过氧化氢酶在豌豆蚜免疫防御反应中的作用研究

发布时间：2021-06-06 08:36

　　豌豆蚜（Acyrthosiphon pisum）是首个公开基因组的不完全变态昆虫,通过比较基因组学分析,人们发现豌豆蚜缺少应对病原菌侵染的许多免疫相关基因,这些重要基因的缺失暗示了豌豆蚜具有独特的免疫系统。我们前期研究指出活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）在豌豆蚜的免疫防御反应中起重要作用,但是过量的ROS会对豌豆蚜自身造成氧化损伤。过氧化氢酶（Catalase,CAT）是生物体内广泛存在的一种关键的抗氧化酶,能够将生物体产生的过氧化氢（H₂O₂）分解成H₂O和O₂。本研究通过RNA干扰技术对过氧化氢酶基因进行沉默,初步研究ROS-豌豆蚜-病原菌三者之间的关系,探索过氧化氢酶在豌豆蚜免疫防御反应中的作用。主要结果如下:1革兰氏阳性菌藤黄微球菌（Micrococcus luteus）感染引起豌豆蚜体内ROS的显著上升,并且诱导豌豆蚜Catalase基因的上调,这说明ROS和过氧化氢酶参与豌豆蚜对病原菌的免疫防御反应;2将Catalase基因沉默之后,豌豆蚜体内H_... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
    1.1 蚜虫免疫
    1.2 ROS代谢
        1.2.1 ROS的种类
        1.2.2 ROS的产生
        1.2.3 Haber-Weiss反应
        1.2.4 抗氧化系统
    1.3 抗氧化系统组分的分布
    1.4 过氧化氢酶结构与种类
    1.5 过氧化氢酶与活性氧
    1.6 本研究的目的及意义
第二章 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试昆虫
        2.1.2 实验菌株
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 豌豆蚜的细菌感染
        2.2.2 豌豆蚜总RNA的提取、纯化、反转
        2.2.3 dsRNA合成
        2.2.4 过氧化氢酶基因的干扰
        2.2.5 豌豆蚜体内H_2O_2浓度检测
        2.2.6 菌落数检测（Colony forming unit, CFU）
        2.2.7 干扰后豌豆蚜存活率、细菌CFU数及H_2O_2浓度检测
    2.3 数据分析及作图
        2.3.1 qRT-PCR数据分析
        2.3.2 统计学分析
第三章 结果与分析
    3.1 序列分析
    3.2 感染细菌后豌豆蚜的存活率
    3.3 感染细菌后豌豆蚜体内细菌CFU数
    3.4 感染细菌后豌豆蚜H_2O_2水平变化
    3.5 感染细菌后过氧化氢酶基因表达量变化
    3.6 RNA干扰效率
    3.7 干扰过氧化氢酶后豌豆蚜H_2O_2水平变化
    3.8 干扰过氧化氢酶对细菌感染引起的豌豆蚜H_2O_2水平变化的影响
    3.9 干扰过氧化氢酶后豌豆蚜体内细菌数变化
    3.10 干扰过氧化氢酶后豌豆蚜感染细菌后的存活率
第四章 讨论与结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]豌豆蚜体内参与抵御细菌感染引起的氧化胁迫的过氧化物氧化还原酶2的鉴定及分子特性分析（英文）[J]. 张永栋,李君兰,陈金红,马力,陈康康,吕志强.  昆虫学报. 2017(03)
[2]细菌感染引起的家蚕中肠免疫反应研究（英文）[J]. Lei ZHANG,Yan-wen WANG,Zhi-qiang LU.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(10)



本文编号：3214013