感染CTV甜橙对褐色橘蚜寄主选择行为的影响
发布时间：2021-03-10 11:59
由柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）引起的柑橘衰退病,对全世界的柑橘产业造成严重经济损失,是一种重要的柑橘病害。CTV可通过蚜虫以半持久性方式进行传播,其中褐色橘蚜（Toxoptera citricida,Kirkaldy）是CTV最有效的媒介昆虫之一。我国广泛分布着CTV的强毒株系以及介体褐色橘蚜,加之我国柑橘产业结构的调整,柑橘衰退病的流行在我国日趋严重,并对甜橙等品种的安全生产存在严重威胁。在寄主植物-病毒-媒介昆虫之间的互作系统中,病毒侵染寄主植物会后,影响寄主的次生代谢等生理生化作用,继而影响介体的寄主选择行为、种群增长等生物学特性,最终会在一定程度上影响到媒介昆虫对病毒的传播。病毒对介体的影响与其媒介昆虫传播方式密切相关。通过对这些三者间互作关系的系统研究,有助于提出介体传播的植物病毒病害的有效防控的新思路和途径。本文以CTV-寄主甜橙-褐色橘蚜为研究对象,通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）、RT-q PCR等技术对褐色橘蚜在感染CTV甜橙上的寄主选择行为的生物学特性进行了研究,分析了甜橙感染CTV后寄主植物中挥发性物质的含量与组成及萜类合...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物中不同挥发物的生物合成途径[95]
西南大学硕士学位论文数据分析算行为反应的选择率，选择率（%）=（气味源中橘蚜数或对照中橘效总橘蚜数）×100。利用 SPSS17.0 统计软件对成对数据进行方差分果与分析供试植株准备供试植株进行了 CTV 及其他常见病害病原的检测，如图 3.1 所示，均未扩增出了与 HLB、CTLV、CPV、CEV、HSVd、SDV 目的片段带，且各负对照以及水均无扩增，表明供试西蒙斯甜橙植株未受到、CPV、CEV、HSVd、SDV 病害病原的侵染，可用于下一步实验。
图 3.2 不同退火温度二重 RT-PCR 扩增结果M：DL2 000 分子量标准Fig.3.2 Duplex RT-PCR amplification with different amount of temperatureM: DL2 000 marker3.3.2.2 引物浓度的优化在退火温度优化之前，对 PCTV和 PCYVCV引物浓度进行了优化调整，以退火温度为 57 ℃进行 PCR 反应。结果（图 3.3，A）显示，二重 RT-PCR 反应体系中 PCYVCV引物浓度为 0.1 μmol·L-1，PUBQ引物浓度为 0.3 μmol·L-1，PCTV引物浓度从 0.1μmol·L-1增加到 0.15 μmol·L-1，CTV 的目的条带增亮，扩增效率增加，而 CYVCV的目的条带变弱，CYVCV 的扩增效率有所下降。二重 RT-PCR 反应体系中 PCTV引物浓度为 0.13 μmol·L-1，PUBQ引物浓度为 0.3 μmol·L-1，PCYVCV引物浓度从 0.1μmol·L-1增加到 0.2 μmol·L-1，CYVCV 的目的条带逐渐增亮，扩增效率提高，而CTV 的目的条带亮度变化不明显（图 3.3，B）。确定二重 RT-PCR 反应体系中 PCTV引物浓度为 0.13 μmol·L-1，PCYVCV引物浓度为 0.2 μmol·L-1， PUBQ引物浓度为 0.3μmol·L-1
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘响应溃疡病菌转录因子CsBZIP40的克隆及功能分析[J]. 贾瑞瑞,周鹏飞,白晓晶,陈善春,许兰珍,彭爱红,雷天刚,姚利晓,陈敏,何永睿,李强. 中国农业科学. 2017(13)
[2]南方水稻黑条矮缩病毒诱导的水稻挥发物及白背飞虱成虫对其组分的行为反应[J]. 王璐丰,胡奎,贺华良,丁文兵,李有志. 昆虫学报. 2017(04)
