我国葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗药性检测

发布时间：2021-04-26 17:08

　　灰葡萄孢属病原菌（Botrytis）是世界排名第二真菌病害的病原,它具有腐生性强,寄主范围十分广泛等特点;由灰葡萄孢引起的灰霉病不仅是葡萄生产田中的常见病害,也是产后贮藏过程中的毁灭性病害。目前,国内外主要采用化学防治的方法来控制灰霉病,但随着杀菌剂的长时间和大剂量使用,灰霉菌已经对多种药剂产生了不同程度的抗药性,甚至多药抗性,因此,本研究对山东、湖北、黑龙江、山西、云南和辽宁6个省的主要葡萄产区灰霉菌进行了啶酰菌胺、多菌灵、腐霉利、咯菌腈、异菌脲和嘧霉胺的抗性检测,抑霉唑作用方式的探究,抑霉唑、福美双与其它6种主要杀菌剂之间的交互抗性关系,并建立了基于高通量测序技术的抗性分子检测方法用于快速检测葡萄灰霉病菌的抗药性。主要研究结果如下:1.2016-2017年我国葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂EC50的测定试验在收集到的1494株葡萄灰霉病菌中随机选择120株葡萄灰霉病菌株,利用传统菌丝生长速率法测定灰霉菌株对多菌灵、腐霉利、异菌脲、咯菌腈、嘧霉胺、福美双的EC50和孢子萌发法测定灰霉菌株对啶酰菌胺的EC50,结果显示多菌灵的平均EC50最大,其对葡萄灰霉病菌的毒力最弱抗性最强,咯菌腈的平均... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 葡萄灰霉病概述
        1.1.1 葡萄灰霉病的发生与分布
        1.1.2 葡萄灰霉病的症状和危害
        1.1.3 葡萄灰霉病的综合防治
    1.2 葡萄灰霉病防治中主要杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.1 苯并咪唑类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.2 二甲酰亚胺类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.3 苯吡咯类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.4 烟酰胺类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.5 苯胺基嘧啶类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.6 咪唑类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
        1.2.7 有机硫类杀菌剂的作用机制和抗药性研究概况
    1.3 葡萄灰霉病菌多药抗性研究
    1.4 葡萄灰霉病菌的抗药性检测方法
        1.4.1 传统检测方法
        1.4.2 分子检测方法
    1.5 本研究的目的及意义
    1.6 技术路线
第二章 我国葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗性检测
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试菌株
        2.1.2 培养基
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂
        2.1.5 试验药剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 葡萄灰霉病菌的采集
        2.2.2 葡萄灰霉病菌的分离与纯化
        2.2.3 灰霉菌种的保存和活化
        2.2.4 2012-2015年葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗药性初测
        2.2.5 2016-2017年我国葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗药性检测
    2.3 结果与分析
        2.3.1 葡萄灰霉病菌对主要杀真菌剂的EC50测定
        2.3.2 2012-2015年葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗药性检测
        2.3.3 2016-2017年我国葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂抗性情况
    2.4 小结与讨论
第三章 抑霉唑的作用方式和抑霉唑、福美双与其它主要杀菌剂之间交互抗性关系的探究
    3.1 实验材料
        3.1.1 供试菌株
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 主要培养基
        3.1.4 主要试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 抑霉唑对葡萄灰霉病菌作用方式的探究
        3.2.2 葡萄灰霉病菌对抑霉唑与其他杀菌剂之间的交互抗性关系探究
        3.2.3 葡萄灰霉病菌对福美双与其他杀菌剂之间的交互抗性关系探究
    3.4 结果与分析
        3.4.1 抑霉唑对葡萄灰霉病菌的作用方式探究
        3.4.2 葡萄灰霉病菌对抑霉唑与其他杀菌剂之间的交互抗性关系探究
        3.4.3 葡萄灰霉病菌对福美双与其它杀菌剂之间的交互抗性关系
    3.5 小结与讨论
第四章 葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂的抗药性高通量检测方法的建立
    4.1 试验材料
        4.1.1 供试菌株
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 主要试剂
        4.1.4 培养基
        4.1.5 主要试剂的配制
    4.2 试验方法
        4.2.1 葡萄灰霉病菌DNA的提取
        4.2.2 葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂抗药性高通量检测方法的建立
        4.2.3 灰霉菌抗药性检测程序DFRB的开发
    4.3 结果与分析
        4.3.1 高通量测序方法检测得出的葡萄灰霉病菌对主要杀菌剂抗性频率和抗性突变位点频率
        4.3.2 传统抗药性检测方法检验高通量测序技术的结果
    4.4 小结与讨论
第五章 全文结论
参考文献
致谢
附录
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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[7]油菜菌核病菌对腐霉利的抗性及其机制[D]. 曹敏娟.扬州大学 2008
[8]纳他霉素对灰葡萄孢的活性及作用机理研究[D]. 张鹏.山东农业大学 2008
[9]番茄灰霉病菌和油菜菌核病菌对嘧霉胺的敏感性基线及番茄灰霉病菌抗药性研究[D]. 贾晓华.南京农业大学 2004
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本文编号：3161789