钾高效烤烟品系的抗黑胫病突变体筛选

发布时间：2021-04-22 17:40

　　烟草黑胫病是一种世界范围内普遍发生且危害严重的根茎类病害,严重影响到烟叶的产量及质量。为提高田间综合性状表现优良的钾高效烤烟品系对烟草黑胫病的抗病能力,实现优质钾高效烤烟品系的推广价值。本研究根据烟草黑胫病病原菌的生长特性,首先选择5种适宜黑胫病菌生长的常规培养基,结合烟草根系分泌物的诱导作用,选出致病力较强的黑胫病菌发酵液;然后将黑胫病菌发酵液纯化,获得活性较好的致病因子组分（即黑胫病菌无菌发酵液活性成分）;最后以致病因子为选择压,对田间表现综合性状优良的5种钾高效烤烟品系的花药进行抗黑胫病筛选。主要研究结果如下:1.诱导黑胫病菌致病力培养基的筛选。黑胫病菌在5种培养基（10%V8、胡萝卜、燕麦、烟汁、马铃薯）中暗培养,采用叶片离体注射法,观察所收集的5种黑胫病菌发酵液的叶片注射区变化。结果表明,马铃薯培养基（PDA）培养获得的无菌发酵液注射效果最明显,其烟叶的注射区在注射7d后出现明显的过敏性坏死反应（hypersensitive resistance,HR）,且黑胫病菌培养7d后取得的发酵液注射效果最好,因此选择马铃薯培养基（PDA）为诱导黑胫病菌强致病力的最适培养基。采用叶片离... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 烟草钾素营养
        1.1.1 钾素对烟叶品质的影响
        1.1.2 钾高效基因型烤烟钾素营养特性
    1.2 烟草黑胫病
        1.2.1 病原菌的分类及形态特征
        1.2.2 黑胫病菌的生理特性
        1.2.3 黑胫病菌的培养特性
        1.2.4 黑胫病的致病机理
        1.2.5 黑胫病发病条件及症状
        1.2.6 黑胫病防治
        1.2.7 烟草黑胫病的抗性鉴定
    1.3 花药培养
        1.3.1 花药培养产生机理
        1.3.2 影响雄核发育和花药培养的因素
        1.3.3 花培幼苗的倍性鉴定
        1.3.4 花培幼苗的加倍
        1.3.5 花培品种在生产中的应用
    1.4 抗病突变体研究现状
    1.5 本论文的研究目的与意义
第2章 烟草黑胫病菌致病力的诱导
    2.1 材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 培养基
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 方法
        2.2.1 黑胫病菌的培养
        2.2.2 黑胫病菌无菌发酵液的制备
        2.2.3 烟草根系分泌物的收集
        2.2.4 烟叶过敏性坏死反应（hypersensitiveresistance,HR）检测
    2.3 结果与分析
        2.3.1 五种培养基诱导黑胫病菌致病力的比较分析
        2.3.2 添加烟草根系分泌物可增强黑胫病菌的致病力
    2.4 小结与讨论
第3章 黑胫病菌致病因子的粗分离
    3.1 材料
        3.1.1 供试材料
        3.1.2 培养基
        3.1.3 主要仪器设备
    3.2 方法
        3.2.1 烟草根系分泌物的收集
        3.2.2 黑胫病菌无菌发酵液制备
        3.2.3 去除菌体及样品组成的初步简化
        3.2.4 致病因子的富集
        3.2.5 活性部位分析
        3.2.6 发酵液活性成分致病性测试
    3.3 结果与分析
        3.3.1 黑胫病菌发酵液活性成分致病性检测结果
        3.3.2 活性组分检测结果
    3.4 小结与讨论
第4章 花药抗黑胫病突变体的筛选
    4.1 材料
        4.1.1 供试烟草品种
        4.1.2 培养基
        4.1.3 化学试剂
        4.1.4 主要仪器设备
    4.2 方法
        4.2.1 烟草花药消毒
        4.2.2 选择压浓度的确立
        4.2.3 单倍体幼苗的鉴定
        4.2.4 单倍体幼苗的加倍
        4.2.5 花培植株的黑胫病抗性鉴定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 筛选抗黑胫病突变体的最适选择压的确立
        4.3.2 花培幼苗的倍性鉴定
        4.3.3 花培幼苗的加倍
        4.3.4 花培植株的黑胫病抗性鉴定
    4.4 小结与讨论
第5章 全文总结
    5.1 总结
    5.2 本研究的后续计划
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3154190