葡萄抗白粉病VvBAK1和VvLecRK1 CRISPR/Cas9载体构建及转化葡萄的研究
发布时间：2021-01-19 12:31
葡萄（Vitis spp.）是世界上栽培历史最悠久的果树之一,因其果实多汁且营养价值丰富而被广泛栽培。当前栽培的品种多为欧洲葡萄,欧洲葡萄品质优良,但是其抗病性较差,从而给葡萄产业带来不少的经济损失。因而挖掘葡萄抗病基因,开展抗病基因功能研究为解析抗病分子机理,定向改良感病葡萄抗病性具有重要的理论意义和应用价值。本研究以课题组前期发现的两个响应白粉病的抗病基因BAK1和LecRK1为基础,从欧洲葡萄‘无核白’中克隆其cDNA全长序列,利用先进的CRISPR/Cas9技术定向编辑BAK1和LecRK1,构建DNA编辑载体,通过农杆菌介导法将其转入‘无核白’胚性愈伤组织中,为深入开展抗病功能研究提供基础材料。本研究结果如下:1.VvBAK1和VvLecRK1基因及启动子克隆。采用RT-PCR技术克隆‘无核白’葡萄VvBAK1和VvLecRK1基因cDNA全长序列,VvBAK1开放阅读框为1833 bp,共编码610个氨基酸;VvLecRK1的开放阅读框为2415 bp,共编码804个氨基酸,VvLecRK1与欧洲葡萄‘黑比诺’的蛋白序列的同源性为97.77%,比‘黑比诺’的蛋白序列少了两个...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄抗白粉病VvBAK1cDNA克隆
VvBAK1基因瞬时转化烟草亚细胞定位Fig.2-3SubcellularlocalizationofVvBAK1
图 2-2 VvBAK1(B)与欧洲葡萄‘黑比诺’(A)蛋白质序列比对Fig. 2-2 Protein sequence alignment of ‘Thompson Seedless’(B) and ‘Pinot Noir’(A) in VvBAK12.3.2 VvBAK1 亚细胞定位将空载体与融合载体的农杆菌侵染液分别注射本氏烟草叶片，利用激光共聚焦显
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究[J]. 郭晔,万东艳,柴壮壮,王跃进,文颖强. 园艺学报. 2019(04)
[2]CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因[J]. 汪秉琨,张慧,洪汝科,张锦文,杨睿,罗琼,曾千春. 中国水稻科学. 2018(01)
[3]植物CRISPR基因组编辑技术的新进展[J]. 李红,谢卡斌. 生物工程学报. 2017(10)
[4]华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析[J]. 王辰,姚文孔,谢小青,童威霍,王磊,王杰,王跃进. 果树学报. 2016(12)
[5]Diverse roles of SERK family genes in plant growth, development and defense response.[J]. Min Fan,Minmin Wang,Ming-Yi Bai. Science China（Life Sciences）. 2016(09)
[6]“赤霞珠”葡萄组培快繁体系研究[J]. 冯文华,代红军. 北方园艺. 2016(13)
[7]“新郁”葡萄离体再生体系的建立[J]. 骆萌,王杰,李玉玲,宋士任,赵丽萍,许文平. 北方园艺. 2016(09)
[8]中国野生毛葡萄叶盘法遗传转化中抗生素种类及体积质量分数的筛选[J]. 马孟增,甘专,张文娥,潘学军. 西南大学学报(自然科学版). 2013(07)
[9]毛葡萄茎尖的离体培养与植株再生[J]. 甘专,刘伟,马孟增,潘学军. 西南农业学报. 2013(03)
[10]华东葡萄广西-2花药胚状体诱导与再生植株的研究[J]. 支玉玺,张剑侠,王跃进. 果树学报. 2010(01)
博士论文
[1]葡萄WRKY家族基因的鉴定及VlWRKY58和VaWRKY10的功能分析[D]. 郭春磊.西北农林科技大学 2018
[2]拟南芥类受体激酶BAK1和BKK1介导的细胞死亡的分子机理研究[D]. 高阳.兰州大学 2017
[3]中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpRH2抗白粉病功能研究[D]. 王磊.西北农林科技大学 2017
[4]无核白葡萄体细胞胚再生体系建立与转基因研究[D]. 周起.西北农林科技大学 2014
[5]植物凝集素类受体蛋白激酶LecRK-b2的生物信息学分析及基因功能研究[D]. 邓克勤.湖南大学 2009
硕士论文
[1]RPW8.2转基因葡萄生物学特性观察及白粉病抗性评价[D]. 侯凤娟.西北农林科技大学 2018
