苯丙烯菌酮对水稻稻瘟病菌作用机制初探
发布时间：2020-11-12 06:30
异补骨脂查尔酮的农药学命名为苯丙烯菌酮,它是从豆科植物补骨脂种子中提取的抑菌活性成分,对苹果腐烂病菌、水稻稻瘟病菌、黄瓜炭疽病菌、番茄炭疽病菌、禾谷镰刀病菌等15种病原真菌均有较好的抑制活性。本实验首先以水稻稻瘟病菌为供试菌,采用紫外分光光度法和荧光分光光度法对细胞壁几丁质水解酶及其合成酶,葡聚糖水解酶及其合成酶进行活性测定,并对两种水解酶相应的水解产物进行含量测定,探究苯丙烯菌酮对水稻稻瘟病菌细胞壁的作用;测定了水稻稻瘟病菌细胞胞外磷物质浓度,PI-DNA复合物荧光强度;采用气质联用方法测定了甾醇类物质含量,进一步解释杀菌剂对菌体细胞膜的影响;然后结合计算机分子模拟技术,对几丁质酶进行同源建模、活性位点预测、几丁质酶动力学分析、几丁质酶与小分子复合物动力学分析、分子对接和结合自由能计算等工作探究杀菌剂与几丁质酶的相互作用;最后通过SDS-PAGE蛋白凝胶电泳试验观察苯丙烯菌酮对菌体内蛋白生成及含量的影响。通过以上研究得出以下结论:苯丙烯菌酮可以调节细胞壁几丁质酶、葡聚糖酶及其合成酶的活性,并以氢键方式与几丁质酶的ASP267和ARG276残基结合,与TYR270,PRO271,VAL272,LEU310,PRO311,TYR316和LEU317这些非极性的氨基酸残基形成重要的疏水作用,破坏了细胞壁的结构和功能;细胞膜相关实验表明苯丙烯菌酮处理组,菌体细胞膜的流动性和完整性遭到破坏,加速了细胞凋亡进程;蛋白电泳结果也显示细胞内蛋白的种类和数量发生了相应的变化。通过以上研究为新型杀菌剂的开发提供思路。
【学位单位】：沈阳化工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S435.111.41
【部分图文】：
图 1-1 黄酮类化合物的结构柚子，酸橙）的果肉，果皮中含主要包括抗微生物，抗肿瘤，抗物，它对酵母菌之外的大部分微对金黄色葡萄球菌有一定的抑制率高于对照组，膜通透性随着处用最好；同时在细菌蛋白质和苷锌和柚皮苷铜络合物后细胞内细胞死亡，对细胞的破坏作用由柚皮苷及其金属络合物以细菌细物质外泄，渗透率增大，膜通透
图 1-1 黄酮类化合物的结构1.3.2 黄酮类化合物杀菌机制柚皮苷在芸香科植物（如柚子，酸橙）的果肉，果皮中含量较多，也是水果苦味的来源（图 1-2）。柚皮苷的生物活性主要包括抗微生物，抗肿瘤，抗炎，抗氧化等功能。柚皮苷按结构可以归为双氢类黄酮化合物，它对酵母菌之外的大部分微生物生长都有抑制作用。陈婧等认为柚皮苷及其金属络合物对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用，在膜通透性实验中发现处理组细菌的电解质相对渗透率高于对照组，膜通透性随着处理时间的延长效果更为明显，其中柚皮苷-Zn 对葡萄球菌的作用最好；同时在细菌蛋白质和核酸泄露实验中发现：分别向菌体培养液中加入柚皮苷，柚皮苷锌和柚皮苷铜络合物后细胞内蛋白质和核酸不断的泄露，大量的内容物流出最终导致菌体细胞死亡，对细胞的破坏作用由强到弱依次是柚皮苷铜，柚皮苷锌和柚皮苷[53]。由此可见，柚皮苷及其金属络合物以细菌细胞膜为靶点，通过破坏细胞膜结构使菌体内蛋白质和核酸类物质外泄，渗透率增大，膜通透性增加，细胞最终变为空壳或者变为残渣达到杀菌效果。
图 1-3 查耳酮类化合物的结构菌机制类化合物杀菌作用时选用四种化合物进行bavachalcone，6-prenylapigenin 和 4-hydrox，2，3，4 对金黄色葡萄球菌最小抑制浓度下的抑菌作用和庆大霉素，诺氟沙星效果相μg/mL 和 16μg/mL。化合物 4 的最小抑菌 为了进一步探究化合物对金黄色葡萄球菌物 4 进行研究，处理组化合物在最低抑制迅速减少，部分细胞膜发生溶解作用。使（35S）甲硫氨酸来评估化合物对细菌蛋白物 1，2，4 处理后细菌细胞内虽然有少量蛋抑制作用，其作用与诺氟沙星、利福平相当
【相似文献】
本文编号：2880383
【学位单位】：沈阳化工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S435.111.41
【部分图文】：
图 1-1 黄酮类化合物的结构柚子，酸橙）的果肉，果皮中含主要包括抗微生物，抗肿瘤，抗物，它对酵母菌之外的大部分微对金黄色葡萄球菌有一定的抑制率高于对照组，膜通透性随着处用最好；同时在细菌蛋白质和苷锌和柚皮苷铜络合物后细胞内细胞死亡，对细胞的破坏作用由柚皮苷及其金属络合物以细菌细物质外泄，渗透率增大，膜通透
图 1-1 黄酮类化合物的结构1.3.2 黄酮类化合物杀菌机制柚皮苷在芸香科植物（如柚子，酸橙）的果肉，果皮中含量较多，也是水果苦味的来源（图 1-2）。柚皮苷的生物活性主要包括抗微生物，抗肿瘤，抗炎，抗氧化等功能。柚皮苷按结构可以归为双氢类黄酮化合物，它对酵母菌之外的大部分微生物生长都有抑制作用。陈婧等认为柚皮苷及其金属络合物对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用，在膜通透性实验中发现处理组细菌的电解质相对渗透率高于对照组，膜通透性随着处理时间的延长效果更为明显，其中柚皮苷-Zn 对葡萄球菌的作用最好；同时在细菌蛋白质和核酸泄露实验中发现：分别向菌体培养液中加入柚皮苷，柚皮苷锌和柚皮苷铜络合物后细胞内蛋白质和核酸不断的泄露，大量的内容物流出最终导致菌体细胞死亡，对细胞的破坏作用由强到弱依次是柚皮苷铜，柚皮苷锌和柚皮苷[53]。由此可见，柚皮苷及其金属络合物以细菌细胞膜为靶点，通过破坏细胞膜结构使菌体内蛋白质和核酸类物质外泄，渗透率增大，膜通透性增加，细胞最终变为空壳或者变为残渣达到杀菌效果。
图 1-3 查耳酮类化合物的结构菌机制类化合物杀菌作用时选用四种化合物进行bavachalcone，6-prenylapigenin 和 4-hydrox，2，3，4 对金黄色葡萄球菌最小抑制浓度下的抑菌作用和庆大霉素，诺氟沙星效果相μg/mL 和 16μg/mL。化合物 4 的最小抑菌 为了进一步探究化合物对金黄色葡萄球菌物 4 进行研究，处理组化合物在最低抑制迅速减少，部分细胞膜发生溶解作用。使（35S）甲硫氨酸来评估化合物对细菌蛋白物 1，2，4 处理后细菌细胞内虽然有少量蛋抑制作用，其作用与诺氟沙星、利福平相当
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本文编号：2880383
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