短链脱氢酶与朱砂叶螨对甲氰菊酯抗药性的关系研究

发布时间:2021-01-19 20:41
  朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)是一种可危害多种农作物的重要农业害螨。目前,农业害螨的防治还是以化学农药为主,但由于单一农药的大量重复使用以及害螨属于r-对策类生物导致其抗性水平急剧上升,目前已经对大部分杀螨剂均产生抗性,在农业和经济上均造成不可逆的损失。甲氰菊酯是一种拟除虫菊酯类杀虫(螨)剂,目前世界上多个地区的农业害螨均对甲氰菊酯产生了一定程度的抗药性,其抗性机制的研究也取得了一定的进展。短链脱氢酶(Short chaindehydrogenases/reductases,SDRs)是一类古老的超家族酶系,广泛分布于真核和原核生物中,已有的研究表明其主要功能是参与生物的生长发育,同时也能代谢多种内源和外源物质(药物)。前期的研究发现朱砂叶螨甲氰菊酯抗性品系的SDR基因表达量显著高于敏感品系,说明朱砂叶螨对甲氰菊酯抗性形成可能与SDR有关。目前有关SDR与害螨抗药性的研究未见报道,研究SDR与朱砂叶螨抗药性的关系不仅能丰富朱砂叶螨代谢抗性机制,也能为朱砂叶螨的综合防治提供理论支撑。因此,本论文以实验室的转录组和基因芯片数据为基础,通过表达模式分析和RNA ... 

【文章来源】:西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:78 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

短链脱氢酶与朱砂叶螨对甲氰菊酯抗药性的关系研究


朱砂叶螨总RNA电泳条带图

氨基酸序列,二斑叶螨,朱砂叶螨,系统进化树分析


第三章 朱砂叶螨与甲氰菊酯抗性相关 SDR 基因克隆和表达模式分析在 SDR 数据库(http://www.SDR-enzymes.org/)上检索已录入库中的二斑叶螨中的 SDR 基因,并结合二斑叶螨基因组比对结果,综合选择 20 条 SDR 基因和UN9502 的氨基酸序列构建系统发育树,如图 3.4 所示。结合系统发育树,可以发现UN9502基因与其在二斑叶螨中直系同源的SDR基因tetur28g01080节点值达到99%,并且二者均归类到 SDR112C 超家族中。

朱砂叶螨,重组蛋白,复性,包涵体


朱砂叶螨 pET28a- TcSDR112C1 重组蛋白 SDS-PAGE 电泳AGE electrophoresis analysis of recombinant pET28a- TcSDR112C1cinnabarinus:加 IPTG 的空 pET28a 总蛋白;2:不加 IPTG 的 pET28a- TcSDR112C1 总R112C1 总蛋白:4:加 IPTG 的 pET28a- TcSDR112C1 沉淀;5 加 IPTG 的 1: The protein of pET28a with IPTG induced; 2: The protein of pET28a- Tc The protein of pET28a- TcSDR112C1 with IPTG induced; 4: The precipitationth IPTG induced; 5: The supernatant protein of pET28a- TcSDR112C1 with IPTGR112C1 基因原核表达后包涵体复性及 WB 分析载体,但蛋白依旧以包涵体的形式存在,因此选择C1 重组菌体进行包涵体复性。复性后对可溶蛋白进行 SD证,发现复性后的可溶蛋白在 31.6 kDa 附近有目的条带淀和复性蛋白有显影,如图 5.2 所示。

【参考文献】:
期刊论文
[1]昆虫RNAi技术与方法[J]. 田宏刚,刘同先,张文庆.  应用昆虫学报. 2013(05)
[2]朱砂叶螨对不同蔬菜寄主的取食选择性[J]. 王少丽,张友军,徐宝云,吴青君.  环境昆虫学报. 2011(03)
[3]大肠杆菌表达系统的研究进展[J]. 解庭波.  长江大学学报(自科版)医学卷. 2008(03)
[4]朱砂叶螨对3种杀螨剂的抗性选育及抗性治理研究[J]. 何林,赵志模,邓新平,王进军,刘怀,刘映红.  中国农业科学. 2003(04)
[5]为害蔬菜的朱砂叶螨生物学特性研究[J]. 孙庆田,孟昭军.  吉林农业大学学报. 2001(02)
[6]Meothrinfenpropathrin甲氰菊酯[J]. Yoshio Fujita,潘怀德.  农药译丛. 1982(04)
[7]棉红蜘蛛的抗药性問題[J]. 张澤溥,王少成.  植物保护. 1964(02)
[8]省植物保护学会讨论棉红蜘蛛抗药性问题[J]. 刘家仁.  湖北农业科学. 1963(06)

博士论文
[1]朱砂叶螨抗甲氰菊酯P450基因鉴定及其转录调控研究[D]. 石力.西南大学 2017



本文编号:2987677

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