[3]烟粉虱的有效治理有赖于基础研究[J]. 闫凤鸣. 中国农业科学. 2016(13)
[4]巴氏新小绥螨对柑桔全爪螨处理的枳橙叶片挥发物的行为反应[J]. 胡军华,王雪莲,张耀海,姚廷山,刘浩强,李鸿筠,冉春. 应用昆虫学报. 2016(01)
[5]尤力克柠檬上一种新病害的生物学特性及RT-PCR检测[J]. 陈洪明,王雪峰,周彦,周常勇,郭俊,李中安. 植物保护学报. 2015(04)
[6]褐色橘蚜在五种柑橘上的取食行为差异[J]. 鲁卓越,陈文龙,何应琴,周常勇,王雪峰,李太盛. 植物保护学报. 2014(05)
[7]褐色橘蚜在健康与CTV植株上的EPG比较[J]. 何应琴,陈文龙,鲁卓越,周常勇,李中安,王雪峰,李太盛. 山地农业生物学报. 2014(02)
[8]3种甜樱桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 宗晓娟,王文文,魏海蓉,王甲威,陈新,徐丽,刘庆忠. 中国农业科学. 2014(06)
[9]褐色橘蚜中柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 李玲娣,周常勇,李中安,田晓,王永江,唐科志,周彦,刘金香. 中国农业科学. 2013(03)
[10]葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立[J]. 范旭东,董雅凤,张尊平,任芳,李亚惠. 园艺学报. 2012(05)
博士论文
[1]烟粉虱-双生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的调控机制[D]. 孙艳春.浙江大学 2016
[2]韧皮部杆菌亚洲种简单重复序列（SSR）多态性及其侵染甜橙后转录组学研究[D]. 黄爱军.西南大学 2014
[3]棉蚜Aphis gossypii Glover寄主型和迁飞型的研究[D]. 刘向东.南京农业大学 2003
硕士论文
[1]野生柑橘响应韧皮部杆菌亚洲种侵染的生物学和转录组学研究[D]. 胡燕.西南大学 2017
[2]CTV感染甜橙对褐色橘蚜适合度的影响及其分子机制的初步研究[D]. 关桂静.西南大学 2017
[3]RGSV侵染水稻后挥发物的变化对褐飞虱选择行为的影响[D]. 孙付森.福建农林大学 2015
[4]柑橘属植物基本类型中国特有种类不同组织器官挥发成分比较研究[D]. 李利改.西南大学 2014
[5]不同顶空分析法对植物挥发物测定的影响[D]. 杨莉.北京林业大学 2007
本文编号：3074621
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物中不同挥发物的生物合成途径[95]
西南大学硕士学位论文数据分析算行为反应的选择率，选择率（%）=（气味源中橘蚜数或对照中橘效总橘蚜数）×100。利用 SPSS17.0 统计软件对成对数据进行方差分果与分析供试植株准备供试植株进行了 CTV 及其他常见病害病原的检测，如图 3.1 所示，均未扩增出了与 HLB、CTLV、CPV、CEV、HSVd、SDV 目的片段带，且各负对照以及水均无扩增，表明供试西蒙斯甜橙植株未受到、CPV、CEV、HSVd、SDV 病害病原的侵染，可用于下一步实验。
图 3.2 不同退火温度二重 RT-PCR 扩增结果M：DL2 000 分子量标准Fig.3.2 Duplex RT-PCR amplification with different amount of temperatureM: DL2 000 marker3.3.2.2 引物浓度的优化在退火温度优化之前，对 PCTV和 PCYVCV引物浓度进行了优化调整，以退火温度为 57 ℃进行 PCR 反应。结果（图 3.3，A）显示，二重 RT-PCR 反应体系中 PCYVCV引物浓度为 0.1 μmol·L-1，PUBQ引物浓度为 0.3 μmol·L-1，PCTV引物浓度从 0.1μmol·L-1增加到 0.15 μmol·L-1，CTV 的目的条带增亮，扩增效率增加，而 CYVCV的目的条带变弱，CYVCV 的扩增效率有所下降。