柑橘溃疡病菌生防内生细菌的筛

发布时间：2020-11-01 07:49

　　 【研究目的】柑橘是我国南方地区重要的经济作物,其病害发生日趋严重,被称为“柑橘癌症”的柑橘溃疡病(Xanthomonas axonopodis pv.Citri)是影响全球柑橘产业发展的重要检疫性细菌病害,对柑橘产量和品质造成重要影响。目前,柑橘溃疡病的防治主要依赖化学药剂的使用,这无疑阻碍了柑橘产业的可持续发展。而且生产上主要使用的化学农药依然是常见的几种,缺乏推陈出新,长期频繁使用同种化学农药不但会使病菌产生抗性,而且产生的农药残留会污染果品和环境,对人的健康造成不良影响。近年来,随着人们对农产品品质和安全性要求的提高,柑橘病害的生物防治得到了重视,并开展了一系列的研究工作。因此研究柑橘病害的生物防治具有重要意义。【方法】(1)通过梯度平板稀释法对从赣南脐橙园多点取样获得的赣南纽荷尔脐橙的夏梢嫩叶和幼果进行内生菌分离;(2)对分离到的内生菌通过皿内生测初步筛选出对柑橘溃疡病菌有拮抗作用的菌株,进一步通过离体叶片接种法复筛出对柑橘溃疡病具有明显抑制效果的菌株;(3)将筛选到的内生菌株进行形态特征、培养性状、生理生化特性测定以及16S rDNA基因序列分析并构建系统发育树,从而明确这些菌株的种类归属;(4)运用单因素法对内生菌株的发酵培养基与发酵条件进行筛选优化;(5)将明确分类地位的菌株接种到发病脐橙苗期和成株期树上,测定这些菌株对柑橘溃疡病的防治效果。【结果】(1)从赣南纽荷尔脐橙中分离到的菌落密度为7.13×102cfu/g鲜重,主要可培养细菌菌株有18种;(2)筛选到对柑橘溃疡病具有明显抑制防病作用的细菌菌株GN222、GN223、GN233;(3)菌株GN222、GN233被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株GN223归为肠杆菌属(Enterobacter sp.);(4)菌株GN222抑制柑橘溃疡病菌的最优发酵条件为发酵时间60h、装瓶量50ml、pH8和TB发酵培养基、接种量为1%,菌株GN223的最优发酵条件优化为发酵时间60h、装瓶量50ml、pH8和YPD发酵培养基、接种量为1%,菌株GN233的最优发酵条件为发酵时间60h、装瓶量100ml、pH7和YPD发酵培养基、接种量为5%;(5)3株内生细菌在脐橙苗期和成株期树均表现出对溃疡病有一定的防治效果,其中GN222的防治效果最好,且优于农用链霉素,GN233次之,而GN223防治效果相对较差。【结论】从赣南脐橙叶片和幼果筛选到3株对柑橘溃疡病菌具有显著抑制作用的内生细菌,且在田间对柑橘溃疡病具有较好的防效。
【学位单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S436.66;S476
【部分图文】：

图 2-1 部分内生细菌的培养特征1. 菌株 GN231；2. 菌株 GN223；3. 菌株 GN242；4. 菌株 GN211；5. 菌株 GN242；6. 菌株 GN213Fig.2-1 The cultural characteristics of partial endophytes1.Strain GN231; 2.Strain GN223; 3.Strain GN242; 4.Strain GN211; 5.Strain GN242; 6.Strain GN213

图 2-2 菌株 GN233、GN223 对柑橘溃疡病菌的抑制效果（左：GN233；右：GN223Fig.2-2 The inhibition effect of strain GN233 and GN223 on Xanthomonas axonopodis pv.citri(Left: strain 233; Right: stain 223)

图 2-3 菌株 GN222、GN211 对柑橘溃疡病菌的抑制效果（左：GN222；右：GN221）Fig.2-3 The inhibition effect of strain GN222 and GN211 on Xanthomons axonopodis pv. citri (Left: strain 222; Right: stain 221)
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 郎多勇;张文晋;解植彩;周达;张新慧;;宁夏产甘草内生细菌分离纯化、拮抗植物病原菌菌株的筛选及鉴定[J];时珍国医国药;2017年09期

