舞毒蛾LdNPV复配剂致病力及其对舞毒蛾GST酶活性的影响

发布时间：2020-11-14 13:04

　　 舞毒蛾(Lymantria dispar L.)是一种叶食害虫,具有寄主种类多、分布广、危害大的特征。舞毒蛾核型多角体病毒(L.dispar nucleopolyhedrosivirus,简称LdNPV)是一种可以影响舞毒蛾种群数量的致病微生物。合适的荧光增白剂可以提高LdNPV对舞毒蛾幼虫的毒力,达到利用病毒防治舞毒蛾虫害的目的,为此室内用正交实验方法比较不同浓度的荧光增白剂和氯化锌对核型多角体病毒的增效作用,筛选出最佳配比,得到了复配剂;通过生物测定确定了复配剂对舞毒蛾的LC_50和LT_50,同时分析了复配剂对舞毒蛾的亚致死作用。为研究这种增效作用的原理,实验测定了复配剂各成分对舞毒蛾4龄幼虫血淋巴和中肠谷胱甘肽S-转移酶比活性的影响关系。研究结果如下:1.病毒中添加1%的荧光增白剂和0.1%的氯化锌,紫外照射6h后,对舞毒蛾的死亡率比正常人工饲料的情况提高3倍,舞毒蛾幼虫的死亡率是67.7%。说明这种配比可以显著提高LdNPV对舞毒蛾幼虫的致死作用。2.舞毒蛾幼虫取食添加1%荧光增白剂VBL与0.1%氯化锌(ZnCl_2)的LdNPV后,病毒浓度与致死作用呈正相关,病毒浓度越高,致死率越高。对舞毒蛾2龄幼虫致死中浓度(LC_(50))为106.4 0Bs/μL,LC_90为6457.4 0Bs/μL,浓度为390Bs/μL时,致死中时间LT_50为13.12d,浓度为3900Bs/μL时,LT_(50)为9.37 d。3.加入荧光增白剂VBL和氯化锌(ZnCl_2)的LdNPV对舞毒蛾幼虫有亚致死作用。雄性幼虫历期较对照缩短,不同病毒浓度下雄性幼虫历期较对照的缩短2-5d。随病毒浓度的升高,复配剂使舞毒蛾雌雄化蛹率、羽化率、产卵数量、卵块重量减少,且浓度越高,减少的越明显。取食未添加荧光增白剂和氯化锌的人工饲料的舞毒蛾与已被病毒感染的舞毒蛾单雌产卵量差异明显,比对照显著降低。4.VBL+ZnCl_2+病毒复配剂和ZnCl_2+病毒对舞毒蛾4龄幼虫的中肠、血淋巴GST酶活性有显著差异,比对照组(单独病毒)的酶活性增高,在第72h时表现为活性增加最大,达到显著差异。VBL+ZnCl_2+病毒对舞毒蛾幼虫血淋巴GST的影响在第72h时表现为活性增加,24h时的血淋巴GST活性也显著增加,分别比单独病毒的增高3.7和7.2倍。VBL+ZnCl_2+病毒复配剂对舞毒蛾幼虫中肠GST的影响在第48h和72h时表现为活性增加,与24h时的中肠GST显著差异,分别增高2.4和4.6倍。
【学位单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S433.4
【文章目录】：
摘要
abstract
1.引言
    1.1 舞毒蛾相关生物学
        1.1.1 危害与分布
        1.1.2 生活史
        1.1.3 舞毒蛾天敌及制约能力
        1.1.4 舞毒蛾的防治
        1.1.5 物理防治
        1.1.6 化学药剂防治
        1.1.7 生物防治
            1.1.7.1 苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis, Bt）
            1.1.7.2 舞毒蛾核型多角体病毒
            1.1.7.3 关于荧光增白剂VBL分析
    1.2 VBL增效作用研究进展
        1.2.1 中国的舞毒蛾病毒研究
        1.2.2 国内外荧光增白剂研究
            1.2.2.1 国外荧光增白剂研究
            1.2.2.2 中国荧光增白剂研究现状
        1.2.3 国内外舞毒蛾幼虫谷胱甘肽S-转移酶研究现状
            1.2.3.1 国外舞毒蛾幼虫谷胱甘肽S-转移酶研究现状
            1.2.3.2 在中国舞毒蛾幼虫谷胱甘肽S-转移酶研究现状
    1.3 研究意义及研究内容过程
        1.3.1 研究目的及意义
        1.3.2 研究内容
        1.3.3 技术路线
2.材料与方法
    2.1 供试材料
    2.2 舞毒蛾幼虫饲养方法
        2.2.1 卵面的消毒
        2.2.2 人工饲料的制作
        2.2.3 幼虫饲养
        2.2.4 供试幼虫的选取与病毒的饲喂
    2.3 LdNPV的分离题纯
    2.4 荧光素VBL对于舞毒蛾核型多角体病毒毒力的影响分析
        2.4.1 幼虫的饲养及前期处理
        2.4.2 VBL的增效作用测定
            2.4.2.1 生物测定
            2.4.2.2 数据的处理
        2.4.3 实验的计划（VBL浓度筛选）
            2.4.3.1 确定VBL最佳浓度研究办法
            2.4.3.2 VBL的抗紫外线作用的研究计划
        2.4.4 数据的处理
    2.5 舞毒蛾核型多角体病毒的最佳复配剂对舞毒蛾幼虫亚致死的影响
        2.5.1 幼虫的饲养及前期处理
        2.5.2 最佳复配剂不同浓度的病毒溶液的配制
        2.5.3 数据统计与分祈
    2.6 荧光素及舞毒蛾核型多角体病毒对舞毒蛾酶活的影响
        2.6.1 幼虫饲养及前期处理
        2.6.2 酶液提取
        2.6.3 实验液的配置
        2.6.4 谷胱甘肽-S-转移酶 GlututhioneS-transferases 活性测定
        2.6.5 蛋白质含量测定
        2.6.6 数据统计与分析
3.结果与分析
    3.1 荧光素VBL对舞毒蛾核型多角体病毒的毒力的影响分析
        3.1.1 筛选获得LdNPV的最佳复配剂
        3.1.2 LdNPV的不同复配剂对舞毒蛾幼虫发育影响
        3.1.3 小结
    3.2 舞毒蛾核型多角体病的复配剂对舞毒蛾幼虫的致病力
        3.2.1 最佳病毒复配剂对舞毒蛾二龄幼虫的死亡率的分析
50 '>        3.2.2 最佳病毒复配剂对舞毒蛾二龄幼虫的致死中浓度LC50

