一家族性遗传性痉挛性截瘫致病基因的遗传学研究

发布时间：2023-05-11 02:13

　　背景:遗传性痉挛性截瘫(Hereditary spastic paraplegia,SPG或HSP)是以远端双下肢进行性虚弱无力及肌张力增高为主要症状的神经系统变性疾病。依据临床特征HSP分为单纯性和复杂性。HSP具有高度的临床及遗传异质性,已经发现有超过80个基因与HSP的发病有关,其中由SPAST基因变异导致的SPG4型和由ATL1基因变异导致的SPG3A是最常见的常染色体显性HSP亚型,分别约占AD-HSP患者的45%和10%。然而仍有部分HSP患者的遗传机制不明,因此基于HSP家系寻找新的致病基因,完善HSP的突变谱具有重要的临床意义和科学价值。目的:本论文研究基于一个甘肃地区单纯性HSP家系,通过鉴定其致病性突变,为此家系以后的生育及产前筛查做出科学的指导,为HSP的致病基因谱提供更丰富的依据。方法:(1)收集到1例常染色体显性单纯性HSP家系,采集其临床信息及家族人员外周血;(2)检索已报道与HSP相关的SPAST和ATL1基因变异的SCI(Science Citation Index)文献,汇总变异的相关信息,包括样本来源,患者性别、年龄,遗传方式,突变类型及突变位置,并...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
第一章 前言
    1 常染色体显性HSP(AD-HSP)亚型
    2 X连锁性HSP(XL-HSP)
    3 HSP的病理机制
第二章 研究对象和方法
    1 主要试剂及仪器(表2和表3)
    2 研究对象
    3 文献汇总分析
    4 样本及临床资料采集
        4.1 样本采集
        4.2 临床资料采集
    5 样本基因组DNA的提取及鉴定
        5.1 苯酚氯仿法提取基因组DNA
        5.2 用Nanodrop测定DNA浓度及纯度,操作步骤
        5.3 用琼脂糖凝胶电泳测定DNA,操作步骤
    6 PCR扩增反应及PCR产物测序鉴定
        6.1 反应过程
        6.3 PCR产物测序及鉴定
    7 基因组DNA全外显子测序及测序结果验证
        7.1 基因组DNA全外显子测序
        7.2 全外显子测序结果验证
        7.3 全外显子测序所得的可疑突变基因软件预测分析
        7.4 全外显子测序所得的突变基因在正常人群中验证
    8 统计学分析
第三章 结果
    1 已发表文献汇总分析
        1.1 文献检索
        1.2 文献汇总分析
    2 HSP相关的6 个高频突变基因外显子PCR扩增及Sanger测序鉴定
        2.1 家系成员DNA提取
        2.2 PCR扩增及Sanger测序
    3 HSP家系外显子组测序及结果验证
第四章 讨论
    1
        1.1 ESCRT对内体蛋白的分拣作用
        1.2 ESCRT在脂质膜上的作用
        1.3 ESCRT在核膜上的作用
    2 ESCRT复合体的异常是HSP的致病原因
结论
局限性与展望
参考文献
致谢
附表一
附表二



本文编号：3813949