番茄斑萎病毒N基因的VIGS载体构建

发布时间：2021-06-08 07:13

　　番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV）严重危害多种经济作物和园艺植物,其N基因与病毒的侵染力密切相关,将N基因直接构建到VIGS载体上研究其致病功能目前鲜见报道。本研究将TSWV N基因构建到pTRV-PTV00载体上,注射本氏烟,通过qRT-PCR定量分析发现先接种TSWV后注射沉默载体的植株抗TSWV效率达57.60%,先注射沉默载体后接种TSWV的植株抗TSWV效率达99.14%。结果表明先注射载体后接种TSWV的N基因沉默效率更高。TSWV N基因VIGS载体的构建可为研究N基因在病毒致病等方面的功能提供前期材料,并为TSWV抗病育种和田间绿色防控提供一定的理论依据。 

【文章来源】：植物病理学报. 2020,50(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 本氏烟叶片总RNA提取及N基因序列扩增
    1.3 VIGS载体构建
    1.4 农杆菌注射
    1.5 qRT-PCR检测N基因的沉默效率
    1.6 数据统计
2 结果与分析
    2.1 N基因片段克隆及测序结果分析
    2.2 N基因的 VIGS 重组载体构建与鉴定结果
    2.3 N基因qRT-PCR标准曲线的建立
    2.4 TRV-N诱导的基因沉默在本氏烟中抗TSWV效率
3 结论与讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Virus-induced Phytoene Desaturase（PDS） Gene Silencing Using Tobacco Rattle Virus in Lilium × formolongi[J]. Hua Xu,Leifeng Xu,Panpan Yang,Yuwei Cao,Yuchao Tang,Guoren He,Suxia Yuan,Jingyi Lei,Jun Ming.  Horticultural Plant Journal. 2019(01)
[2]非洲菊花瓣瞬时表达和病毒诱导的基因沉默（VIGS）系统的建立[J]. 唐宜,李凌飞,王小菁.  植物生理学报. 2017(03)
[3]VIGS载体在果树中的应用研究进展[J]. 张新华,季娜娜,闵德栋,邵淑君,李富军.  果树学报. 2017(04)



本文编号：3217934