利用硅转运蛋白突变体研究水稻中硅与水杨酸信号协同抗虫的机理

发布时间:2020-07-15 09:08
【摘要】:水稻(Oryza sativa L.)是我国重要的粮食作物之一。褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal,BPH)属同翅目飞虱科(Homoptera:Delphacidae)昆虫,是亚洲最主要的水稻害虫,严重危害我国粮食安全。水稻是一种典型的喜硅(Silicon,Si)植物,水稻通过Lsil转运蛋白可以主动吸收硅。硅被水稻吸收进入体内之后对其抗性影响很大,其中在提高水稻抗虫性方面的作用机理主要体现在两个方面,一个是物理防御,另一个是化学防御。水杨酸(Salicylic acid,SA)是植物的一种内源信号物质,SA参与植物很多生理生化反应,在植物对刺吸式口器害虫的抗虫反应中起到关键作用。本文采用硅转运蛋白突变体OsLsi1和相应的大力野生型WT水稻材料,在水培条件下,通过加硅(+Si)和不加硅(-Si)、加水杨酸或不加水杨酸处理,研究硅与水杨酸信号途经在水稻抗虫中的协同效应;并从生理和分子层面,揭示硅提高水稻抗褐飞虱的机制。为农业上施用硅肥提供理论依据,从而减少化肥农药的使用,保障生态安全和粮食安全。主要研究结果如下:1.首先,施硅增加了水稻的株高,对根长影响不明显;加硅促进水稻地上部物质的积累,抑制水稻地下部物质的积累;施硅显著提高水稻茎秆的硅含量。说明施硅可以影响水稻的生长,改变水稻体内物质的分配。施硅明显提高水稻对褐飞虱的抗性,施硅可以降低褐飞虱对宿主的选择性,降低褐飞虱的蜜露量,对褐飞虱的产卵量以及孵化数都有明显抑制,施硅还可以减少水稻植株上褐飞虱的存活数,加硅水稻在褐飞虱为害后也表现出更强的活力。以上结果证明施硅可以提升水稻对褐飞虱的抗性。2.其次,通过生理生化分析发现,施硅增强了水稻植株中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)三种氧化酶活性。一方面说明氧化酶系在刺吸式昆虫诱导的植物防御反应中具有重要作用,另一方也说明硅可以诱导水稻氧化酶系产生较大幅度的变化,帮助植物更快速响应褐飞虱的侵染、识别ROS信号分子、激活相应的防御系统,从而提高抗虫性。施硅还提高了苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。然而,施硅处理水稻可溶性糖和氨基酸含量并没有发生显著改变,可能施硅未能通过改变水稻营养状况而提升抗虫能力。3.最后,SA处理与BPH虫害均可以提升水稻体内的硅含量,说明硅在水稻抵御害虫胁迫时有重要的作用,并且SA与Si有密切关系。施硅可以诱导虫害下水稻SA的升高,说明硅提高抗虫性与SA途经有关,硅参与水稻抗虫是通过影响SA信号转导途径完成的,并再次证实Si与SA存在关联。紧接着发现无论是加硅还是喷施SA都能降低褐飞虱取食量,既加硅又喷施SA的效果比单独加硅与单独喷施SA处理效果总和更好。更进一步证明Si还与SA互作,即互相协同抵御BPH为害。之后,发现在水稻虫害之下SA合成途径的关键基因OsICS1和OsPAL的表达量跟硅有关,即加硅可以增强这两个基因的表达量,验证了虫害下加硅水稻SA增量更大的事实。另外JA、ET途经相关的基因表达量在褐飞虱胁迫下受硅影响不明显,GA途经的OsCPS1基因表达量受到了硅的影响,说明GA途经可能也参与到硅抗虫作用之中。可见,硅提升水稻抗虫性不单单与SA有关,与其它信号途经可能也有关。除此之外,施硅可以诱导水稻抗褐飞虱基因BPH3的表达,说明硅可以调控水稻抗褐飞虱基因的表达抵御虫害。
【学位授予单位】:福建农林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S435.11
【图文】:

