木霉菌TH-T20与解淀粉芽孢杆菌SH-27混合防治辣椒疫病初步研究

发布时间：2020-09-02 15:52

　　 本文从辣椒、红树等植物中分离筛选对辣椒疫霉具有抑制、防病作用的真菌菌株的基础上,进一步与本实验室从珊瑚中分离保存的对大豆、辣椒等疫病具有良好防病促生作用的解淀粉芽孢杆菌SH-27菌株混合,探索真菌与细菌混合对辣椒疫病的防病与促生作用。获得如下结果:1.采用稀释分离法和平板对峙法从辣椒、红树中分离筛选到30株对辣椒疫霉具有抑制作用的真菌菌株,选取抑菌率较强、生长速度快、产孢量大的7株真菌菌株室内防治辣椒疫病结果表明,以来自桐花(红树)根内的TH-T20菌株防病效果较好且稳定;根据形态特征和ITS基因序列分析,本文将TH-T20菌株初步鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。2.TH-T20菌株和解淀粉芽孢杆菌SH-27菌株单独处理对辣椒生长及疫病防治室内盆栽测定结果表明,随着TH-T20菌株接种量的增加其防病效果也有所增加,且稳定;TH-T20菌株处理后接种辣椒疫霉菌的间隔时间越长防病效果越好,但接种辣椒疫霉菌后再用TH-T-20菌株处理无防病效果,说明TH-T20菌株对辣椒疫病有一定的预防效果,但无治疗作用。SH-27菌株发酵液处理后立即接种辣椒疫霉菌,其4、6和9 d后的防效分别为70.81%、66.55%和48.20%。另外,TH-T20菌株或SH-27菌株单独处理后的辣椒植株株高、茎粗、鲜重等均显著高于对照处理,表现出良好的促生作用。3.TH-T20与SH-27菌株混合防治辣椒疫病室内盆栽测定结果表明,两菌株培养液混合比例不同其防病效果有所不同,当SH-27菌液含量大于或等于TH-T20菌液时,则混合菌液的防病效果高于两菌株单一处理的防病效果,反之则低于两菌株单一处理的防病效果,尤其低于SH-27菌株的防病效果;以TH-T20与SH-27菌株1:2比例的混合菌液的防病效果最好,3、6、9、12d后的防效分别达60.0%、61.90%、40.99%、39.34%。不同接种时间结果表明,SH27+TH-T20处理后接种辣椒疫霉菌的间隔时间越长其防病效果越好,说明混合菌液对辣椒疫病以预防作用为主。4.TH-T20与SH-27两菌株固体发酵物混合后防治辣椒疫病及对辣椒生长田间试验测定结果表明,两菌株混合物处理后,辣椒疫病的发病率比对照和两菌株单一处理的发病率有所降低,辣椒株高、根长、产量等均比对照和两菌株单一处理的有所提高。说明两菌株混合物对辣椒疫病有一定的田间防病效果,并对辣椒生长具有较好的促进作用。5.TH-T20与SH-27菌株混合液在辣椒根际的定殖及对辣椒防御性酶活测定结果表明,TH-T20和SH27菌株可在辣椒的根际定殖;两菌株混合处理后,辣椒的CAT、POD、SOD等防御性酶活变化与病原菌处理的基本相似;但PAL酶活比病原菌处理的明显增高。
【学位单位】：广东海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S476;S436.418
【部分图文】：

木霉菌 TH-T20 与解淀粉芽孢杆菌 SH-27 混合防治辣椒疫病初步研究TH-T 9 桐花根际 湛江-东海岛 44.45%TH-G1 桐花根内 湛江-库竹大桥 67.15%TH-G2 桐花根内 湛江-库竹大桥 64.23%TH-G6 桐花根内 湛江-库竹大桥 42.12%TH-G4 桐花根内 湛江-库竹大桥 27.42%TH-G7 桐花根内 湛江-库竹大桥 36.35%TH-G8 桐花根内 湛江-库竹大桥 51.26%TH-G9 桐花根内 湛江-库竹大桥 73.72%TH-G11 桐花根内 湛江-东海岛 29.16%TH-G15 桐花根内 湛江-东海岛 32.12%

表 3.2.拮抗真菌对辣椒疫病的室内防病效果Tab.3-2 Control effecacy of antagonistic strains to P.capsici处理接种疫霉菌后的时间（d）3 6 9 12病指 防效% 病指 防效% 病指 防效% 病指 防效%TH-G2 13.33 52.02 23.33 50.01 45.55 32.80 76.67 22.47TH-G9 10.00 64.00 17.78 61.90 40.00 40.99 72.22 26.97LJ-G15 8.89 68.00 21.11 54.78 37.78 44.26 71.11 28.09LJ-G16 11.11 60.00 33.33 28.58 57.77 14.77 81.11 17.98TH-T17 12.22 56.01 27.78 40.48 61.11 19.84 80.00 19.10TH-T18 12.22 56.01 23.34 49.99 51.11 24.59 77.78 21.35TH-T20 6.67 75.99 23.33 50.01 41.11 39.34 63.67 35.62培养基 20.00 - 46.67 - 68.89 - 95.56 -清水（CK） 27.78 - 46.67 - 67.78 - 98.89 -

20 菌株的分生孢子梗和分生孢子结构（A:PDA 上培养 3d 菌落特征；B：PDA落特征；C:：分生孢子梗；D：分生孢子）ucture of Trichoderma TH-T20 Conidiophores and conidia（A:Colony on PDAColony on PDA of 4 days,C: Conidiophores,D: conidia）生物学鉴定H-T20 菌株基因组 DNA，用引物 TTS1 和 ITS4 扩增其 ITS 序列， 条带（图 3-4）。经上海生物工程有限公司测得 TH-T20 的 ITS 部分BLAST 比较发现 TH-T20 菌株的 ITS 序列（附录 1）与棘孢木霉 JQ040324.1 同源性高达 99%。利用 MEGA6.0 软件按 Neighbor-Joinin图 3-5）。TH-T20 菌株与棘孢木霉关系最紧密，位于同一分支中。结征的鉴定结果，初步将 TH-T20 鉴定为棘孢木霉（Trichoderma aspeA

【参考文献】

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本文编号：2810801