[2]中国野生山葡萄转录因子VaERF20克隆与功能研究[D]. 王梦楠.西北农林科技大学 2018
[3]CRISPR/Cas9系统应用于水稻和毛白杨的研究[D]. 李魏辉.华南农业大学 2016
[4]BAK1和SERK1参与调控拟南芥花器官脱落的分子机理[D]. 龚雪.兰州大学 2014
[5]中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1功能分析[D]. 余义和.西北农林科技大学 2010
本文编号：2986994
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄抗白粉病VvBAK1cDNA克隆
VvBAK1基因瞬时转化烟草亚细胞定位Fig.2-3SubcellularlocalizationofVvBAK1
图 2-2 VvBAK1(B)与欧洲葡萄‘黑比诺’(A)蛋白质序列比对Fig. 2-2 Protein sequence alignment of ‘Thompson Seedless’(B) and ‘Pinot Noir’(A) in VvBAK12.3.2 VvBAK1 亚细胞定位将空载体与融合载体的农杆菌侵染液分别注射本氏烟草叶片，利用激光共聚焦显
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究[J]. 郭晔,万东艳,柴壮壮,王跃进,文颖强. 园艺学报. 2019(04)
[2]CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因[J]. 汪秉琨,张慧,洪汝科,张锦文,杨睿,罗琼,曾千春. 中国水稻科学. 2018(01)
[3]植物CRISPR基因组编辑技术的新进展[J]. 李红,谢卡斌. 生物工程学报. 2017(10)
[4]华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析[J]. 王辰,姚文孔,谢小青,童威霍,王磊,王杰,王跃进. 果树学报. 2016(12)
[5]Diverse roles of SERK family genes in plant growth, development and defense response.[J]. Min Fan,Minmin Wang,Ming-Yi Bai. Science China（Life Sciences）. 2016(09)
[6]“赤霞珠”葡萄组培快繁体系研究[J]. 冯文华,代红军. 北方园艺. 2016(13)
[7]“新郁”葡萄离体再生体系的建立[J]. 骆萌,王杰,李玉玲,宋士任,赵丽萍,许文平. 北方园艺. 2016(09)
[8]中国野生毛葡萄叶盘法遗传转化中抗生素种类及体积质量分数的筛选[J]. 马孟增,甘专,张文娥,潘学军. 西南大学学报(自然科学版). 2013(07)
[9]毛葡萄茎尖的离体培养与植株再生[J]. 甘专,刘伟,马孟增,潘学军. 西南农业学报. 2013(03)
[10]华东葡萄广西-2花药胚状体诱导与再生植株的研究[J]. 支玉玺,张剑侠,王跃进. 果树学报. 2010(01)
博士论文
[1]葡萄WRKY家族基因的鉴定及VlWRKY58和VaWRKY10的功能分析[D]. 郭春磊.西北农林科技大学 2018
[2]拟南芥类受体激酶BAK1和BKK1介导的细胞死亡的分子机理研究[D]. 高阳.兰州大学 2017
[3]中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpRH2抗白粉病功能研究[D]. 王磊.西北农林科技大学 2017
[4]无核白葡萄体细胞胚再生体系建立与转基因研究[D]. 周起.西北农林科技大学 2014
[5]植物凝集素类受体蛋白激酶LecRK-b2的生物信息学分析及基因功能研究[D]. 邓克勤.湖南大学 2009
硕士论文
[1]RPW8.2转基因葡萄生物学特性观察及白粉病抗性评价[D]. 侯凤娟.西北农林科技大学 2018
[2]中国野生山葡萄转录因子VaERF20克隆与功能研究[D]. 王梦楠.西北农林科技大学 2018
[3]CRISPR/Cas9系统应用于水稻和毛白杨的研究[D]. 李魏辉.华南农业大学 2016
[4]BAK1和SERK1参与调控拟南芥花器官脱落的分子机理[D]. 龚雪.兰州大学 2014
[5]中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1功能分析[D]. 余义和.西北农林科技大学 2010
本文编号：2986994
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/2986994.html
