来源于茶拟盘多毛孢的一个新金色病毒的鉴定及生物学特性的研究
发布时间：2021-06-23 04:58
茶轮斑病是危害茶树[Camellia sinensis（L.）O.Kuntze]生产的重要病害,严重时可导致叶片大量脱落,影响茶叶品质和产量,目前在我国茶园中广泛发生。茶拟盘多毛孢（Pestalotiopsis theae）是引起茶轮斑病的优势种。我们前期在田间分离获得了一株致病力丧失的茶拟盘多毛孢菌株LI-41,其较正常菌株表现出菌落形态异常,菌丝生长速度缓慢。本研究是针对菌株LI-41生物学性状发生变化的原因进行了探索,所得结果如下:对菌株LI-41和正常菌株（TP-2-2W）的菌丝进行双链RNA（double stranded RNA,ds RNA）的提取,发现LI-41菌株中含有4条ds RNA片段（ds RNA1-4）,随机克隆以及末端克隆测序显示,其大小分别为3387、2831、2599和932 nt,分析推测每一条ds RNA分别编码一个独立的开放阅读框（Open-Reading Frame,ORF）,依次命名为ORF1、ORF2、ORF3和ORF4。将获得的4条ds RNA序列编码蛋白采用BLASTp与登录在NCBI中的序列比对,显示该病毒ORF1-3编码蛋白与金色病毒...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株TP-2-2W和LI-41ITS基因片段的PCR扩增产物电泳分析
的观察：相比前期保存的正常菌株 TP-2-2W 菌丝纹圈且生长速度正常（图 3.2A）；而菌株 LI-41 菌，生长缓慢（图 3.2A）。度的测定：根据菌丝的生长速度测定结果显示速度较菌株 LI-41 的快，约为 9 mm/d，而菌株 LI-4 3.3A）。的测定：在有伤接种的情况下，菌株 LI-41 的致2 B），在接种 6 d 后测量得到 TP-2-2W 和 LI-41 的.18 cm，致病力显著差异。在无伤接种的情况下，而 LI-41 的则无致病力（图 3.2 B）。测得 TP-2-2W 病斑直径为 0 cm。由此表明，菌株 LI-41 在有伤件下无致病力（图 3.3 B）。
3.3 茶拟盘多毛孢 TP-2-2W 和 LI-41 的菌丝生长速度（A）和致病力柱状图（B）ig.3.3 Bar graphy of growth rates (A) and virulences (B) of strains TP-2-2W and LI-41株 LI-41 中核酸的分析鉴定株 LI-41 中核酸的提取及酶处理验证提取的菌株 LI-41 和 TP-2-2W 的核酸进行 DNaseI、S1 核酸酶处理，琼脂电泳后发现，只有菌株 LI-41 中有 4 条 dsRNA 条带，大小在 930-3400 之别命名为 dsRNA1-dsRNA4（图 3.4）。株 LI-41 中 dsRNA 全长 cDNA 序列的克隆与分析对菌株 LI-41 的 4 条 dsRNA 条带琼脂糖凝胶电泳后，对 4 条 dsRNA 条带化回收，经过随机克隆以及末端克隆后，得到 4 条 dsRNA 带的全长 cDNA
【参考文献】：
期刊论文
[1]几种杀菌剂对茶轮斑病菌的室内毒力及田间药效[J]. 郭世保,陈俊华,史洪中. 贵州农业科学. 2014(10)
[2]茶业可持续发展中的植保问题[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1999(01)
[3]世界茶树病虫区系分析(英文)[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1989(01)
[4]世界茶树病原名录[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1988(02)
博士论文
[1]葡萄孢属植物病原菌真菌病毒研究[D]. 吴明德.华中农业大学 2012
硕士论文
[1]禾谷镰刀菌AMT1基因的功能研究[D]. 王光辉.西北农林科技大学 2010
本文编号：3244278
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株TP-2-2W和LI-41ITS基因片段的PCR扩增产物电泳分析
的观察：相比前期保存的正常菌株 TP-2-2W 菌丝纹圈且生长速度正常（图 3.2A）；而菌株 LI-41 菌，生长缓慢（图 3.2A）。度的测定：根据菌丝的生长速度测定结果显示速度较菌株 LI-41 的快，约为 9 mm/d，而菌株 LI-4 3.3A）。的测定：在有伤接种的情况下，菌株 LI-41 的致2 B），在接种 6 d 后测量得到 TP-2-2W 和 LI-41 的.18 cm，致病力显著差异。在无伤接种的情况下，而 LI-41 的则无致病力（图 3.2 B）。测得 TP-2-2W 病斑直径为 0 cm。由此表明，菌株 LI-41 在有伤件下无致病力（图 3.3 B）。
3.3 茶拟盘多毛孢 TP-2-2W 和 LI-41 的菌丝生长速度（A）和致病力柱状图（B）ig.3.3 Bar graphy of growth rates (A) and virulences (B) of strains TP-2-2W and LI-41株 LI-41 中核酸的分析鉴定株 LI-41 中核酸的提取及酶处理验证提取的菌株 LI-41 和 TP-2-2W 的核酸进行 DNaseI、S1 核酸酶处理，琼脂电泳后发现，只有菌株 LI-41 中有 4 条 dsRNA 条带，大小在 930-3400 之别命名为 dsRNA1-dsRNA4（图 3.4）。株 LI-41 中 dsRNA 全长 cDNA 序列的克隆与分析对菌株 LI-41 的 4 条 dsRNA 条带琼脂糖凝胶电泳后，对 4 条 dsRNA 条带化回收，经过随机克隆以及末端克隆后，得到 4 条 dsRNA 带的全长 cDNA
【参考文献】：
期刊论文
[1]几种杀菌剂对茶轮斑病菌的室内毒力及田间药效[J]. 郭世保,陈俊华,史洪中. 贵州农业科学. 2014(10)
[2]茶业可持续发展中的植保问题[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1999(01)
[3]世界茶树病虫区系分析(英文)[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1989(01)
[4]世界茶树病原名录[J]. 陈宗懋,陈雪芬. 茶叶科学. 1988(02)
博士论文
[1]葡萄孢属植物病原菌真菌病毒研究[D]. 吴明德.华中农业大学 2012
硕士论文
[1]禾谷镰刀菌AMT1基因的功能研究[D]. 王光辉.西北农林科技大学 2010
本文编号：3244278
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3244278.html
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