稻瘟菌免疫诱导蛋白MoSM1互作蛋白的筛选及验证

发布时间：2021-01-04 15:10

　　稻瘟菌分泌的小分子蛋白MoSM1是一类Cerato-platanin蛋白。目前,已经发现MoSM1蛋白作为稻瘟菌的毒力因子也可以作为植物免疫反应的激发子。但是,关于寄主植物识别MoSM1,并且如何激活下游抗病信号通路的机制研究还没有报道。为了鉴定出水稻中能够识别并结合MoSM1蛋白的受体蛋白,我们利用酵母双杂交和蛋白质免疫沉淀结合液相串联质谱实验筛选与MoSM1的寄主受体蛋白。在酵母双杂交实验中,将含有pGBKT7-MoSM1的Y2HGold菌株与含有水稻的cDNA文库的酵母Y187菌株进行mating。最后得到30个阳性克隆,并根据这些基因所编码的蛋白的功能将范围缩小到8个。但接下来的验证互作实验中,发现它们均不能检测出互作信号,因此,酵母双杂交实验未能鉴定出与MoSM1互作的水稻蛋白。利用IP-MS技术筛选鉴定MoSM1的水稻受体蛋白。实验中设置了三个实验组及一个阴性对照普通型水稻XS11。提取水稻叶片总蛋白进行IP实验。将所得到的蛋白进行质谱分析。质谱分析鉴定到胶条中含有220个蛋白,对这些蛋白进行GO功能分析,并依据蛋白功能、结构域、亚细胞定位等指标来初步筛选出约20个候选互作... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１酵母四缺培养基上筛选与ＳＭ１互作的水稻候选蛋白??

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本文编号：2956976