啶酰菌胺与烯肟菌酯复配对灰葡萄孢毒力增效作用及机理初探

发布时间：2020-08-10 10:37

【摘要】：番茄灰霉病是由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的重要病害。目前,化学防治仍是生产中有效防治灰霉病的主要措施,占有不可或缺的地位。由于灰葡萄孢繁殖快,适合度高,极易产生抗性,再加上杀菌剂的不合理使用,该菌已对多种不同作用机制的杀菌剂产生了抗性,导致防效大大降低。因此,生产上迫切需要研发作用机制新颖的杀菌剂或筛选具有增效作用的复配制剂,以控制灰霉病的为害。啶酰菌胺(Boscalid)可防治灰霉病、白粉病及腐烂病等多种植物病害;烯肟菌酯(Enestroburin)主要用于防治白粉病和霜霉病。本研究筛选出啶酰菌胺与烯肟菌酯混配对灰葡萄孢的最佳毒力增效配比,并通过研究最佳增效配比对灰葡萄孢不同生长发育阶段、菌丝形态变化、细胞膜的通透性、呼吸速率、胞内ATP含量变化、可溶性蛋白和可溶性糖含量变化等方面的影响,为揭示啶酰菌胺和烯肟菌酯混配对灰葡萄孢的增效机制及对灰霉病的有效控制提供理论依据。主要研究结果如下:1.采用菌丝生长速率法测定了啶酰菌胺与烯肟菌酯混配对灰葡萄孢的联合毒力。结果显示,啶酰菌胺与烯肟菌酯以6:1混配时,对灰葡萄孢菌丝生长的毒力最强,增效系数最高,并确定其为最佳增效配比。最佳增效配比对其他5个灰葡萄孢菌株的菌丝生长抑制作用也均显著高于两单剂,表现为毒力增效作用。2.采用孢子萌发法测定了啶酰菌胺和烯肟菌酯混配对灰葡萄孢分生孢子萌发的抑制作用。结果显示,最佳增效配比对灰葡萄孢分生孢子萌发的抑制作用显著高于两单剂,显示出毒力增效作用。采用菌丝干重法测定了最佳增效配比对菌丝生长量的抑制作用。结果表明,不同时间点最佳增效配比对灰葡萄孢菌丝干重的抑制率达到80%以上,抑制效果优于啶酰菌胺和烯肟菌酯两单剂。采用血球计数法测定了最佳增效配比对灰葡萄孢产孢量的影响,结果发现最佳增效配比处理均未产孢,对灰葡萄孢产孢的抑制效果优于其两单剂。采用称重法测定了最佳增效配比对灰葡萄孢菌核产生的影响。结果显示,当浓度高于2.5μg/mL时,最佳增效配比处理无菌核产生,对菌核产生量的抑制作用优于两单剂。3.采用离体叶片法测定了最佳增效配比对番茄灰霉病的保护和治疗作用。结果表明,最佳增效配比对番茄灰霉病的保护作用和治疗作用效果均优于单剂,表现为增效作用,且保护作用优于治疗作用。田间试验结果表明:啶酰菌胺和烯肟菌酯以最佳增效配比进行桶混对番茄灰霉病的防治效果为80.84%~88.07%,显著优于对照药剂嘧霉胺和单剂烯肟菌酯。4.菌丝形态观察结果表明:最佳增效配比处理菌丝分支明显增多;啶酰菌胺处理部分菌丝顶端膨大;烯肟菌酯处理菌丝分隔增多,间距明显缩短,菌丝表面附着的小点疑似内含物渗漏。5.采用荧光显色法研究了最佳增效配比对灰葡萄孢分生孢子细胞膜完整性影响的试验结果表明:各药剂处理均对灰葡萄孢分生孢子的细胞膜造成一定的损伤。采用电导率法测定了啶酰菌胺和烯肟菌酯混配对灰葡萄孢细胞膜通透性的影响。结果表明最佳增效配比增强了灰葡萄孢细胞膜的通透性。6.采用氧电极法和高效液相色谱法分别研究了最佳增效配比对灰葡萄孢呼吸速率及胞内ATP含量变化的影响。结果表明,经最佳增效配比处理的灰葡萄孢分生孢子呼吸受到强烈抑制,抑制率达到90.68%;其胞内ATP含量大大降低,能量合成受到强烈抑制。采用比色法研究了最佳增效配比对灰葡萄孢菌丝体内可溶性蛋白和可溶性糖含量变化的影响。结果表明最佳增效配比在初期阶段灰葡萄孢胞内可溶性蛋白和可溶性糖的合成受到了抑制。7.最佳增效配比因增强了对灰葡萄孢呼吸作用的抑制,使体内能量的合成受阻,进而导致体内的物质代谢紊乱,从而显示增效作用。初步推断,这可能是啶酰菌胺和烯肟菌酯复配增效的生理生化水平机理之一。
【学位授予单位】：河北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S482.2
【图文】：

灰葡萄孢菌,配比

河北农业大学硕士学位（毕业）论文酰菌胺 WG 的防治效果与最佳增效配比最低剂量的防效相当，但显著低于最佳增效配比最高量的防效。各个处理的番茄植株生长正常，并未发现有畸形、叶片黄化等药害症状发生(见6)。3.6 最佳增效配比对灰葡萄孢菌丝形态的影响由图 4 中可以看出，空白对照的灰葡萄孢菌丝生长正常，光滑平直。啶酰菌胺处理灰葡孢菌丝分隔间距变短，部分菌丝顶端膨大，菌丝粗细不均匀；烯肟菌酯处理灰葡萄孢菌丝分增多，间距明显缩短，菌丝表面周围的小黑点似内含物渗漏。最佳增效配比（6:1）处理与对和两单剂相比，分支增多，菌丝生长明显受到抑制，生长扭曲，（见图 4）。A B

灰葡萄孢,细胞膜,完整性,分生孢子

图 5 最佳增效配比(6:1)对灰葡萄孢分生孢子细胞膜完整性的影响Figure 5 Effect of optimal synergistic ratio (6:1) against cell membrane integrity of conidia of B. cinere a:空白对照 B b:啶酰菌胺 10μg/mL C c:烯肟菌酯 10μg/mL D d: 最佳增效配:1） 10μg/mL A a: Blank control B b: Boscalid 10 μg/mL C c: Enestrobin 10 μg/mL D d: Optimal syo (6:1) 10 μg/mL

灰葡萄孢,呼吸速率,药剂处理,抑制率

河北农业大学硕士学位（毕业）论文吸的抑制率分别为 16.48%、29.94%，没有显著差异。经药剂处理 30 min 和 60 min 后，烯肟菌酯对灰葡萄孢的呼吸抑制率分别为 56.12%、75.70%、73.35%，没有显著差异。而经药剂处理 0min 后，最佳增效配比（6:1）对灰葡萄孢的抑制率高达 90.68%，显著高于两个单剂（见图 9、图 10）。

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