叶螨共生菌Wolbachia与宿主互作T4SS系统特征和功能研究
发布时间：2021-05-25 12:06
共生菌Wolbachia感染多种节肢动物,并且在多种叶螨中均有感染,对宿主的生殖调控起到一定的作用。Wolbachia胞内共生菌可以在宿主体内造成持续稳定的侵染,可以在宿主中通过细胞一代一代的传递下去包括水平传播和垂直传播。Wolbachia引起宿主生殖异常最常见的一种方式就是诱导胞质不亲和（cytoplasmic incompatibility,CI）。尽管目前关于CI机制的研究很多,但是造成CI分子机理仍不是很清楚。中国叶螨种群中Wolbachia分布广泛,本研究用PCR技术以及多位点序列分析技术（multilocus sequence typing,MLST）对三种叶螨截形叶螨、二斑叶螨以及红叶螨中感染的Wolbachia进行多样性及进化分析,同时对宿主进行遗传杂交实验探究Wolbacha对宿主生殖调控的影响。结果显示三种叶螨感染4个不同株系的Wolbachia,且均属于B大组,其中wTupe3和wTtr1亲缘关系较近,与wTpue1亲缘关系最远。这四个不同Wolbachia株系感染的叶螨中,当感染Wolbachia雄虫和不感染雌虫交配以后,引起强弱不同程度的CI现象,其中wTp...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 Wolbachia概述及其在节肢动物中的研究进展
1.1 Wolbachia的形态及分布
1.2 Wolbachia的系统发育
1.3 Wolbachia在宿主中的传播方式
2. Wolbachia与宿主之间的互作研究
2.1 线虫中的Wolbachia的研究
2.2 Wolbachia作为一种虫媒病控制的工具
2.3 Wolachia与寄主互作研究
2.4 Wolbachia通过T4SS与宿主细胞互作
2.5 细菌中T4SS结构功能及其效应器预测
3. 本研究的目的及意义
第二章 叶螨共生菌Wolbachia进化分析及CI影响
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 叶螨总DNA的提取
1.3 叶螨中ITS、wsp序列的扩增
1.4 叶螨内Wolbachia的五个持家基因的扩增
1.5 PCR产物纯化
1.6 连接及转化反应
1.7 序列测定与分析
1.8 筛选100%感染和100%不感染Wolbachia品系
1.9 杂交实验
2 结果与分析
2.1 三种叶螨鉴定结果
2.2 三种叶螨中感染Wolbachia株系鉴定
2.3 Wolbachia对三种叶螨产卵量和CI的影响
2.4 Wolbachia株系系统发育分析
3 讨论
第三章 叶螨Wolbachia中四型分泌系统的识别与鉴定
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 叶螨总DNA的提取
1.3 叶螨总RNA的提取
1.4 PCR检测叶螨内的共生菌Wolbachia
1.5 筛选100%感染和100%不感染的叶螨品系
1.6 T4SS引物设计与制备
1.7 PCR产物纯化与连接转化
2. 结果
2.1 T4SS基因的排列情况
2.2 T4SS的RT-PCR结果
3. 讨论
第四章 Wolbachia四型分泌系统(T4SS)保守性和功能分析
1. 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 DNA提取
1.3 T4SS基因序列扩增
1.4 PCR产物纯化及连接转化
1.5 序列比对与蛋白预测
1.6 数据处理
2. 结果与分析
2.1 不同株系Wolbachia中基于virB11的进化以及MLST分析
2.2 比较不同Wolbachia株系中vir基因的核酸及氨基酸的突变
2.3 在wTpue1株系中ribA同源基因在A、B大组中的功能结构域
3. 讨论
全文总结
参考文献
攻读硕士期间论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Type Ⅳ secretion system in Helicobacter pylori:a new insight into pathogenicity[J]. Department of Medical Microbiology and Parasitology,School of Medical Technology,Jiangsu University,Zhenjiang 212001,China (Zhong Q,Shao SH,Cni LL,Ju XL and Dong SR)School of Medicine,Beihua University,Jilin 132001,China (Mu RH). Chinese Medical Journal. 2007(23)
硕士论文
[1]共生菌Wolbachia和Cardinium对中国截形叶螨和皮氏叶螨生殖调控作用的研究[D]. 朱路雨.南京农业大学 2012
[2]共生菌Wolbachia的分子检测及其对美洲棘蓟马种群适合度的影响[D]. 董菁.西北农林科技大学 2012
本文编号：3205312
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 Wolbachia概述及其在节肢动物中的研究进展
1.1 Wolbachia的形态及分布
1.2 Wolbachia的系统发育
1.3 Wolbachia在宿主中的传播方式
2. Wolbachia与宿主之间的互作研究
2.1 线虫中的Wolbachia的研究
2.2 Wolbachia作为一种虫媒病控制的工具
2.3 Wolachia与寄主互作研究
2.4 Wolbachia通过T4SS与宿主细胞互作
2.5 细菌中T4SS结构功能及其效应器预测
3. 本研究的目的及意义
第二章 叶螨共生菌Wolbachia进化分析及CI影响
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 叶螨总DNA的提取
1.3 叶螨中ITS、wsp序列的扩增
1.4 叶螨内Wolbachia的五个持家基因的扩增
1.5 PCR产物纯化
1.6 连接及转化反应
1.7 序列测定与分析
1.8 筛选100%感染和100%不感染Wolbachia品系
1.9 杂交实验
2 结果与分析
2.1 三种叶螨鉴定结果
2.2 三种叶螨中感染Wolbachia株系鉴定
2.3 Wolbachia对三种叶螨产卵量和CI的影响
2.4 Wolbachia株系系统发育分析
3 讨论
第三章 叶螨Wolbachia中四型分泌系统的识别与鉴定
1. 材料与方法
1.1 供试材料
1.2 叶螨总DNA的提取
1.3 叶螨总RNA的提取
1.4 PCR检测叶螨内的共生菌Wolbachia
1.5 筛选100%感染和100%不感染的叶螨品系
1.6 T4SS引物设计与制备
1.7 PCR产物纯化与连接转化
2. 结果
2.1 T4SS基因的排列情况
2.2 T4SS的RT-PCR结果
3. 讨论
第四章 Wolbachia四型分泌系统(T4SS)保守性和功能分析
1. 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 DNA提取
1.3 T4SS基因序列扩增
1.4 PCR产物纯化及连接转化
1.5 序列比对与蛋白预测
1.6 数据处理
2. 结果与分析
2.1 不同株系Wolbachia中基于virB11的进化以及MLST分析
2.2 比较不同Wolbachia株系中vir基因的核酸及氨基酸的突变
2.3 在wTpue1株系中ribA同源基因在A、B大组中的功能结构域
3. 讨论
全文总结
参考文献
攻读硕士期间论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Type Ⅳ secretion system in Helicobacter pylori:a new insight into pathogenicity[J]. Department of Medical Microbiology and Parasitology,School of Medical Technology,Jiangsu University,Zhenjiang 212001,China (Zhong Q,Shao SH,Cni LL,Ju XL and Dong SR)School of Medicine,Beihua University,Jilin 132001,China (Mu RH). Chinese Medical Journal. 2007(23)
硕士论文
[1]共生菌Wolbachia和Cardinium对中国截形叶螨和皮氏叶螨生殖调控作用的研究[D]. 朱路雨.南京农业大学 2012
[2]共生菌Wolbachia的分子检测及其对美洲棘蓟马种群适合度的影响[D]. 董菁.西北农林科技大学 2012
本文编号：3205312
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3205312.html
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