海南省温郁金两种病害的病原鉴定、生物学特性及室内药剂筛选

发布时间：2020-05-28 01:13

【摘要】：温郁金(Curcuma wenyujinn Y H.Chen et C.Ling),姜科(Zingiberaceae)姜黄属(Curcuma L.)草本植物,在中国拥有悠久的药用历史,原产于浙江瑞安,1997年海南省开始引进种植温郁金,近几年因温郁金白绢病和温郁金炭疽病导致产量和质量均有所下降,目前国内外对温郁金的研究主要集中在化学成分及药理作用方面,对温郁金病害的研究非常少,因此本文首次对上述两种病害进行了初步研究,包括病原鉴定、生物学特性测定及室内药剂筛选,主要结果如下:温郁金白绢病主要为害茎基部和叶鞘,发病初期,茎基部形成暗褐色、水渍状、不定形的病斑,随后病斑逐渐向上扩展,病部表面覆盖白色绢丝状菌丝层及茶褐色的菌核,严重时导致全株萎蔫枯死。经过病原菌的分离纯化、致病性测定、形态学特征观察和ITS基因系统学分析将温郁金白绢病的病原菌鉴定为齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.。生物学特性试验结果表明,病原菌菌丝生长和菌核形成的最适温度范围为30～32 ℃,菌丝和菌核的致死温度分别是51 ℃和53℃,菌丝生长的最适pH范围为5.0～6.0,菌核形成的最适pH是7.0,菌丝生长和菌核形成的最佳碳源均为蔗糖,最佳氮源均为硝酸钠,燕麦培养基和玉米培养基更适合病原菌的生长,黑暗条件有利于菌丝的生长,12 h光暗交替有利于菌核的形成。采用含毒介质法测定10种杀菌剂对病原菌的室内毒力,结果表明三唑类杀菌剂烯唑醇、毗唑醚菌酯、苯醚甲环唑和氟硅唑的抑菌效果较强,EC50均小于1μg/mL。温郁金炭疽病主要为害叶片,偶见为害叶鞘。发病初期形成淡黄色水渍状的椭圆形病斑,随后病斑进一步扩展,中心呈灰白色至灰褐色,边缘为深褐色,最外层环绕明显的黄色晕圈,病斑正面生出许多黑色小点,严重时可造成叶片卷缩和枯死。经过病原菌的分离纯化、致病性测定、形态学特征观察和多基因(ITS、AC TUB2、CHS-1、GAPDH和HIS3)系统学分析将温郁金炭疽病的病原菌鉴定为郁金炭疽菌Colletotrichum curcumae(Syd.)E.J.ButlerBisby。生物学特性试验结果表明,病原菌菌丝生长及孢子产生对培养条件的要求基本一致,最适温度均为27 ℃,最适pH均为6.0,最佳培养基为PDA培养基,最佳碳源和氮源分别是麦芽糖和硝酸钾,黑暗条件有利于菌丝的生长,12 h光暗交替有利于孢子的形成。采用含毒介质法测定10种杀菌剂对病原菌的室内毒力,结果表明三唑类杀菌剂烯唑醇、氟硅唑、丙环唑、苯醚甲环唑和咪唑类杀菌剂咪鲜胺对病原菌的抑菌效果较强,EC50均小于1 μg/mL。以上研究成果为温郁金病害的田间防治提供了理论依据,对海南省温郁金产业的可持续发展具有重要意义。
【图文】：

温郁金,症状

３．１．１田间症状与为害情况逡逑温郁金白绢病主要为害近地面的茎基部和叶鞘。发病初期，茎基部先出现暗褐色、逡逑水渍状、不规则状的病斑，稍微有些凹陷（图１邋Ａ），随后病斑逐渐扩大向上蔓延到逡逑叶鞘，边缘呈现暗褐色至黑褐色（图１Ｂ），经过一段时间后受害部位颜色变得更深，逡逑表面呈波纹状并覆盖着一些绢丝状的白色菌丝，用手触碰茎部能感觉到变软腐烂，拔逡逑起时易折断，有时病株附近的土地上也会布满白色菌丝（图１邋Ｃ），后期发病部位产逡逑生大量菌核，颜色开始为白色，之后变为黄色，成熟后又变为茶褐色，形状如同油菜逡逑籽一般，表面光滑（图１邋Ｄ）。病斑可环绕茎部横向扩展，使植物体内水分及养分的逡逑运输受到影响，进而导致上部叶片生长不良，变黄凋萎，当植物剩余的营养成分被消逡逑耗殆尽时就会引起整株枯死倒伏。海南省温郁金白}y病的发病盛期在７？９月，所调查逡逑的６个温郁金种植基地中均有该病害发生

温郁金,症状

逑随后茎部表面生出大量的白色菌丝和茶褐色油菜籽状菌核，与自然环境下发病的温郁逡逑金症状相同（图２邋Ａ￣Ｄ），而接种了ＰＤＡ培养基的对照组植株均没有感病症状出现（图逡逑２邋Ｅ）。从病株茎基部再一次分离纯化的病原菌，，与接种用的菌株有一样的形态特征，逡逑符合柯赫氏法则。由此确定，菌株ＪＮ０６１０是引起温郁金白绢病的病原菌。逡逑二娭」、逡逑图２温郁金白绢病菌接种症状逡逑Ｆｉｇ．邋２邋Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ邋ｓｙｍｐｔｏｍｓ邋ｏｆ邋Ｃ．邋ｗｅｎｙｕｊｉｎ邋ｓｏｕｔｈｅｒｎ邋ｂｌｉｇｈｔ邋ｐａｔｈｏｇｅｎ逡逑Ａ．无伤接种初期；Ｂ．无伤接种后期；Ｃ．刺伤接种初期；Ｄ．刺伤接种后期；Ｅ．对照植株逡逑Ａ．邋Ｉｎｉｔｉａｌ邋ｓｔａｇｅ邋ｏｆ邋ｕｎｗｏｕｎｄｅｄ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ；邋Ｂ．邋Ｌａｔｅ邋ｓｔａｇｅ邋ｏｆ邋ｕｎｗｏｕｎｄｅｄ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ；逡逑Ｃ．邋Ｉｎｉｔｉａｌ邋ｓｔａｇｅ邋ｏｆ邋ｗｏｕｎｄｅｄ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ；邋Ｄ．邋Ｌａｔｅ邋ｓｔａｇｅ邋ｏｆ邋ｗｏｕｎｄｅｄ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ；邋Ｅ．邋Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｐｌａｎｔ逡逑３．１．３病原菌的形态学鉴定逡逑菌株ＪＮ０６１０在ＰＤＡ培养基上生长２？３ｄ后，形成圆形的菌落，菌丝气生为白色逡逑羽毛状，随后逐渐茂盛并向四周辐射状扩展，４￣５ｄ后菌落长满整个平皿（图３Ａ），逡逑培养１０邋ｄ后菌落表面形成乳白色的菌核（图３邋Ｂ），之后渐变为淡黄色，成熟后为茶逡逑褐色（图３Ｃ）。逡逑菌丝无色透明，有隔膜（图４Ａ），具分枝，呈放射状生长，菌丝之间有融合现逡逑象（图４Ｂ，Ｃ）。菌核表面平滑而有光泽，大多为圆球形或椭球形，个别为不规则球逡逑形
【学位授予单位】：海南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S435.672

【参考文献】