        3.2.3 不同浓度LdNPV舞毒蛾幼虫的致死中时间 LT₅₀

        3.2.4 小结
2和不同浓度LdNPV感染的人工饲料后对舞毒蛾幼虫发育历期的影响 '>    3.3 舞毒蛾幼虫取食 VBL、ZnCl₂和不同浓度LdNPV感染的人工饲料后对舞毒蛾幼虫发育历期的影响
2和不同浓度LdNPV感染的人工饲料对舞毒蛾雄幼虫发育历期的影响 '>        3.3.1 舞毒蛾幼虫取食 VBL、ZnCl₂和不同浓度LdNPV感染的人工饲料对舞毒蛾雄幼虫发育历期的影响
2和不同浓度LdNPV感染的人工饲料对舞毒蛾?幼虫发育历期影响 '>        3.3.2 舞毒蛾幼虫取食 VBL、ZnCl₂和不同浓度LdNPV感染的人工饲料对舞毒蛾?幼虫发育历期影响
        3.3.3 最佳病毒复配剂对舞毒蛾蛹的影响
2和不同浓度病毒对舞毒蛾的产卵量及性比的影响 '>        3.3.4 VBL、ZnCl₂和不同浓度病毒对舞毒蛾的产卵量及性比的影响
        3.3.5 小结
    3.4 舞毒蛾核型多角体病毒复配剂及其组分对舞毒蛾4龄幼虫酶的影响
        3.4.1 血淋巴的谷胱肽S转移酶
            3.4.1.1 不同成分对舞毒蛾幼虫血淋巴GST的比较
            3.4.1.2 小结
        3.4.2 中肠的谷胱甘肽S转移酶
            3.4.2.1 不同成分对舞毒蛾幼虫中肠GST比较
            3.4.2.2 小结
4.结论与讨论
    4.1 结论
    4.2 讨论
    4.3 论文的创新点
致谢
参考文献
附录
作者简介

【参考文献】

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1 黄琳瑞;甜菜夜蛾对虫酰肼抗药性选育和抗药性机理初探[D];中国农业大学;2005年

本文编号：2883503

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