多重实时PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的应用分析

发布时间：2017-05-10 10:10

  本文关键词：多重实时PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的应用分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的应用多重及单一实时聚合酶链式反应(Real-time Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis,PDAP)常见致病菌分布,将两种方法结果相比较,旨在探讨实时多重PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的临床应用价值。方法收集70例患者的腹透液标本,分别行传统细菌培养与荧光染料法细菌通用引物RT-PCR检测。根据70例样本培养结果及相关参考文献,选取最常见的6种PDAP致病菌作为检测菌,设计各检测菌特异引物,分别采用单一及多重荧光探针法RT-PCR,针对通用RT-PCR法检出的阳性样本进行检测。将通用引物RT-PCR与传统培养结果进行比较、单一RT-PCR与多重RT-PCR结果进行比较,用SPSS16.0对病例一般临床资料进行分析。结果1.传统细菌培养结果:70例标本阳性率为65.71%(46/70),G+球菌占71.74%(33/46),G-杆菌占28.26%(13/46);其中表皮葡萄球菌9例、金黄色葡萄球菌3例、溶血葡萄球菌10例、草绿色链球菌6例、大肠埃希菌5例、铜绿假单胞菌3例。2.临床资料结果,70例患者均有腹痛、压痛反跳痛或腹透液浑浊等临床症状和体征,入院时培养阴性组腹透液WBC计数、多核比及CRP水平明显低于阳性组(P0.05),而血白蛋白水平明显高于阳性组(P0.05),其余各项资料两组间无统计学差异。3.通用RT-PCR结果:70例样本阳性率为81.42%(57/70),其中2例培养阳性样本通用RT-PCR为阴性。以传统培养作为金标准,通用RT-PCR方法对PDAP致病菌检测的特异性为45.83%,敏感性为95.65%,且检出率明显高于传统培养法,二者差异具有统计学意义。4.对通用RT-PCR法检出的57例阳性样本行单一及多重RT-PCR检测,两者均检出38例样本在6种检测菌范围内,两种方法检测结果一致,1例RT-PCR结果与培养结果不符,剩余19例菌种在6种检测菌范围以外。5.通用RT-PCR可在4~6 h内明确是否存在细菌感染;针对6种致病菌的检测,单一RT-PCR可在6~9 h内完成,多重RT-PCR仅需3 h即可明确菌种。结论与传统培养法比较,RT-PCR方法具有较高灵敏度和特异性,多重RT-PCR因可同时检测多种致病菌,较单一RT-PCR更加迅速、简便、经济。
【关键词】：腹膜透析相关性腹膜炎 致病菌 实时荧光 PCR 传统培养
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R692.5
【目录】：

• 中英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-11
• 材料与试剂11-12
• 实验方法12-17
• 结果17-23
• 讨论23-33
• 结论33-34
• 参考文献34-38
• 附录38-39
• 致谢39-40
• 综述40-50
• 参考文献48-50

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 严华林;PCR检测小儿肺炎支原体感染150例[J];江苏临床医学杂志;1998年01期

2 赵志晶;王斌;梁昊宇;计国欣;曾明;辜清吾;;伤寒和甲型副伤寒沙门菌复合PCR检测[J];中国公共卫生;2008年02期

3 耿哲;黄亮;王迪;熊婕;朱莉;李春蕊;周剑峰;;流式细胞免疫分型联合PCR检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断与鉴别诊断中的应用[J];中国癌症杂志;2011年10期