施硅,根长,稻株,差异显著性


2.3.1施硅对水稻生长影响逡逑(1)施硅对水稻株高根长的影响逡逑从图2-1可以看出,野生型(WT)加硅(+Si)处理的水稻株高最长,为逡逑57.6邋cm,不加硅(-Si)株高为51_7邋cm,就野生型而言,加硅后水稻株高平均逡逑局出5.9cm,且达到了显著性差异。突变体水稻fcLsii力P桂与不加桂培养株高逡逑差异很小,统计上无差异显著性。同时,从水稻的根长可以看出,野生型(WT)逡逑加硅(+Si)处理的水稻根长比对照略短,甚至不如处理组的根长,但逡逑不存在统计学上的差异;加硅水稻与对照比,两者根长不存在差异。说逡逑明加硅可以促进水稻株高的长度,但施硅对根长影响不明显。逡逑80邋-逡逑囵WT逡逑3邋WT+Si逡逑60邋-逦^逦a逦曰邋OsLsil逡逑!逦a邋T逦^邋OsLsil+Si逡逑|_W _逡逑ilil逦■■■逡逑株高逦根长逡逑Plant邋height逦Root邋height逡逑图2-1施硅处理对水稻株高和根长的影响逡逑注:数据使用平均值土标准误(n=10),柱上的字母代表差异显著性(PCft仍0逡逑Fig.2-1邋Effe

施硅,差异显著性,标准误,字母


2.3.1施硅对水稻生长影响逡逑(1)施硅对水稻株高根长的影响逡逑从图2-1可以看出,野生型(WT)加硅(+Si)处理的水稻株高最长,为逡逑57.6邋cm,不加硅(-Si)株高为51_7邋cm,就野生型而言,加硅后水稻株高平均逡逑局出5.9cm,且达到了显著性差异。突变体水稻fcLsii力P桂与不加桂培养株高逡逑差异很小,统计上无差异显著性。同时,从水稻的根长可以看出,野生型(WT)逡逑加硅(+Si)处理的水稻根长比对照略短,甚至不如处理组的根长,但逡逑不存在统计学上的差异;加硅水稻与对照比,两者根长不存在差异。说逡逑明加硅可以促进水稻株高的长度,但施硅对根长影响不明显。逡逑80邋-逡逑囵WT逡逑3邋WT+Si逡逑60邋-逦^逦a逦曰邋OsLsil逡逑!逦a邋T逦^邋OsLsil+Si逡逑|_W _逡逑ilil逦■■■逡逑株高逦根长逡逑Plant邋height逦Root邋height逡逑图2-1施硅处理对水稻株高和根长的影响逡逑注:数据使用平均值土标准误(n=10),柱上的字母代表差异显著性(PCft仍0逡逑Fig.2-1邋Effe

褐飞虱,施硅,水稻,硅水


represents邋extremely邋significant邋difference邋(邋P邋<邋0.01,n=10邋)逡逑(2)加硅对褐飞虱取食量的影响逡逑由图2-5可以看出,WT处理水稻上取食48邋h的褐飞虱蜜露量约为9.4逡逑cm2,邋WT+Si水稻上取食的蜜露量约为5.6邋cm2,两个处理间褐飞虱蜜露量面积达逡逑到了显著性水平。OsL/7褐飞虱蜜露量约为丨2.1邋cm2,邋CW^z7+Si水稻上取食的逡逑褐飞虱蜜露量约为8.9邋cm2。两个处理水稻褐飞虱蜜露面积在显著差异。野生型逡逑加硅水稻比野生型水稻褐飞虱蜜露量减少了大概40.7%,突变体加硅水稻比突逡逑变体水稻褐飞虱蜜露量减少26%。由此可见,水稻加硅能显著降低褐飞虱蜜露逡逑量

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