细菌信号N-酰基高丝氨酸内酯与植物中受体GCR2相互作用的研究
发布时间：2021-04-01 15:41
革兰氏阴性细菌可以产生一种用于菌群活动的信号分子,即N-酰基高丝氨酸内酯（N-acyL-homoserine Lactones,AHLs）。近年来各项研究表明AHLs不仅能被革兰氏阴性细菌感知,同样也被植物感应,引发植物一系列生理生化活动。3-碳基己酯酰基高丝氨酸内酯（N-3-OxohexanoyL-DL-homoserine Lactone,3OC6-HSL）是植物许多病原菌产生的群体感应信号分子AHL中的一种,前期研究实验证明3OC6-HSL可以增强植物的抗盐能力及促进植物主根生长,可以在农作物增产抗病方面发挥重要的作用。实验室前期研究使用生物素和氚标记的信号分子,利用酶联免疫法、放射性配基法对AHL与GCR2蛋白的相互作用进行受体动力学分析,也分析了3OC6-HSL与GCR2结合的特异性、饱和性、可逆性和竞争性,发现GCR2作为潜在的G蛋白偶联受体与信号分子3OC6-HSL存在一定程度的结合作用。因此,证明GCR2与信号分子3OC6-HSL是否存在真正意义上的结合以及发生结合后3OC6-HSL的信号如何传递转导是本次研究的重点。在本次研究中,使用微量热泳动技术（MST）证明植物蛋...
【文章来源】：河北工业大学天津市 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白电泳鉴定诱导表达GCR2蛋白Fig.2.1SDS-PAGEanalysisofpurifiedandconcentratedproteinGCR2
protein Ladder；上清：超声后离心的上清液；流：结合镍柱后流出的菌液W3：Washing buffer 洗下的杂蛋白；E1-E5：Elution buffer 洗下的目的蛋图 2.2 GCR2 纯化后的 SDS-PAGE 检测Fig. 2.2 SDS-PAGE analysis of purified GCR2菌液上清(上清)、结合镍柱后流出液(流)、杂蛋白洗脱液(W1、液(E1-E4)分别进行 SDS-PAGE(图 2.2)。并对蛋白洗脱液(E 检测，其中 Western Blot 用 GCR2 一抗进行检测(图 2.3)。将 G导表达纯化（图 2.3），利用超虑离心管浓缩洗脱下的 GCR2Drop 2000 检测浓度为 0.5 mg/mL，并进行 SDS-PAGE 检测。浓缩过程中降解，可用于微量热泳动检测。
Marker GCR2rotein Ladder；1：纯化浓缩后2 浓缩后的 SDS-PAGE 和 wesestern blot analysis of purified CR2 与 AHLs 结合的受结合到蛋白 GCR2。微量同时非标记的各信号分子间的结合反应后，将样品
【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥响应3-羰基己酰基高丝氨酸内酯的膜蛋白质组分析[J]. 赵芊,牛亚丽,张肖晗,刘方,贾振华,马宏,宋水山. 河北农业大学学报. 2016(02)
[2]赤霉素信号在非生物胁迫中的作用及其调控机制研究进展[J]. 牛亚利,赵芊,张肖晗,艾秋实,宋水山. 生物技术通报. 2015(10)
[3]微量热泳动技术原理及其在研究生物分子互作方面的应用[J]. 艾秋实,曹向宇,赵芊,牛亚利,宋水山. 生物技术通报. 2015(06)
[4]细菌群体感应的蛋白质组学研究进展[J]. 苗春娟,刘方,贾振华,金国萍,马宏,宋水山. 生物学杂志. 2012(05)
[5]家蚕吡哆醛激酶基因定点突变及突变体功能[J]. 舒婷,张剑韵,黄龙全. 昆虫学报. 2011(09)
[6]3-羰基辛酰基高丝氨酸内酯诱导拟南芥根细胞Ca2+内流[J]. 张哲,张霞,边子睿,宋水山. 植物生理学报. 2011(09)
[7]N-酰基高丝氨酸内酯调控植物生长发育的研究进展[J]. 赵芊,宋水山. 植物生理学通讯. 2010(10)
[8]N-酰基高丝氨酸内酯介导的细菌与其真核寄主之间的信息交流[J]. 宋水山. 中国细胞生物学学报. 2010(02)
[9]分子对接方法的应用与发展[J]. 段爱霞,陈晶,刘宏德,刘秀辉,卢小泉. 分析科学学报. 2009(04)
[10]用酵母双杂交系统筛选与PEN-2蛋白胞内端相互作用的蛋白[J]. 黄秀梅,程鹏,刘润忠,张云武,洪水根,许华曦. 厦门大学学报(自然科学版). 2007(03)
博士论文
[1]水稻类受体激酶OsAPRLK1的定位和功能研究[D]. 张磊.河北师范大学 2008
