医学论文论改良嗜酸性粒细胞计数稀释液及应用

　　嗜酸性粒细胞计数临床常见的是直接计数、涂片白细胞分类计数和血球计数仪分类计数3种方法。但是临床上为了解疾病进展过程，需要动态观察嗜酸性粒细胞的变化，往往采用嗜酸性粒细胞直接计数。文献报道”。嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液较多，用等渗的生理盐水配制嗜酸性粒细胞计数稀释液，与《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液相比，各有优缺点。

　　我院探讨使用血小板计数稀释液来配制嗜酸性粒细胞计数稀释液，在临床实践了3年，计数结果准确可靠，报告如下。

　　1 材料与方法

　　1．1 试剂《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液配制详见《全国临床检验操作规程》。嗜酸性粒细胞计数稀释液。称取草酸铵1．Og，EDTA．2Na 0．012g，伊红0．2g，溶于50mL蒸馏水中，再加人0．6mL TritonX一100，加蒸馏水至lOOmL。

　　1．2 方法于试管中加入稀释液0．38mL，取患者末梢血(或EDTA．2K抗凝全血)0．02 mL，混匀，5min后冲入计数板的两计数池内，静置3～5min。用低倍镜计数，镜下嗜酸性粒细胞被染成桔红色，其它未被破坏的细胞几乎不着色。计数两个计数室10个大方格(中央和四角大方格)内嗜酸性粒细胞数。计算嗜酸性粒细胞／L=10个大方格内嗜酸性粒细胞数X20×10 ／L。

　　2 结果

　　2．1 对比试验取住院121例患者的EDTA．2K抗凝全血，分别用《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液(Y)与本法稀释液(X)进行嗜酸性粒细胞计数，结果本法稀释液(163．4±34．7)×106／L，推荐稀释液(165．0±35．1)×10／L，2种稀释液计数结果差异无显著性(P>0．05)，其相关系数r=0．991，相关方程Y=1．0216X +3．1247。

　　2．2 着色时问比较 将稀释液与抗凝全血混合后，分别在120、180、240、270、300s进行直接计数，《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液在300s后嗜酸性粒细胞被染成红色，本法稀释液在180s后嗜酸性粒细胞被染成红色。

　　2．3 重复性试验用本法稀释液进行嗜酸性粒细胞计数25次重复试验，x±S=(226．1±6．9)X 10 ／L，CV=3．1％。

　　3 讨论文献报道，笔耕论文，嗜酸性粒细胞计数稀释液有很多种，主要是围绕破坏红细胞和部分白细胞，嗜酸性粒细胞不被破坏且着色进行改进的。根据草酸铵有破坏红细胞的作用，巧妙地运用血小板计数稀释液来配制嗜酸性粒细胞计数稀释液。我们在配制血小板计数稀释液的同时，在每100 mL血小板计数稀释液中加入伊红0．2g、0．6mL TritonX一100即可成为嗜酸性粒细胞计数稀释液，这样就可以简化嗜酸性粒细胞计数稀释液配制过程。ED—TA．2Na有抗凝和防止草酸钙沉淀作用。表面活性剂TritonX一100能加速染料溶解，增强染料对细胞的渗透作用，从而使嗜酸性粒细胞着色加快。TritonX一100的浓度为0．6％时，只破坏除嗜酸性粒细胞以外的细胞，嗜酸性粒细胞几乎不受影响。本稀释液没使用挥发性试剂，这样稀释液保质期就相对较长，使用一年之久，仍效果很好。本法具有试剂配制简单，着色时间短，试剂保质期长，一种试剂2种用途等优点。

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