二重 RT-PCR 反应体系中 PCTV引物浓度为 0.13 μmol·L-1，PUBQ引物浓度为 0.3 μmol·L-1，PCYVCV引物浓度从 0.1μmol·L-1增加到 0.2 μmol·L-1，CYVCV 的目的条带逐渐增亮，扩增效率提高，而CTV 的目的条带亮度变化不明显（图 3.3，B）。确定二重 RT-PCR 反应体系中 PCTV引物浓度为 0.13 μmol·L-1，PCYVCV引物浓度为 0.2 μmol·L-1， PUBQ引物浓度为 0.3μmol·L-1
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘响应溃疡病菌转录因子CsBZIP40的克隆及功能分析[J]. 贾瑞瑞,周鹏飞,白晓晶,陈善春,许兰珍,彭爱红,雷天刚,姚利晓,陈敏,何永睿,李强. 中国农业科学. 2017(13)
[2]南方水稻黑条矮缩病毒诱导的水稻挥发物及白背飞虱成虫对其组分的行为反应[J]. 王璐丰,胡奎,贺华良,丁文兵,李有志. 昆虫学报. 2017(04)
[3]烟粉虱的有效治理有赖于基础研究[J]. 闫凤鸣. 中国农业科学. 2016(13)
[4]巴氏新小绥螨对柑桔全爪螨处理的枳橙叶片挥发物的行为反应[J]. 胡军华,王雪莲,张耀海,姚廷山,刘浩强,李鸿筠,冉春. 应用昆虫学报. 2016(01)
[5]尤力克柠檬上一种新病害的生物学特性及RT-PCR检测[J]. 陈洪明,王雪峰,周彦,周常勇,郭俊,李中安. 植物保护学报. 2015(04)
[6]褐色橘蚜在五种柑橘上的取食行为差异[J]. 鲁卓越,陈文龙,何应琴,周常勇,王雪峰,李太盛. 植物保护学报. 2014(05)
[7]褐色橘蚜在健康与CTV植株上的EPG比较[J]. 何应琴,陈文龙,鲁卓越,周常勇,李中安,王雪峰,李太盛. 山地农业生物学报. 2014(02)
[8]3种甜樱桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 宗晓娟,王文文,魏海蓉,王甲威,陈新,徐丽,刘庆忠. 中国农业科学. 2014(06)
[9]褐色橘蚜中柑橘衰退病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 李玲娣,周常勇,李中安,田晓,王永江,唐科志,周彦,刘金香. 中国农业科学. 2013(03)
[10]葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立[J]. 范旭东,董雅凤,张尊平,任芳,李亚惠. 园艺学报. 2012(05)
博士论文
[1]烟粉虱-双生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的调控机制[D]. 孙艳春.浙江大学 2016
[2]韧皮部杆菌亚洲种简单重复序列（SSR）多态性及其侵染甜橙后转录组学研究[D]. 黄爱军.西南大学 2014
[3]棉蚜Aphis gossypii Glover寄主型和迁飞型的研究[D]. 刘向东.南京农业大学 2003
硕士论文
[1]野生柑橘响应韧皮部杆菌亚洲种侵染的生物学和转录组学研究[D]. 胡燕.西南大学 2017
[2]CTV感染甜橙对褐色橘蚜适合度的影响及其分子机制的初步研究[D]. 关桂静.西南大学 2017
[3]RGSV侵染水稻后挥发物的变化对褐飞虱选择行为的影响[D]. 孙付森.福建农林大学 2015
[4]柑橘属植物基本类型中国特有种类不同组织器官挥发成分比较研究[D]. 李利改.西南大学 2014
[5]不同顶空分析法对植物挥发物测定的影响[D]. 杨莉.北京林业大学 2007
本文编号：3074621
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