拟南芥AtbZIP2转录因子在激发子诱发植物免疫中的功能分析

发布时间:2020-11-15 09:16
   植物先天免疫的产生源自其不断面临病原的侵扰,病原与植物互作调控机制是研究植物免疫的重要内容。传统观念认为气孔是病原菌侵染植物的被动通道,然而新的研究发现气孔在感应叶际微生物时能够主动关闭以限制病原的入侵,气孔免疫是植物先天免疫的一部分。激发子能诱导植物产生免疫反应,导致活性氧的积累和气孔关闭,产生对病原菌的系统抗病反应。转录因子通过调控气孔运动进而参与调控植物耐旱性和抗病性。本研究分别从激发子诱导拟南芥气孔和质外体防卫反应的角度来探究AtbZIP2转录因子的功能。根据生物信息学预测分析AtbZIP2在保卫细胞中表达丰度高且特异,并由组织定位得到验证。通过系统进化分析该蛋白可能与植物抗病相关。随后通过三引物法和qPCR筛得bzip2纯合突变体,经干旱处理发现AtbZIP2参与了拟南芥耐旱性。进一步通过外源刺激发现AtbZIP2参与了Flg22诱导的气孔关闭,可能与保卫细胞中ROS和NO的产生相关。通过喷菌接种和注射接种发现AtbZIP2同时参与了Flg22诱导拟南芥气孔和质外体对Pseudomonas syringae pv.tomatoDC3000(Pst DC3000)的抗性,同时接种核盘菌发现AtbZIP2也参与了Flg22诱导拟南芥对核盘菌的抗性,可能与胼胝质积累相关。总之,本研究发现AtbZIP2转录因子参与了Flg22诱导的拟南芥防卫反应,为激发子诱导植物防卫反应的分子机理提供了理论基础。
【学位单位】:安徽农业大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2018
【中图分类】:S432.2
【部分图文】:

预测分析,拟南芥,特异性,转录因子


图 4-1 AtbZIP2 在拟南芥不同组织中特异性预测分析Figure4-1 The predictive analysis of tissue specific of AtbZIP2 in Arabidopsis.1.2 AtbZIP2的进化分析根据前人报道,从拟南芥、烟草、水稻、番茄、辣椒等不同物种中找到与抗病相 bZIP 转录因子,将这些转录因子的蛋白序列与 AtbZIP2 的蛋白序列进行比对,构系统发育树,结果发现 AtbZIP2 与 Cabzip2 表现较高的同源性,表明 AtbZIP2 在功可能与 Cabzip2 有一定相似性(图 4-2)。

转录因子,物种,启动子区,保卫细胞


图 4-2 AtbZIP2 与不同物种 bZIP 转录因子的进化分析(字体加粗表明蛋白与 SA 信号相关)Figure4-2 Phylogenetic analysis of AtbZIP2 and other bZIP TFs(The protein response to SA are highlighted in bold).3 AtbZIP2在保卫细胞中定位分析为了探究AtbZIP2到底在什么位置表达,我们将AtbZIP2的启动子区构建融合了物表达载体 AtbZIP2-PBI101-GFP,通过电击转化农杆菌,再利用花浸法转化到南芥,最后筛选到 AtbZIP2 启动子区转基因植株。利用激光共聚焦显微镜观测下图 4-3 所示,AtbZIP2 启动子区转基因拟南芥植株中保卫细胞可以检测到荧而转入空载体的对照组植株保卫细胞检测不到荧光信号,表明 AtbZIP2 确实在中特异表达。

保卫细胞,启动子区


图 4-2 AtbZIP2 与不同物种 bZIP 转录因子的进化(字体加粗表明蛋白与 SA 信号相关)Figure4-2 Phylogenetic analysis of AtbZIP2 and other b(The protein response to SA are highlighted in bol4.1.3 AtbZIP2在保卫细胞中定位分析为了探究AtbZIP2到底在什么位置表达,我们将AtbZIP2的启的植物表达载体 AtbZIP2-PBI101-GFP,通过电击转化农杆菌,再型拟南芥,最后筛选到 AtbZIP2 启动子区转基因植株。利用激光果如下图 4-3 所示,AtbZIP2 启动子区转基因拟南芥植株中保卫号,而转入空载体的对照组植株保卫细胞检测不到荧光信号,表细胞中特异表达。
【参考文献】

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1 蔡新忠;郑重;;植物系统性获得抗病性的产生机理和途径[J];植物保护学报;1999年01期



本文编号:2884598

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