基于RNA干涉技术的新型番茄抗枯萎病生物制剂开发

发布时间：2021-04-15 17:10

　　番茄是全世界重要的蔬菜作物之一,由镰刀菌属真菌番茄尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp.Lycopemsici,FOL）引起的番茄枯萎病是一种番茄生产中主要的病害,给全球番茄农业生产造成巨大的经济损失。miRNA是内源基因编码的长度约为20-24个核苷酸的非编码单链RNA分子,参与转录后基因表达调控。本研究用FOL/H20处理具有相似遗传背景的番茄感病品种Moneymaker和抗病品种Motelle,取处理24 h后的番茄根部材料构建四个文库:MM_H2O,MM_FOL,Mot_H2O和Mot_FOL。（1）利用高通量测序技术挖掘到一个参与番茄-病原菌互作过程的尖孢镰刀菌内源特异miRNA:folmiR1。（2）结合Northern blot和qRT-RCR验证,确认folmiR1在番茄尖孢镰刀菌侵染番茄植株中富集;为了排除被侵染番茄根系材料中番茄尖孢镰刀菌自身miRNA的干扰,通过分离被侵染番茄根系原生质体,利用qRT-PCR的方法检测到folmiR1,证实番茄尖孢镰刀菌folmiR... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１番茄枯萎病的防治方法［９］

碱基序列特异性识别并调控植物－病原菌相互作用相关基因的表达［２６，２７］。在植物和一些微??生物中，ＲＮＡｉ通过转录后基因沉默（ＰＴＧＳ）或转录基因沉默（ＴＧＳ）调节参与植物－病原体??相互作用和植物免疫途径中重要基因的表达（图１．２）?［２６，２８］。??３??

〇?ＩｎｈｌＷｔｏｉｏｆＣＷＯＣ?（Ｂ?？ｆｍ〇ｆＵｒｆ？?〇?Ｔｗｗｒｔｐｔｔｏｎｆｅｃｔｏｒ／ＭＨＫｔｈｍｏｆ?０?ｒｓｓ??图１．２植物免疫途径。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｐｌａｎｔ?ｉｍｍｕｎｅ?ｐａｔｈｗａｙ．??１．３小ＲＮＡ?（ｓＲＮＡ）在植物抗病过程中的功能??１．３．１?ｓＲＮＡ的功能和分类??大多数小ＲＮＡ?（ｓＲＮＡ）由ＲＮａｓｅｌｌｌ型核糖核酸酶Ｄｉｃｅｒ样（ＤＣＬ）蛋白加工，成熟??的ｓＲＮＡ与Ａｒｇｏｎａｕｔｅ?（ＡＧＯ）蛋白结合，通过碱基互补的方式，在转录后水平剪切或降解??ｍＲＮＡ，或抑制翻译过程，调剂靶基因的表达［２９－３３］。基于它们的前体结构和生物发生，??５１＾八可以分为１１１化１＇〇１＾八（１１１丨１＾八）和５１１１３１１丨１＾兩１１＾咖八（５丨１＾八）。１１１丨１＾八来自发夹??结构前体，不依赖于ＲＮＡ依赖性ＲＮＡ聚合酶（ＲＤＲ）或ＲＮＡ扩增机制，而内源性ｓｉＲＮＡ??（ｅｎｄｏ－ｓｉＲＮＡ）是由长双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）的反义转录或植物特异性ＲＮＡ聚合酶（如ＲＮＡ??聚合酶（Ｐｏｌ）?ＩＶ和ＲＤＲ）的活性产生［３４－３６］。??成熟ｍｉＲＮＡ由２０－２４个核苷酸组成，其由具有独特茎环结构的单链初级ｍｉＲＮＡ加工??［３７］。ｍｉＲＮＡ通过与特定靶基因的开放阅读框或非翻译区（ＵＴＲ）结合而负调节基因表达??［３８］。在植物中，ｍｉＲＮＡ参与发育过程，如器官分离，叶片发育，极性建立，侧根形成，??花器官特性和繁殖的发展［３９－４３］。??１．３．２?ｍｉＲＮＡ在植物－病原菌互作过程中的功能研究进展??在病原菌侵染条件下

【参考文献】：
期刊论文
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[3]二硝基苯胺类化合物对棉花抗枯萎病的诱导作用及机理[J]. 葛银林,张元恩.  植物保护学报. 1995(01)



本文编号：3139747