烟草黑胫病抗性遗传规律分析及其SSR分子标记的筛选

发布时间：2020-06-15 07:16

【摘要】：为提高烟草抗黑胫病育种效率,为烟草抗黑胫病育种提供理论依据,为分子辅助选择提供有效的SSR分子标记。本实验以抗黑胫病品种岩烟97和自育高钾感黑胫病品系GK2为亲本进行杂交,对其亲本、F1代、F2代、BC1代群体进行人工接种黑胫病抗性鉴定,依据鉴定结果分析其遗传规律。提取各世代烟株样品基因组DNA,利用SSR分子标记方法进行筛选,获得与烟草黑胫病抗性基因连锁的SSR分子标记。结果如下:(1)菌谷接种法大田处理16株发病,发病率80%;盆栽处理20株发病,发病率100%。创伤接种法大田处理18株发病,发病率90%;盆栽处理19株发病,发病率95%,卡方检验结果表明不同栽培措施下两种接种方式的接种效果一致。(2)抗病亲本岩烟97对烟草黑胫病0号生理小种表现高抗,单株鉴定结果符合抗感比例1R:0S;感病亲本GK2高感烟草黑胫病,单株鉴定结果符合抗感比例0R:1S;杂交F1代中感烟草黑胫病,单株鉴定结果符合抗感比例0R:1S;F2代分离群体中感烟草黑胫病,单株鉴定结果符合抗感比例1R:3S;BC1代4个组合A:♂岩烟97×♀(♂岩烟97×♀GK2)、C:♂岩烟97×♀(♂GK2×♀岩烟97)表现为抗病,单株鉴定结果均符合抗感比例1R:1S;B:♂GK2×♀(♂GK2×♀岩烟97)、D:♂GK2×♀(♂岩烟97×♀GK2)均表现为中抗,单株鉴定结果均符合抗感比例0R:1S。(3)SSR-PCR选择前、后引物0.4μL、ddH_2O 13.5μL、dNTP 2μL、10×PCR buffer2μL、rTaq酶0.2μL、DNA模板1.5μL的反应体系进行扩增,扩增产物条带清晰明亮。(4)318对SSR引物中有25对在抗、感亲本间表现出多态性差异,多态率为7.86%。25对在亲本间具有多态性差异的SSR引物,经F2代单株筛选获得SSR引物PT54175_(-216)在抗病单株和感病单株间的多态性差异与亲本一致。PT54175_(-216)位于烟草第六号染色体短臂端,与亲本岩烟97的黑胫病抗性基因连锁,PCR扩增条带大小为216bp。(5)PT54175_(-216)在F2代群体中进行验证,40株抗病、98株感病,抗感基因型分离比例符合期望比1R:3S,X2c=0.30,P0.05=0.950。菌谷接种法进行人工接种抗性鉴定的结果可靠有效,适用于大量大田烟株进行黑胫病抗性鉴定;岩烟97对烟草黑胫病0号生理小种的抗性基因遗传可能受一对隐性基因控制;SSR标记PT54175_(-216)在亲本及抗感分离单株间呈现稳定的多态性差异,与抗性基因连锁遗传。
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S435.72

【参考文献】

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本文编号：2714080