PAd-RFP/BMP2-Mbs复合体转染BMSCs并促其向心肌细胞分化的体外实验

发布时间：2023-05-11 01:57

　　目的:探讨携生物素化的骨形态发生蛋白2并标记红色荧光的重组腺病毒-微泡复合体(PAd-RFP/BMP2-Mbs)利用超声靶向爆破微泡定位释放技术(UTMD)体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),通过BMP2过表达促进BMSCs向心肌细胞定向分化的可行性。方法:提取、分离、纯化大鼠BMSCs,取P3代BMSCs随机分为5组:Ⅰ组:单纯BMSCs组(对照组);Ⅱ组:超声+微泡+BMSCs组(BMSCs+UTMD);Ⅲ组:超声+BMSCs组(BMSCs+U);Ⅳ组:微泡+BMSCs组(BMSCs+M);Ⅴ组:超声+微泡+BMSCs+PAd-RFP/BMP2组(BMSCs+UTMD+BMP2);超声辐照体外转染并培养诱导BMSCs向心肌细胞分化,于转染后24h、48h、72h观察BMP2表达情况,转染72h后检测PAd-RFP/BMP2在BMSCs中的转染率,CCK8法检测BMSCs的活性,转染后72h通过RT-PCR及Western blot检测PAd-RFP/BMP2的m RNA含量及蛋白在BMSCs中的表达,转染后第14天通过Western blot检测心肌特异性蛋白cTnT、Cx...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
研究内容与方法
    1. 材料
        1.1 试验动物与试剂
        1.2 实验仪器
    2.方法
        2.1 BMSCs 体外培养及鉴定
        2.2 BMSCs 表面分子鉴定
        2.3 UTMD 介导基因转染体外实验
        2.4 BMP2 基因转染率检测
        2.5 RT-PCR 检测各组 BMSCs 中 BMP2m RNA 表达
        2.6 Western blot 法检测各组 BMSCs 中 BMP2 蛋白含量
        2.7 转染后各组 BMSCs 活性检测
        2.8 BMP2 促进 BMSCs 向心肌细胞分化的基因蛋白表达
    3 统计方法
结果
讨论
小结
致谢
参考文献
综述
    参考文献
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本文编号：3813924