2 熊亚南;龙月红;王梅梅;章广玲;朱丽华;;刺五加内生细菌的分离及抑菌研究[J];北京农业;2012年06期

3 殷幼平;李佳;林亚玉;陈世伟;王中康;;柑橘黄龙病隐症寄主九里香内生细菌分离及功能鉴定[J];微生物学通报;2012年10期

4 宋艳祥;王玉凤;冉隆贤;;热处理和抗生素对桉树固有内生细菌去除的研究[J];河北农业大学学报;2011年04期

5 汪杨丽;马云桐;陈新;宋杰;严铸云;万德光;;变性梯度凝胶电泳分析川芎可培养内生细菌种群的多样性[J];华西药学杂志;2010年01期

6 付东强;高增贵;;根系内生细菌与玉米抗纹枯病关系研究[J];杂粮作物;2008年04期

7 黎起秦;谢义灵;林纬;韦继光;罗宽;;广西番茄内生细菌的多样性和数量动态[J];生物多样性;2006年06期

8 兰海燕,王长海,宋荣;棉花内生细菌及其研究进展[J];棉花学报;2000年02期

9 王娇;解修超;邓百万;罗阳兰;刘军生;;七叶树内生细菌的分离鉴定及生物活性研究[J];黑龙江农业科学;2017年11期

10 李雪艳;张涛;杨红梅;楚敏;高雁;曾军;霍向东;张涛;林青;欧提库尔;李玉国;娄恺;史应武;;新疆黄萎病棉株内生细菌定量及其季节空间变化规律[J];西南农业学报;2018年10期

相关博士学位论文 前10条

1 朱艳蕾;银砂槐内生细菌分离、生理特性及促生抗逆作用研究[D];陕西师范大学;2018年

2 喻江;玉米和大豆根内生细菌多样性及促生细菌鉴定评价[D];东北农业大学;2016年

3 焦健;葡萄根系产褪黑素内生细菌的筛选及其合成路径的研究[D];西北农林科技大学;2017年

4 郑爱萍;微生物来源的防病、杀虫相关因子的分离与功能解析研究[D];四川农业大学;2004年

5 孙磊;非培养方法和培养方法对水稻内生细菌和根结合细菌的研究[D];首都师范大学;2006年

6 邱服斌;培养方法与非培养方法对人参根内生细菌的研究[D];首都师范大学;2007年

7 杨瑞先;银杏内生细菌防治辣椒疫病机制研究[D];福建农林大学;2013年

8 张琴;核桃内生细菌发酵棉秆水解糖液产油及其代谢基础分析[D];浙江大学;2015年

9 赵亮;沙冬青根瘤内生细菌多样性及生物地理研究[D];西北农林科技大学;2015年

10 陈宝;内生细菌促进东南景天Zn/Cd的提取效应及其机制研究[D];浙江大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 李梦霖;油菜内生细菌多样性及对菌核病的拮抗研究[D];吉首大学;2018年

2 苏博;杜仲内生细菌在玉米中的定殖特征及强化抗病机制的研究[D];安徽农业大学;2017年

3 宋水林;柑橘溃疡病菌生防内生细菌的筛选、鉴定及防效研究[D];江西农业大学;2018年

4 吴思梦;柑橘抗/感溃疡病品种内生细菌菌群差异与寄主抗病的相关性研究[D];江西农业大学;2018年

5 安忠琦;金钗石斛内生细菌的分离及抑菌活性研究[D];贵州师范大学;2017年

6 苏坤;牛大力内生细菌的分离鉴定及其促生作用研究[D];广西大学;2018年

7 王玲玲;番茄（Solanum lycopersicum L.）种带微生物多样性和等离子体消毒技术研究[D];中国农业科学院;2018年

8 陈超琼;骆驼刺内生细菌新种Pantoea alhagi LTYR-11Z的鉴定及其促作物抗旱机制初步研究[D];西北农林科技大学;2017年

9 宋艳祥;桉树固有内生细菌去除及恢复培养研究[D];河北农业大学;2011年

10 申红妙;桉树内生细菌种群变化与抗青枯病的关系研究[D];河北农业大学;2010年

本文编号：2865238