[2]花粉PLC活性检测、cDNA克隆及功能分析[D]. 潘延云.河北师范大学 2003
硕士论文
[1]G蛋白偶联受体GCR2作为植物感应N-酰基高丝氨酸内酯受体功能的研究[D]. 张哲.河北工业大学 2014
[2]植物细胞膜上AHL结合位点及钙调素参与植物感应AHLs的研究[D]. 张超.河北工业大学 2014
[3]信号分子N-酰基高丝氨酸内酯诱导拟南芥根细胞胞内Ca2+浓度变化[D]. 张哲.河北工业大学 2011
[4]基于分子对接技术的小分子—蛋白质相互作用研究[D]. 赵琦.江南大学 2009
本文编号：3113581
【文章来源】：河北工业大学天津市 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白电泳鉴定诱导表达GCR2蛋白Fig.2.1SDS-PAGEanalysisofpurifiedandconcentratedproteinGCR2
protein Ladder；上清：超声后离心的上清液；流：结合镍柱后流出的菌液W3：Washing buffer 洗下的杂蛋白；E1-E5：Elution buffer 洗下的目的蛋图 2.2 GCR2 纯化后的 SDS-PAGE 检测Fig. 2.2 SDS-PAGE analysis of purified GCR2菌液上清(上清)、结合镍柱后流出液(流)、杂蛋白洗脱液(W1、液(E1-E4)分别进行 SDS-PAGE(图 2.2)。并对蛋白洗脱液(E 检测，其中 Western Blot 用 GCR2 一抗进行检测(图 2.3)。将 G导表达纯化（图 2.3），利用超虑离心管浓缩洗脱下的 GCR2Drop 2000 检测浓度为 0.5 mg/mL，并进行 SDS-PAGE 检测。浓缩过程中降解，可用于微量热泳动检测。
Marker GCR2rotein Ladder；1：纯化浓缩后2 浓缩后的 SDS-PAGE 和 wesestern blot analysis of purified CR2 与 AHLs 结合的受结合到蛋白 GCR2。微量同时非标记的各信号分子间的结合反应后，将样品
【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥响应3-羰基己酰基高丝氨酸内酯的膜蛋白质组分析[J]. 赵芊,牛亚丽,张肖晗,刘方,贾振华,马宏,宋水山. 河北农业大学学报. 2016(02)
[2]赤霉素信号在非生物胁迫中的作用及其调控机制研究进展[J]. 牛亚利,赵芊,张肖晗,艾秋实,宋水山. 生物技术通报. 2015(10)
[3]微量热泳动技术原理及其在研究生物分子互作方面的应用[J]. 艾秋实,曹向宇,赵芊,牛亚利,宋水山. 生物技术通报. 2015(06)
[4]细菌群体感应的蛋白质组学研究进展[J]. 苗春娟,刘方,贾振华,金国萍,马宏,宋水山. 生物学杂志. 2012(05)
[5]家蚕吡哆醛激酶基因定点突变及突变体功能[J]. 舒婷,张剑韵,黄龙全. 昆虫学报. 2011(09)
[6]3-羰基辛酰基高丝氨酸内酯诱导拟南芥根细胞Ca2+内流[J]. 张哲,张霞,边子睿,宋水山. 植物生理学报. 2011(09)
[7]N-酰基高丝氨酸内酯调控植物生长发育的研究进展[J]. 赵芊,宋水山. 植物生理学通讯. 2010(10)
[8]N-酰基高丝氨酸内酯介导的细菌与其真核寄主之间的信息交流[J]. 宋水山. 中国细胞生物学学报. 2010(02)
[9]分子对接方法的应用与发展[J]. 段爱霞,陈晶,刘宏德,刘秀辉,卢小泉. 分析科学学报. 2009(04)
[10]用酵母双杂交系统筛选与PEN-2蛋白胞内端相互作用的蛋白[J]. 黄秀梅,程鹏,刘润忠,张云武,洪水根,许华曦. 厦门大学学报(自然科学版). 2007(03)
博士论文
[1]水稻类受体激酶OsAPRLK1的定位和功能研究[D]. 张磊.河北师范大学 2008
[2]花粉PLC活性检测、cDNA克隆及功能分析[D]. 潘延云.河北师范大学 2003
硕士论文
[1]G蛋白偶联受体GCR2作为植物感应N-酰基高丝氨酸内酯受体功能的研究[D]. 张哲.河北工业大学 2014
[2]植物细胞膜上AHL结合位点及钙调素参与植物感应AHLs的研究[D]. 张超.河北工业大学 2014
[3]信号分子N-酰基高丝氨酸内酯诱导拟南芥根细胞胞内Ca2+浓度变化[D]. 张哲.河北工业大学 2011
[4]基于分子对接技术的小分子—蛋白质相互作用研究[D]. 赵琦.江南大学 2009
本文编号：3113581
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