EV71感染手足口病患儿IL-21的表达及其免疫炎性反应的相关性研究

发布时间：2017-09-20 08:50

  本文关键词：EV71感染手足口病患儿IL-21的表达及其免疫炎性反应的相关性研究

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【摘要】：目的:研究EV71感染手足口病患儿IL-21表达水平的变化,及其与炎性指标、细胞因子的相关性,为探讨手足口病发病机制及机体抗病毒的免疫炎症应答提供一定理论基础,进一步为手足口病的临床诊断、治疗及预后判断提供实验室依据。方法:1、根据《(2010年版)手足口病诊疗指南》的诊断和分组标准,以109例EV71感染手足口病患儿及27例正常对照组儿童为研究对象,根据病情严重程度,将手足口病患儿分为普通组、重症组及危重组。采集各组患儿外周血标本,分别装于肝素抗凝管、EDTA-K2抗凝管及普通生化管,并收集性别、年龄及CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT等临床资料和实验室检查指标。2、流式细胞术检测肝素抗凝血CD4+-IL-21+T细胞的百分率;荧光定量PCR检测EDTA-K2抗凝血IL-21 m RNA的表达;ELISA检测血清IL-21、IFN-γ的水平。3、运用化学发光免疫分析仪检测血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10等细胞因子的水平。4、分析IL-21水平变化与炎性指标及细胞因子的相关性,探讨IL-21在EV71感染手足口病患儿免疫炎性反应中的作用。结果:1、EV71感染手足口病患儿,除重症组IL-21 m RNA表达水平与普通组比较无明显差异外(P0.05),其余各组血清IL-21和全血CD4+-IL-21+T百分率及IL-21 m RNA表达水平均显著高于对照组儿童(P0.01),且随疾病的加重而升高。2、EV71感染手足口病患儿炎性指标CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT、NLR、PLR与对照组比较呈升高趋势,其中重症组和危重组的CRP含量均显著高于对照组和普通组(P0.01);三组患儿SAA、LYMPH、PLT水平均高于对照组(P0.05);危重组患儿NEUT、NLR、PLR显著高于其他三组(P0.001),其余各组间比较无显著差异(P0.05)。3、EV71感染手足口病患儿血清细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的水平变化也随疾病的加重而升高,各组患儿的IFN-γ、TNF-α、IL-10水平均显著高于对照组(P0.01);与对照组儿童血清IL-6、IL-8水平相比,除普通组无明显差异外(P0.05),重症组和危重组均显著升高(P0.001)。4、EV71感染手足口病患儿IL-21水平与各炎性指标和细胞因子的相关性分析,发现IL-21的水平变化与炎性因子CRP(r=0.32,P0.001)、PLT(r=0.25,P0.05)、IFN-γ(r=0.54,P0.001)、TNF-α(r=0.36,P0.001)、IL-6(r=0.30,P0.01)、IL-8(r=0.33,P0.001)水平呈正相关,而与抗炎因子IL-10(r=-0.23,P0.05)水平变化呈负相关。与SAA、NEUT、LYMPH、NLR、PLR等炎性指标的变化无明显相关性(P0.05)。结论:本研究表明IL-21可能作为一种新型炎性细胞因子,参与EV71感染激发的全身免疫炎症反应,与手足口病患儿病情发生发展密切相关。
【关键词】：EV71 手足口病 白介素21 细胞因子 相关性
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.1;R446.1
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-23
• 2.1 主要材料12-15
• 2.1.1 仪器设备及耗材12-13
• 2.1.2 主要试剂13-14
• 2.1.3 主要自配试剂14-15
• 2.2 方法15-23
• 2.2.1 研究对象及标本采集15
• 2.2.2 流式细胞术检测淋巴细胞IL-21的表达15-16
• 2.2.3 全血标本总RNA的提取16-17
• 2.2.4 mRNA逆转录为cDNA17-18
• 2.2.5 荧光定量PCR检测IL-21 mRNA的表达18-19
• 2.2.6 ELISA法检测血清IL-21和IFN-γ 水平19-21
• 2.2.7 炎性指标CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT的检测21
• 2.2.8 细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的检测21-22
• 2.2.9 统计学处理22-23
• 第3章 结果23-32
• 3.1 病例基本资料23
• 3.2 流式细胞术检测淋巴细胞IL-21的表达23-24
• 3.3 荧光定量PCR检测IL-21mRNA的表达24-26
• 3.4 ELISA检测血清IL-21的水平26-27
• 3.5 EV71感染患儿炎性指标的变化27-29
• 3.6 EV71感染患儿细胞因子的变化29-30
• 3.7 IL-21与炎性指标及细胞因子的相关性30-32
• 第4章 讨论32-35
• 第5章 结论与展望35-36
• 5.1 结论35
• 5.2 展望35-36
• 致谢36-37
• 参考文献37-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 综述 IL-21在病毒感染性疾病中的免疫调节效应的研究进展42-50
• 参考文献48-50

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本文编号：887104