猕猴桃溃疡病病原菌的检测及花粉消毒技术的研究

发布时间：2020-10-10 09:31

　　 猕猴桃溃疡病(kiwifruit bacterial canker)是猕猴桃产业爆发的细菌性病害,病原菌为丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonassyringae pv.actinidiae,Psa)。Psa寄主范围广,危害严重。陕西作为中国猕猴桃最大种植区,近年来由于猕猴桃植株感染Psa日趋严重,影响果实品质与商品性。Psa的早期诊断、早期预防是预防大面积爆发Psa的前提,近年来的研究表明,猕猴桃花粉能被Psa感染,花粉已成为Psa国内各猕猴桃产区及国际猕猴桃产区间远距离传播的重要原因。因此,对花粉中Psa准确、快速检测及消毒是控制花粉传播Psa的关键,也是减少猕猴桃Psa大面积爆发的有效措施。本研究采用以Gallelli检测法为基础改进的巢式PCR方法对陕西眉县、周至的猕猴桃枝条、叶片及雄花进行Psa检测,验证该方法的准确性;用Kanr-Psa染菌花粉,并用不同浓度的臭氧处理花粉,检测臭氧对花粉中Kanr-Psa杀灭率及花粉生活力的影响,并将臭氧处理的花粉授粉进行田间应用,调查猕猴桃果实产量指标,从而建立猕猴桃花粉Psa快速检测、消毒技术体系,为控制花粉传播Psa提供技术支撑。主要研究结果如下:一、猕猴桃植株中Psa的巢式PCR检测采摘陕西眉县、周至猕猴桃样品,挑选60个有Psa典型症状和60个无Psa典型症状的枝条、叶片、雄花各20个进行检测,结果表明:60个有Psa典型症状的样品阳性率为76.67%,其中雄花Psa的阳性率为55%;60个无Psa典型症状的样品中阳性率为41.67%,其中雄花Psa的阳性率为50%。无Psa典型症状的阳性结果全部测序分析,发现阳性样品均为Psa。二、不同浓度臭氧处理对染菌于猕猴桃花粉中Kanr-Psa杀灭效果及花粉生活力的影响将Kanr-Psa染菌于花粉中,选用不同浓度的臭氧处理花粉30min,结果表明:花粉中Kanr-Psa的杀灭率随臭氧浓度的升高而增大,浓度为1000mg/m3时,杀灭率可达到98.84%,说明臭氧对猕猴桃花粉中Kanr-Psa的杀灭效果比较好。离体萌发法的检测结果表明:花粉的生活力随着臭氧浓度的增大而降低,浓度为600mg/m3时,花粉生活力下降,有显著性差异(p≤5%),以1000mg/m3对花粉的生活力影响最大,比ck组下降13.49%。三、不同浓度臭氧处理猕猴桃花粉中Psa授粉对猕猴桃产量的影响猕猴桃果实座果率、总重量、单果重、果形指数及种子数等指标统计结果表明:臭氧浓度为600 mg/m3时,与ck组的座果率相比无显著性差异,1000 mg/m3的浓度影响最大,分别下降15.40%、16.40%和18.52%,且畸形果有增加的趋势。生产上应选择对猕猴桃性状影响比较小的臭氧浓度消毒,以600mg/m3为宜。综上所述,本研究结果表明:以Gallelli检测法为基础改进的巢式PCR方法可用于陕西眉县、周至的猕猴桃枝条、叶片及雄花Psa检测,雄花中Psa阳性率为52.5%,用臭氧进行猕猴桃花粉中Psa消毒适宜的条件为600 mg/m3:该处理杀菌率可达90.77%,对花粉活力仅下降9.66%,对猕猴桃果实座果率、总重量、单果重和种子数分别下降7.56%、0.76%、0.76%和8.9%。
【学位单位】：陕西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S436.634
【部分图文】：

陕西师范大学硕士研究生论文逡逑图２－２为巢式ＰＣＲ检测无Ｐｓａ典型症状猕猴桃样品的外引物扩增结果，图Ｄ逡逑的泳道邋３、４、７、１０、１１、１３、１６、１９、２０、２１、２２邋（对应样品编号邋２．１、２．２、２．５、逡逑２．８、２．９、２．１１、２．１４、２．１７、２．１８、２．１９、２．２０）、图邋Ｅ邋的泳道邋５、１１、１５、１６邋（对逡逑应样品编号邋２．２３、２．２９、２．３３、２．３４）和图邋Ｆ邋的泳道邋３、５、６、７、１０、１２、１３、１５、逡逑１７、２０邋（对应样品编号邋２．４１、２．４３、２．４４、２．４５、２．４８、２．５０、２．５１、２．５３、２．５５、逡逑２．５８）均能扩增出与阳性对照大小一致的目的条带，为５９０邋ｂｐ左右，其余均为阴逡逑性结果，由此可初步判断无Ｐｓａ典型症状的６０个样品中，２５个样品可能有Ｐｓａ，逡逑其中枝条１１个，叶片４个、雄花１０个。逡逑２．３．２巢式ＰＣＲ内引物扩X椊峁�逡逑Ｍｌ邋２邋３邋４邋５邋６邋７邋Ｓ邋９邋１０邋１１邋１２邋１３邋１４邋１５邋１６邋１７邋１８邋１９邋２０邋２１２２逡逑ｌ邋＿邋ｂｐ匿■d剩撸邧闳�＿壗~彛海鲥义希ⅲ

本文编号：2835032