烟草黑胫病菌拮抗菌的筛选及生防机制研究

发布时间：2020-05-04 23:48

【摘要】：烟草黑胫病是烟草生产上的重要病害之一,每年均会造成巨大的经济损失。烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)是引起烟草黑胫病的病原菌,因此筛选出对烟草疫霉具有高拮抗活性的生防菌,对烟草黑胫病的防治,有效控制病害造成的损失具有重要意义。本论文从烟草疫霉高效拮抗菌的筛选、抑菌活性的测定、菌种鉴定、抑菌谱测定、发酵条件优化及盆栽生防试验等方面进行研究,主要研究结果如下:1、拮抗菌筛选及抑菌活性测定。利用稀释涂布和平板对峙法从土壤中筛选出16株拮抗细菌与13株拮抗放线菌,其中F-7菌株对烟草疫霉菌丝生长的抑制效果最好,抑菌率达到75.00%;采用抑制菌丝生长速率法,测定29株拮抗菌发酵代谢液对烟草疫霉菌丝生长的抑制活性,其中F-7的抑菌活性最高,菌丝生长抑制率达81.41%。2、对F-7菌株进行了鉴定。结合形态特征、培养特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株属于链霉菌属(Streptomyces sp.)。3、抑菌谱测定。F-7菌株与17种供试植物病原菌菌株平板对峙试验表明,F-7菌株对其中6种供试植物病原菌菌株的菌丝生长抑制率均达到60.00%以上,对疫霉属病原菌均具有较高的拮抗活性,且对烟草疫霉拮抗活性最高,菌丝生长抑制率达75.00%,而对其余11株植物病原菌菌丝生长的抑制作用较差或无抑制作用。4、F-7菌株发酵条件研究。通过对6个单因素变量控制,实验得出F-7菌株最适发酵条件为:培养基为马铃薯葡萄糖培养液,接种量为1mL,初始pH为6.0,培养温度为28°C,摇床转速180 r/min,培养时间为5d。5、研究了发酵代谢液的热稳定性和pH耐受性。结果表明温度在30°C左右最稳定,超过70°C时发酵液抑菌活性明显下降直至为零;发酵液在pH 6-10时,抑菌率变化较小,耐受性较好。6、盆栽生防试验。结果表明,在烟苗3-5叶期F-7菌株发酵液对烟草黑胫病的生防作用不明显,而在8-10叶期则具有较好的防治作用。
【图文】：

涂布,土壤微生物,烟草疫霉

图 4-1 土壤微生物稀释涂布Fig.4-1 Dilution coating of soil microorganismsA、B：涂布图；C、D：初筛图A, B: coating diagram; C, D: primary screen烟草疫霉抑菌活性测定对烟草疫霉菌丝生长的抑制作用峙方法测得，29 株对烟草疫霉具有拮抗作用的草疫霉菌丝的抑制率均达到 55.00%以上，分别、60.00 %、63.75%、58.75%、75.00%、72.50 %、和 66.25%，其中，，放线菌 F-7 对烟草疫霉菌丝效果最好；而 16 株拮抗细菌中抑菌效果达到下表 4-1。

菌落形态,菌落形态,菌株,放线菌

F-7 81.41 Y-2 43.21F-8 35.25 Y-7 51.38F-9 56.45 Y-11 27.96F-10 65.00 Y-13 38.42F-11 56.32 Y-14 49.53F-12 70.55 Y-16 48.36F-13 28.56 Y-17 22.75H-1 34.57 Y-19 28.53H-2 39.844.2 放线菌 F-7 菌种鉴定4.2.1 放线菌 F-7 形态学观察放线菌株 F-7 在高氏一号培养基上生长状况较好，其单菌落呈现灰白色，表面干燥、紧致，顶端圆心隆起，见图 4-2；通过插片法将 F-7 放在光学显微镜下可发现，气生菌丝发达，相互交织，基内菌丝细长，分支较少。
【学位授予单位】：安徽农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S435.72

【参考文献】