳＣｓ荧光（比例尺＝１００?ｎｍ），包裹了?Ｆ１ＴＣ的纳米晶体为绿色荧光，细胞核ＤＡＰＩ??染色呈蓝色；Ｂ）透射电镜显示不同氧浓度培养下未标记和标记的ＢＭ－ＭＳＣｓ，黄色箭头所指??细胞摄取的纳米颗粒


本文编号：3507090