人参生防菌Psn86对有机专用肥适生机制及生防效果研究

发布时间：2020-06-22 01:33

【摘要】：人参(Panax ginseng C.A.Mey)历来被视为百草之王,是我国最重要的药用植物之一,具有极高的药用价值,也是长白山区调整农业种植结构、农民增收致富的主要途径。国家明令禁止新林地开垦栽参,故农田栽参将成为一种必然趋势。农田地杂菌繁多,人参病害加重且防治较难,进而对人参的品质及产量造成严重影响。木霉菌作为生防菌广泛应用于植物病害防治,目前国内外关于木霉菌防治植物土传病害已有大量报道。近年来,将具有调节植物生长、改良土壤特性、拮抗土传病原微生物等功能的一种或多种微生物与传统有机肥复配,经二次发酵制得的生物有机肥广受好评。本文对生防菌哈茨木霉Psn86的主要生物学特性、对人参锈腐病菌抑制作用、GFP标记及定殖示踪及在土壤和有机肥中的定殖示踪、与有机肥混合对人参防御酶系的影响进行了研究,为生防菌哈茨木霉Psn86的防病机制和推广应用提供理论依据。1.生防菌哈茨木霉Psn86的主要生物学特性。对生防菌哈茨木霉Psn86主要生物学特性研究表明,哈茨木霉Psn86菌丝生长最适培养基为PSA,产孢最适培养基为PDA;哈茨木霉Psn86菌丝生长和产孢最适培养pH值均为6;最适培养温度均为30℃,最适碳源均为蔗糖,最适氮源均为牛肉膏,最适培养时间均为第3d,哈茨木霉Psn86菌丝生长最适光暗条件为全黑暗培养,产孢最适光暗条件为光照。2.哈茨木霉Psn86对人参锈腐菌抑制作用。通过对峙培养,研究了生防菌哈茨木霉Psn86对人参锈腐病菌的拮抗作用。结果表明,温度影响生防菌株哈茨木霉菌Psn86对人参锈腐病菌的抑制作用,20℃下哈茨木霉菌Psn86对人参锈腐病菌的抑制率为75.82%,25℃下哈茨木霉菌Psn86对人参锈腐病菌的抑制率为81.33,升高了7.27%。通过室内盆栽试验防效测定结果表明,预防试验处理组的防治效果明显好于治疗试验处理组,转代培养对哈茨木霉Psn86的抑制能力没有较大影响。3.生防菌哈茨木霉Psn86的GFP标记及定殖示踪及在土壤和有机肥中的定殖示踪。利用农杆菌介导的真菌遗传转化技术,成功地将带潮霉素基因和gfp基因的质粒AGL-1转到了生防菌哈茨木霉菌Psn86菌株内,得到了转化子菌株Psn86-g。本试验中获得的转化子菌株Psn86-g,遗传稳定且荧光性强。将转化子菌株Psn86-g与菌株Psn86在培养时间、pH、温度和对人参锈腐病菌的抑菌作用等条件下菌丝和产孢的情况进行了比较,试验结果表明:与菌株Psn86相比,转化子菌株Psn86-g菌丝生长和产孢均略低,但菌丝最适生长条件和产孢最适生长条件没有发生变化,抑菌能力由84.00%下降到81.60%,但是差异不显著。4.生防菌哈茨木霉Psn86与有机肥混合对人参防御酶系的影响。通过对土肥混合以及土肥混合接种人参锈腐病对人参7种防御酶活性及ASAFR和H_2O_2含量测定,结果表明,与对照相比,土肥混合以及土肥混合接种人参锈腐病均会诱导人参氧化物酶(POD),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),丙苯氨酸解氨酶(PAL),多酚氧化酶(PPO)等多种防御酶活性上升,防御酶活性维持在较高的水平,可以使人参植株的抗病性增强。由以上结论可以推测,哈茨木霉Psn86主要抗病机制为诱导人参植株防御酶系活性的增加。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S476;S435.675
【图文】：

哈茨木霉,菌丝生长,产孢量

图 2-1 不同培养基对哈茨木霉 Psn86 菌丝生长的影响Fig.2-1 Effect of culture media on colony growth of Psn86图 2-2 不同培养基对哈茨木霉 Psn86 产孢量的影响Fig.2-2 Effect of culture media on conidia number of Psn86

菌落形态,哈茨木霉,产孢量

图 2-2 不同培养基对哈茨木霉 Psn86 产孢量的影响Fig.2-2 Effect of culture media on conidia number of Psn86图 2-3 不同培养基培养下哈茨木霉 Psn86 菌落形态Fig. 2-3 Cultural characteristics on different culture media of Psn86H 对哈茨木霉 Psn86 菌丝生长和产孢量的影响-4 和图 2-5 可知，哈茨木霉 Psn86 在 pH 为 3~11 培养条件下均可生和产孢量在不同 pH 条件下具有显著性差异。其中哈茨木霉 PsnH 条件为 pH=6，其次为 pH=7、pH=5、pH=4，产孢最适 pH 条件=7、pH=8、pH=5。

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