低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌的协同增效作用研究

发布时间：2017-06-12 16:14

  本文关键词：低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌的协同增效作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目前临床上诊断和治疗生物膜造成的感染是一个很棘手的问题。在欧洲临床微生物学和传染病学会2014年年会上发布了生物膜感染诊断和治疗指南,提出超声联合抗生素是一种可能有效治疗生物膜感染的方法,亟待进行深入研究。为此,本文研究了低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌生物膜及其悬浮菌的生物学效应和作用机制。目的探讨低频低强度超声(Low-frequency and Low-intensity Ultrasound, LFLIU)联合抗生素对ESBLs大肠杆菌生物膜活性、形态学以及对生物膜抗生素渗透性的影响。探讨低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌悬浮菌活性、形态学的影响。方法1.低频低强度超声联合抗生素类药物对ESBLs大肠杆菌生物膜的生物学效应的研究将72小时培养出来的生物膜分组,分为对照组(C)、妥布霉素组(T组)、庆大霉素组(Q组)、低频低强度超声组(U组)、低频低强度超声联合妥布霉素组(U+T组)、低频低强度超声联合庆大霉素组(U+Q),每组3个样本(n=3),药物浓度均为200 μg/mL。将超声探头末端涂抹偶合剂,紧贴于6孔板下端辐照,超声频率为42 kHz,强度为0.66 W/cm2,辐照时间为30 min,采取连续超声进行辐照。测量实验前后各组的活性,用扫描电镜、激光共聚焦显微镜观察生物膜大体形态改变,建立“三明治”模型,检测各组生物膜对环丙沙星渗透性的大小。2.低频低强度超声联合抗生素类药物对ESBLs大肠杆菌悬浮菌的生物学效应研究将处于对数期的悬浮菌分组,同前,每组3个样本(n=3),其中药物浓度为20 μg/mL。在37℃恒温水浴中,用42 kHz,强度为0.66W/cm2,辐照时间为0.5 h、1 h、1.5 h,采用连续超声进行辐照。实验前后测量每组细菌活性、通透性的改变,用透射电镜观察细菌大体形态。结果1.生物膜经实验处理后,活性出现了明显的下降,其中超声联合庆大霉素组与超声联合妥布霉素组分别从(9.200±0.022)log10CFU/cm2下降到了(5.240±0.007)log10CFU/cm2、(3.500±0.020)log10CFU/cm2。扫描电镜观察到了生物膜大体形态改变,并且生物膜内大肠杆菌有损伤。激光共聚焦结果分析显示,生物膜外层细菌活性改变最大,中间层细菌活性改变最小。低频低强度超声联合抗生素能明显增强生物膜对环丙沙星的渗透性。2.细菌生存率随低频低强度超声辐照时间延长出现显著下降,其中超声联合妥布霉素组生存率下降达(97.73±0.12)%。超声辐照细菌后,透射电镜显示低频低强度超声能够影响菌体结构,从而改变细菌外膜的通透性。PI荧光强度检测表明细菌死亡率与细菌外膜通透性率成正相关。结论1.低频低强度超声可以清除ESBLs大肠杆菌生物膜,并且对生物膜内细菌造成损伤,同时可以提高生物膜对抗生素的渗透性。低频低强度超声联合抗生素除了产生以上效应外,根据对不同药物的敏感性,还可以产生不同的联合杀菌效应。这个发现对体外清除ESBLs大肠杆菌生物膜提供了一种可能的有效方法。2.低频低强度超声能够改变ESBLs大肠杆菌细胞外膜的通透性。低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌的杀菌作用增效显著。这为体外应用低频低强度超声联合抗生素治疗ESBLs大肠杆菌生物膜感染提供了安全依据。
【关键词】：低频低强度超声 ESBLs大肠杆菌 抗生素 协同杀菌 生物膜
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R446.5
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-16
• 第一部分 低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌生物膜的生物学效应的研究16-23
• 1 资料与方法17-19
• 2 实验结果19-21
• 3 讨论21-22
• 4 小结22-23
• 第二部分 低频低强度超声联合抗生素对ESBLs大肠杆菌悬浮菌的协同增效作用研究23-29
• 1 材料与方法23-25
• 2 实验结果25-26
• 3 讨论26-27
• 4 小结27-29
• 全文总结29-30
• 参考文献30-34
• 附图34-43
• 文献综述43-49
• 参考文献47-49
• 致谢49-50
• 攻读硕士学位期间发表文章50

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 陈柏炜;杨阳;王欣;饶伟;刘静;;低频低强度超声混合碳纳米管抑制小鼠EMT-6乳腺肿瘤生长研究[J];科技导报;2009年07期

2 马燕;陈宝安;吴巍;姜藻;钱梦，

本文编号：444460