4 孙海光,龚金娥,金关甫,刘金伟,张泽华,王金河,李志平;支气管肺泡灌洗液PCR检测结核菌的诊断价值[J];人民军医;1995年06期

5 蒋正生，鲁严;PCR检测小儿肺炎支原体感染[J];镇江医学院学报;1995年02期

6 张珂;;单纯疱疹病毒性脑炎的诊断:PCR检测脑组织活检患者的脑脊液及其与疾病的关系[J];传染病信息;1995年03期

7 诸葛洪祥，孟阳春，吴建伟,朱智勇，姚萍萍,梁伟峰;用PCR检测革螨体内的流行性出血热病毒（简报）[J];苏州医学院学报;1996年04期

8 孙玉芬;152例支气管肺泡灌洗液结核菌PCR检测分析[J];中国内镜杂志;2000年02期

9 陈玉清,李琳,张茵,臧玉柱,翟亚萍;PCR检测急性淋巴细胞白血病微小残留病38例临床分析[J];实用诊断与治疗杂志;2005年09期

10 黄涛;何进才;;跨跃断裂位点PCR检测α-珠蛋白生成障碍性贫血基因缺失及其临床应用[J];现代检验医学杂志;2008年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 方丽云;;应用PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年

2 李科;黄娅;刘陈晨;青玲;;山东和陕西苹果上苹果褪绿叶斑病毒的PCR检测[A];“创新驱动与现代植保”——中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会论文集[C];2013年

3 刘军发;何启盖;陈焕春;吴斌;曹胜波;徐引弟;王革非;刘正飞;逯忠新;;用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年

4 黄思良;岑贞陆;谢铃;晏卫红;蒙姣荣;袁高庆;赖传雅;陈保善;;广西木薯细菌性枯萎病的发生调查及其病原菌PCR检测[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年

5 倪艳秀;何孔旺;王继春;何家惠;吕立新;陆承平;姚火春;;PCR检测和定型猪链球菌2型的研究[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年

6 王中民;杨国芬;谭崇阳;王武芳;孔伟;;双重PCR检测环境水体中的军团菌[A];中国人民解放军医学会第九届放射诊疗专业学会论文集[C];2005年

7 杨兵;关鑫;徐福洲;王金洛;翟新彦;贾昆;;用PCR检测人工感染鸡蛋及血液等样品中鸡传染性贫血病毒的动态分布[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];2003年

8 陈珊珊;程书梅;齐哲;李英军;亢春雨;樊喜福;苏旭东;张伟;;PCR检测乳及乳品中常见食源性致病菌的研究[A];2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C];2007年

9 刘伟雄;;PCR检测病毒核酸在血制品企业的应用[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年

10 石锋;徐俊杰;楚振兴;尚红;;二维混合法在尿液沙眼衣原体和淋球菌PCR检测中的应用[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 刘志勇;流行性乙型脑炎PCR检测病毒和中医证候特征研究[D];湖北中医药大学;2013年

2 徐文胜;提高乙型肝炎病毒P基因区PCR检测阳性率的策略及阿德福韦酯治疗中HBV基因型耐药临床监测研究[D];第二军医大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王婵媛;腹膜透析相关性腹膜炎致病菌PCR检测和传统培养对比分析[D];安徽医科大学;2015年

2 燕雯雯;多重实时PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的应用分析[D];安徽医科大学;2016年

3 陈新垲;西瓜细菌性果斑病菌的PCR检测[D];福建农林大学;2010年

4 李亚利;甜瓜细菌性叶斑病的寄主范围测定、16SrDNA鉴定及西瓜细菌性果斑病菌的PCR检测[D];甘肃农业大学;2006年

5 郝春燕;猪链球菌2型的分离鉴定及PCR检测[D];西北农林科技大学;2010年

6 邱索平;猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测和分型系统的建立及应用[D];南京农业大学;2006年

7 何宁;小麦多目标性状分子标记的PCR检测体系的建立[D];河南农业大学;2007年

8 陈恩发;多重实时定量PCR检测马铃薯主要的真细菌病原菌[D];内蒙古大学;2011年

9 杨一林;荧光假单胞菌PCR检测靶点的筛选及PCR检测体系的建立[D];上海交通大学;2011年

10 姚月琴;猪细小病毒的PCR检测、分离鉴定及其单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2006年

  本文关键词：多重实时PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的应用分析，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：354517